一种超敏分子锁钥免疫聚合酶链式反应检测方法技术

本发明专利技术公开了一种超敏分子锁钥免疫聚合酶链式反应检测方法，包括下列步骤：(1)利用生物大分子之间的特异的结合识别目标生物大分子，生物大分子之间的特异的结合会形成夹心复合物，夹心复合物的一个单体上连接有DNA片段；(2)使用聚合酶链式反应扩增夹心复合物连接的DNA片段对目标蛋白定量；(3)使用分子锁钥来消除DNA气溶胶对测试系统的干扰，使信噪比提高了3～4个数量级，灵敏度也提高了3个数量级。本发明专利技术属于医学检验学技术领域，具体是提供了一种高灵敏度检测医学样本中的蛋白质目标生物大分子的超敏分子锁钥免疫聚合酶链式检测方法，该检测方法在诊断和监测病原体、肿瘤、神经退行性疾病和遗传病等领域有比较高的使用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种超敏分子锁钥免疫聚合酶链式反应检测方法
本专利技术属于医学检验学
，具体是指一种超敏分子锁钥免疫聚合酶链式反应检测方法。
技术介绍
蛋白质分子标记物的检测是医学检验的重要课题。常见的检测蛋白质的方法包括酶联免疫实验(ELSIA)、放射性免疫技术(RIA)、化学发光免疫实验(CLIA)和免疫荧光(IF)等等。另外，质谱、流式技术、蛋白质芯片等亦可用于蛋白的检测。上述方法的灵敏度可以满足常见的应用场景，但是，对于一些对灵敏度要求极高的蛋白质检测应用却不适用。TakeshiSano等在1992报导了使用免疫PCR法可以测检到数量为10-23mole的蛋白；SumanSharma等在2019年报导了可以使用实时免疫PCR法，测试结核分枝杆菌MPT64和PstS1的浓度，检测范围可达0.95pg/mL-95ng/mL。然而免疫PCR法尚不适合在临床中使用，原因是免疫反应中开放式操作会引入大量的DNA气溶胶，而免疫PCR法具有极高的灵敏度，这些气溶胶会污染阴性样本，造成大量假阳性结果出现。
技术实现思路
<br>针对上述情况，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种超敏分子锁钥免疫聚合酶链式反应检测方法，其特征在于，包括下列特征：/n(1)利用生物大分子之间的特异的结合识别目标生物大分子：生物大分子之间的特异的结合会形成夹心复合物，所述夹心复合物的一个单体上连接有DNA片段，所述单体连接DNA片段的方式包括共价偶联方式和非共价偶联方式；/n(2)使用聚合酶链式反应扩增夹心复合物连接的DNA片段对目标生物大分子定量；/n(3)使用分子锁钥来消除DNA气溶胶对测试系统的干扰：所述分子锁钥包括锁分子DNA片段和钥分子DNA片段，所述锁分子DNA片段和钥分子DNA片段为两条部分互补的DNA片段。/n

【技术特征摘要】
1.一种超敏分子锁钥免疫聚合酶链式反应检测方法，其特征在于，包括下列特征：
(1)利用生物大分子之间的特异的结合识别目标生物大分子：生物大分子之间的特异的结合会形成夹心复合物，所述夹心复合物的一个单体上连接有DNA片段，所述单体连接DNA片段的方式包括共价偶联方式和非共价偶联方式；
(2)使用聚合酶链式反应扩增夹心复合物连接的DNA片段对目标生物大分子定量；
(3)使用分子锁钥来消除DNA气溶胶对测试系统的干扰：所述分子锁钥包括锁分子DNA片段和钥分子DNA片段，所述锁分子DNA片段和钥分子DNA片段为两条部分互补的DNA片段。


2.根据权利要求1所述的一种超敏分子锁钥免疫聚合...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱应竹，谢正顺，
申请(专利权)人：广州水石基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44