一种马立克氏病病毒血清1型荧光定量PCR试剂盒及其应用制造技术

技术编号:25827007 阅读:43 留言:0更新日期:2020-10-02 14:10
本发明专利技术涉及一种检测马立克氏病病毒血清1型毒株的荧光定量PCR试剂盒及其在禽用生物制品质量控制中的应用。所述试剂盒含有用于检测马立克氏病病毒血清1型毒株的一对特异性引物和相应的Taqman探针。本发明专利技术用于检测马立克氏病病毒血清1型,特异性好,除马立克氏病病毒血清1型毒株能扩增出特异性曲线外,其他禽用病毒类生物制品及其生产原材料均未扩增出特异性曲线;本发明专利技术敏感性高,用本发明专利技术建立的方法检测不同PFU的马立克氏病病毒血清1型毒株,检出限度为0.006PFU;检测10倍梯度稀释的标准品质粒,检出限度为32.8copies/μL;本发明专利技术可用于禽用生物制品中外源性马立克氏病病毒的检测,对于马立克氏病病毒的检测、禽用生物制品质量控制等具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种马立克氏病病毒血清1型荧光定量PCR试剂盒及其应用
本专利技术涉及一种马立克氏病病毒(Marker’sdiseasevirus,MDV)血清1型荧光定量PCR试剂盒及其在禽用生物制品质量控制中的应用,属于生物技术和动物病毒学领域。
技术介绍
马立克氏病(Marker’sdisease,MD)是鸡的一种急性或亚急性淋巴细胞增生性疾病,主要表现为外周神经、皮肤、虹膜及其他组织器官出现单核细胞浸润。该病的病原马立克氏病病毒(Marker’sdiseasevirus,MDV)属于α疱疹病毒亚类的Mardivirus属,根据病毒的血清学反应,分为3个血清型,即MDV血清1型(禽疱疹病毒2型)、MDV血清2型(禽疱疹病毒3型)和MDV血清3型(火鸡疱疹病毒1型)。与其它疱疹病毒相比,禽疱疹病毒最显著的特性是细胞结合性,即在细胞培养上不产生游离于细胞培养液中有感染性的病毒粒子(特别是MDV血清1型毒株)。基于MDV的生物学特性,现有外源性MDV检验方法主要是通过鸡胚法观察尿囊膜病变、细胞法检查细胞病变、鸡检查法通过琼脂扩散实验测定抗体。但随着兽用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种马立克氏病病毒血清1型荧光定量PCR试剂盒,其特征在于所述试剂盒还包含特异性引物、相应的Taqman探针、qPCR Buffer(2×)、酶、标准品质粒、无酶水;/n所述的特异性引物和相应的Taqman探针,其序列分别为:/n序列1上游引物(MDV1-UL19-F):5′-attcctggat gcaaacccgt-3′20/n序列2下游引物(MDV1-UL19-R):5′-tattccacgt tccgtcagcc-3′20/n序列3Taqman探针(MDV1-UL19-P):5′-HEX-agcctgccat cagcgcgtat-BHQ1-3′20;/n所述标准品质粒为将基因合成...

【技术特征摘要】
1.一种马立克氏病病毒血清1型荧光定量PCR试剂盒,其特征在于所述试剂盒还包含特异性引物、相应的Taqman探针、qPCRBuffer(2×)、酶、标准品质粒、无酶水;
所述的特异性引物和相应的Taqman探针,其序列分别为:
序列1上游引物(MDV1-UL19-F):5′-attcctggatgcaaacccgt-3′20
序列2下游引物(MDV1-UL19-R):5′-tattccacgttccgtcagcc-3′20
序列3Taqman探针(MDV1-UL19-P):5′-HEX-agcctgccatcagcgcgtat-BHQ1-3′20;
所述标准品质粒为将基因合成所述引物针对的目的片段连接到pEASY-Blunt载体得到的。


2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于该试剂盒使用的荧光定量PCR反应体系为20.0μL,包含:10.0μLqPCRBuffer(...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈晓春苏佳赵炜吴华伟黄小洁曹明慧邓永孔冬妮薛青红
申请(专利权)人:中国兽医药品监察所
类型:发明
国别省市:北京;11

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1