分析亚磷酸、三乙膦酸铝或同时分析两者的方法技术

分析一种或多种存在量小于或等于５ｍｇ／ｋｇ试样的农药化合物的方法，该方法包括如下步骤：ａ）制备试样，ｂ）任选地稀释制备的试样，ｃ）用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）／串联质谱（ＭＳ／ＭＳ）直接分析任选稀释的试样。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利说明 本专利技术涉及农药化合物分析领域。这些方法用于监测农药化合物施加后的性能，这些方法也用于这些农药化合物的行销授权程序中。 可用本专利技术分析方法分析的化合物是用于保护植物的化合物以及这些生物活性化合物的一些代谢物化合物。一部分代谢物也可能具有生物活性。 农药化合物的分析方法是已知的。具体地说，确定饮水或地面水中三乙膦酸铝(fosetyl-Al)残留物及其主要代谢物、亚磷酸的分析方法是已知的。 这样一种已知的方法使用(三甲基甲硅烷基)偶氮甲烷(TMSD)作为衍生试剂(derivatizing agent)。 一般来说，这种方法包括如下步骤 -浓缩水试样； -用(三甲基甲硅烷基)偶氮甲烷衍生一等分浓缩试样(用甲基取代氢原子)； -经用二氯甲烷液-液分配提纯衍生的试样。 该方法用使用半毛细管柱的气相色谱法进行，用亚磷型火焰光度检测器(或FPD)检测，而且以外加标准物作为参照物进行定量。也可以使用热离子检测器。 该已知的方法按如下路线l进行 该方法的检测极限(LOD)为如下 -对于三乙膦酸铝 -0.05μg/l饮用水(矿泉水或自来水) -0.05μg/l地面水(河水) -对于亚磷酸 -0.7μg/l饮用水(矿泉水或自来水) -2.5μg/l地面水(河水)。 该方法的定量极限(LOQ)为如下 -对于三乙膦酸铝 -0.1μg/l饮用水(矿泉水或自来水) -1μg/l地面水(河水) -对于亚磷酸 -2.0(g/l饮用水(矿泉水或自来水) -4.0(g/l地面水(河水)。 该已知的分析方法已用于如下底物(substrate)矿泉水、自来水和罗纳河水。通过分析含有接近于定量极限或10倍于定量极限的三乙膦酸铝和亚磷酸的未处理浓缩参比试样，已证实该分析方法对于各种类型的水是有效的。 对这些浓缩试样的分析得到三乙膦酸铝或亚磷酸的回收率，并与预计的理论值相比较。 作为另一种已知的分析方法，可以提到Ghazay d’Azergues(法国)，Goch(德国)和Seville(西班牙)采用的分析土壤中存在的三乙膦酸铝或亚磷酸残留物的方法。 该方法也使用(三甲基甲硅烷基)偶氮甲烷，并同样按路线1进行。 在该方法过程中，通过在氨缓冲溶液的存在下进行摇动，从土壤中提取三乙膦酸铝或亚磷酸残留物，然后用离子交换树脂从提取物中除去存在的阳离子，并从试样中蒸发掉水，最后在(三甲基甲硅烷基)偶氮甲烷的作用下将所得的提取物衍生化。 接下来，用使用半毛细管柱、火焰光度检测器(亚磷型)和外加标准物的气相色谱进行定量。 该方法对于每一种化合物的定量极限(LOQ)为0.100mg/kg。 将参比试样浓缩到接近于三乙膦酸铝或亚磷酸的定量极限，也可高达该极限的100倍。 另一种分析残留物的已知方法涉及分析来源于水果和蔬菜的植物试样中的三乙膦酸铝或亚磷酸残留物。 该方法也使用(三甲基甲硅烷基)偶氮甲烷，并同样按路线1进行。 在该方法过程中，通过在水和乙腈的混合物中进行研磨，从植物试样中提取三乙膦酸铝或亚磷酸残留物。接着，用C18盒提纯该提取物，然后在(三甲基甲硅烷基)偶氮甲烷的作用下将所得的提取物衍生化。 接下来，用使用半毛细管柱、火焰光度检测器(亚磷型)和外加标准物的气相色谱进行定量。 除蛇麻草(hop)以外，该已知方法对于每一种产物的定量极限为0.50mg/kg。对于蛇麻草，三乙膦酸铝的定量极限为2.0mg/kg，亚磷酸的定量极限为20.0mg/kg。 该方法已用于葡萄、橙子、香蕉、草莓、生菜和黄瓜试样。将该参比试样浓缩，特别是浓缩至定量极限。 另一种分析残留物的已知方法涉及分析动物组织或动物源产品(如牛奶、牛肉、牛肾、牛肝或蛋)中的三乙膦酸铝或亚磷酸残留物。 根据本研究，通过在水/乙腈混合物(50/50，对于牛奶为20/80)进行双重研磨，从试样中提取出待分析化合物的残留物。 接着，用C18盒(除牛奶外)提纯等份提取物。提纯的提取物用(三甲基甲硅烷基)偶氮甲烷溶液进行衍生化。 该分析方法也按路线1进行。 定量用使用DB Wax柱和亚磷型火焰光度检测器的气相色谱进行。 定量的极限为如下 -对于牛肉、牛肾、牛肝或蛋中的三乙膦酸铝或亚磷酸为0.50mg/kg， -对于牛奶中的三乙膦酸铝或亚磷酸为0.10mg/kg。 就该方法而言，制备和分析未处理的参比试样，并把试样浓缩至定量极限，以及浓缩至该极限的几倍。 刚才提到的已知分析方法符合1996年第46号欧洲指令(1996年7月16日的96/46/EC)的规定，特别是就如下性能而言 -对于每一种底物和每一个值 -平均回收率应为70-110％； -表示为变化系数(有关试样的标准偏差与平均值之比，用百分数表示)的重复率应至多为20％； -每种底物的总变化系数(包括所有值)应至多为20％。 另一种分析三乙膦酸铝的已知方法记载在题目为“用液相色谱/电雾化串联质谱快速测定生菜中的三乙膦酸铝残留物”的文章中(Hernanden等人，Journalof AOAC International，Vol.86，No.4，2003)。 上述的方法涉及定量分析来源于生菜的植物试样中的三乙膦酸铝残留量。该方法需要如下步骤通过高速混合器用水进行提取，然后把5倍稀释的提取物注射到液相色谱中。 因此，在加入乙酸四丁基铵离子对剂之后，用与电雾化串联质谱偶联的液相色谱对三乙膦酸铝进行定量分析。 据报道，对浓缩至2和0.2mg/kg的生菜试样进行分析。定量极限为0.2mg/kg，而三乙膦酸铝的检测极限为0.05mg/kg。 然而，许多已知的分析方法需要化学衍生化步骤。这种附加的步骤使分析复杂化，并大大延长分析时间。另外，实施这个步骤需要专家，并增加这些方法的经济成本。 另外，在这种衍生化步骤中，所用的衍生化试剂可以是TMSD、偶氮甲烷或其它替代衍生化试剂。除了高成本以外，这些衍生化试剂还是使用时具有相当危险的反应试剂。在使用这些衍生化试剂时遇到的危险中，可以提到它们的毒性和爆炸性。使用这些试剂也产生高的费用。 另外，这些已知的方法包括许多处理步骤(蒸发、重新溶解、试样转移)，从而增加了成本，并分散了待分析的化合物。这种化合物的分散也会产生环境影响的问题，特别在重新处理这些分析方法产生的流出物时。 此外，这些已知方法的主要缺点是对于特定的化合物没有专一性。缺少专一性会导致保护和定量性能相似的化合物，而不能区分。其它已知方法的缺点例如是只能分析三乙膦酸铝，而不能同时分析亚磷酸。 一些已知的方法仅针对特定的底物进行描述，例如，一种已知的方法仅涉及来源于生菜的特定植物组织。 最后，这些已知的方法不可能达到某些更严格的定量极限，特别是由最近法则规定的定量极限，如1996年7月16日发布的指令96/46/EC。 现已发现一种分析方法，它能提供上述问题的解决方案，或能防止这些已知方法的缺点。 因此，本专利技术涉及一种分析农药化合物残留物的方法。 本专利技术方法可适用于分析农药化合物，不论它们是杀真菌剂、除草剂、杀虫剂，还是生长调节剂。 优选的是，本专利技术分析方法用于分析杀真菌化合物的残留物。 特别优选的是，本专利技术分析方法用于分析三乙膦酸铝和亚磷酸残留物。本文档来自技高网...

【技术保护点】
分析一种或多种存在量小于或等于０．００００５ｍｇ／ｋｇ试样的农药化合物的方法，该方法包括如下步骤：－制备试样，－任选地稀释制备的试样，－用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）／串联质谱（ＭＳ／ＭＳ）直接分析任选稀释的试样。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：D罗萨逖，C韦奈，
申请(专利权)人：拜尔农科股份有限公司，
类型：发明
国别省市：FR[法国]