用于检测卵巢疾病的方法和组合物技术

提供了用于鉴定患者样品中的卵巢癌的方法和组合物。本发明专利技术的方法包括检测身体样品中至少一种生物标志的超表达，其中所述的生物标志选择性地在卵巢癌中超表达。在优选的实施方案中，所述的身体样品为血清样品。本发明专利技术的生物标志包括在卵巢癌中选择性超表达的任何基因或蛋白质，包括，例如急性期反应物、脂蛋白、调节补体系统中涉及的蛋白质、编程性细胞死亡调节物、结合血红蛋白、血红素或铁的蛋白质、细胞结构蛋白、使代谢副产物解毒的酶、生长因子和激素转运蛋白。在本发明专利技术的某些方面中，使用生物标志－特异性抗体在蛋白质水平上或使用核酸杂交技术在核酸水平上检测所关注的生物标志的超表达。进一步提供了用于实施本发明专利技术方法的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于检测卵巢癌的方法和组合物。
技术介绍
卵巢癌是导致世界范围内的人群中显著的发病率和死亡率的主要原因。根据来自美国癌症协会(American Cancer Society)的数据，仅在美国，据估计每年就有23,400个卵巢癌新病例。另外，每年有13,900个与卵巢癌-相关的死亡病例，这使得它在美国成为女性中占第五位的主要癌症杀手。因为80％-90％的发生卵巢癌的女性无该病的家族史，所以研究的努力已经集中在研发在该病的早期过程中检测卵巢癌的检验和诊断方案。然而，迄今为止尚无研发的检验试验证实可降低卵巢癌的死亡率。癌症的分类决定了适宜的治疗并且有助于确定预后。使用公认的等级和病期系统按照组织学(即″分级″)和疾病的程度(即″疾病分期″)分类卵巢癌。在I级中，肿瘤组织得到充分分化。在II级中，肿瘤组织中度充分分化。在III级中，肿瘤组织分化不足。III级的预后不及I级或II级。I期一般限于一侧(IA期)或两侧(IB期)卵巢周围的囊中，不过，在某些I期(即IC期)癌症中，在腹水、腹膜冲洗液中或卵巢表面上可以检测到恶性细胞。II期涉及肿瘤从一侧或两侧卵巢扩散或转移至其它骨盆结构。在IIA期中，肿瘤扩散或已经转移至子宫、输卵管或它们两者。IIB期涉及肿瘤转移至骨盆。IIC期为带有额外要求的IIA或IIB期，该要求为在腹水、腹膜冲洗液中或卵巢表面上可以检测到恶性细胞。在III期中，肿瘤包括至少一种到达小肠或网膜的恶性扩散，已经形成用显微镜可见(IIIA期)或肉眼可见(＜2厘米直径，IIIB期；＞2厘米直径，IIIC期)大小的盆外腹膜植入物或已经转移至腹膜后或腹股沟淋巴结(IIIC期的交替指示剂)。在IV期中，可以检测到远距离(即非腹膜)的肿瘤转移灶。尚不了解卵巢癌不同病期的实际期限，但是认为每个期限至少约为1年(Richart等，1969，Am.J.Obstet.Gynecol.105386)。预后随指定病期的增加而下降。例如，诊断为I、II、III和IV期卵巢癌的患者的5-年存活率分别为80％-95％、57％、25％和8％。目前，约60％以上的卵巢癌在III期或IV期才得到诊断，此时的预后处在最差状态。卵巢癌的高死亡率可归因于在卵巢癌的早期患者中缺乏特异性症状，由此使得难以进行早期诊断。患有卵巢癌的患者通常出现非特异性的病症，诸如异常阴道出血、胃肠道症状、泌尿道症状、下腹痛和泛发性腹胀。这些患者很少出现类肿瘤性症状或清楚地表明为卵巢癌的症状。由于不存在早期预兆，所以低于约40％的患有卵巢癌的患者存在I期或II期癌症。如果可以在早期检测到卵巢癌，那么可以显著提高对该病的控制，此时治疗一般会更为有效。可以通过从患者中采集常规的医学史并且通过进行体格检查、X射线检查以及化学和血液学研究部分诊断卵巢癌。可以预示卵巢癌的血液学试验包括分析CA125和DF3蛋白的血清水平和溶血磷脂酸(LPA)的血浆水平。对卵巢的触诊和超声技术，特别是包括阴道内超声和彩色多普勒流动超声技术可以有助于检测卵巢肿瘤和从良性卵巢囊肿分化成卵巢癌。然而，对卵巢癌的确诊一般仍然需要进行剖腹探查术。作为卵巢癌诊断标志的血清CA125水平的在先应用表明该方法对用作一般的检验方法而言表现出的特异性不足。精确的算法在解释获自患者的连续回顾性样品中CA125水平中的应用提高了该方法的特异性，而不会将卵巢癌的检测变动到早期(Skakes，1995，Cancer 762004)。检验LPA以便检测妇科癌症，包括卵巢癌表现出了约96％的灵敏度和约89％的特异性。然而，基于CA125的检验方法和基于LPA的检验方法因在患有非卵巢癌的疾病的患者血清中分别存在CA125和LPA而受到阻碍。例如，已知血清CA125水平与月经、妊娠、胃肠和肝脏疾病(例如结肠炎和肝硬化)、心包炎、肾病和各种非卵巢恶性肿瘤相关。例如，已知血清LPA受存在的非卵巢妇科恶性肿瘤影响。对卵巢癌所具有的特异性高于目前对CA125和LPA的检验方法的检验方法可以为广泛人群提供对早期卵巢癌的检验。还在临床研究中证实了经阴道的声象图测试不能作为检验卵巢癌的可靠的方法。例如，在评价声象图检验在14,469位无症状女性中的功效中，对每个检测的侵害性癌症病例取5200次超声的平均值(VanNage11等2000，Gynecol.Oncol.77350-356)。在另一项研究中，Liede等同时使用了经阴道的声象图检查和CA125以便筛选处于高危卵巢癌中的女性(2002，J.CHn.Oncol.201570-1577)。Liede等得出结论，联合的检验方法在降低卵巢癌的发病率或死亡率中无效。因此，USPreventive Services Task Force已经推荐从定期检查中排除对卵巢癌的常规检验(Goff，等2004，JAMA 222710)。新近，已经将肿瘤mRNA与正常组织mRNA进行了比较以便使用cDNA微阵列鉴定癌组织中的增量调节基因(即卵巢癌标志)。已经通过这种技术鉴定了Prostasin、骨桥蛋白、HE4和多种其它标志。然而，cDNA微阵列手段的局限在于在肿瘤中的转录活性不一定准确地反映出组织中所述蛋白质的水平或该蛋白质在组织中的活性。例如，仅在肺癌肿瘤中的基因百分比较小表示mRNA与其相应蛋白质水平之间具有统计学显著的相关性(Chen等2002，Clin.Cancer Res.82290-2305)。另外，大量翻译后的改变可以在未在RNA水平上反映出改变的蛋白质中发生。由于用于检测卵巢癌的已知方法的成本以及有限的灵敏度和特异性，所以目前无法在广泛人群中进行检验。此外，为诊断对卵巢癌适应征检验为阳性的患者的卵巢癌而进行剖腹术的需要限制了广泛人群检验的理想性。因此，对研发基于基因或蛋白质的卵巢癌标志的表达的更具有灵敏性和特异性的检验和诊断方法存在迫切需求。概括地说，如果能检测出早期卵巢癌，那么患者的存活率和生活质量就可以得到改善。因此，对检测卵巢癌，特别是早期卵巢癌的灵敏性和特异性方法存在迫切的需求。
技术实现思路
提供了用于诊断卵巢癌的组合物和方法。本专利技术的方法包括检测至少一种生物标志在身体样品中的超表达，其中检测所述的生物标志的超表达可以特异性鉴定预示卵巢癌的样品。本专利技术的方法可以将预示卵巢癌的样品与预示良性增殖的样品区别开来。因此，该方法依赖于检测在卵巢癌情形中选择性超表达，而在正常细胞或未预示临床疾病的细胞中未超表达的生物标志。在具体的实施方案中，本专利技术的方法可有利于诊断早期卵巢癌。本专利技术的生物标志为在卵巢癌中选择性超表达的蛋白质和/或基因。特别关注的是在早期卵巢癌中超表达的生物标志。生物标志包括例如急性期反应物(例如蛋白酶抑制剂和炎性蛋白)；脂蛋白；调节补体系统中涉及的蛋白质；编程性细胞死亡调节物；结合血红蛋白、血红素或铁的蛋白质、细胞结构蛋白、使代谢副产物解毒的酶、生长因子和激素转运蛋白。检测本专利技术生物标志基因或蛋白质的超表达能够区分预示卵巢疾病的样品与正常细胞或未预示临床疾病的细胞(例如良性增殖)。可以在蛋白质或核酸水平上评价生物标志的超表达。在某些实施方案中，提供了免疫化学技术，它们使用抗体检测患者血清样品中生物标志蛋白的超表达。在本专利技术的该方面中，使用针对所关本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于诊断患者的卵巢癌的方法，所述的方法包括检测身体样品中至少一种生物标志的超表达，其中检测所述生物标志的超表达可特异性鉴定预示卵巢癌的样品，且其中所述的生物标志选自急性期反应物、脂蛋白、调节补体系统中涉及的蛋白质、编程性细胞死亡调节物、结合血红蛋白、血红素或铁的蛋白质、细胞结构蛋白、使代谢副产物解毒的酶、生长因子和激素转运蛋白组成的组。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：WF小拜尔，TM维内塔，JW格罗克，RH布雷修斯，
申请(专利权)人：三路影像公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]