Diels-Alder型加合物合成代谢途径中的FAD依赖氧化酶Ma-2及应用制造技术

本发明专利技术公开了Diels‑Alder型加合物合成代谢途径中的FAD依赖氧化酶Ma‑2及应用。本发明专利技术提供了如下蛋白：SEQ ID No.4所示Ma‑2蛋白或其经一个或几个氨基酸残基取代和/或缺失和/或添加，或序列具99％、95％、90％、85％或者80％以上同源性且具相同功能的蛋白，或N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。本发明专利技术所提供的Ma‑2因具有FAD依赖氧化酶的特征结构域，能催化二烯体与查尔酮类化合物双键间发生[4+2]环化反应形成D‑A型加合物。本发明专利技术，对于生产D‑A型加合物及研究酶促D‑A型[4+2]环化反应机制具有重要的理论及实际意义。

【技术实现步骤摘要】
Diels-Alder型加合物合成代谢途径中的FAD依赖氧化酶Ma-2及应用
本专利技术涉及药用植物基因工程领域，具体涉及Diels-Alder型加合物合成代谢途径中的FAD依赖氧化酶Ma-2及应用。
技术介绍
药用植物有效成分的形成是植物次生代谢途径中特有基因的产物。随着植物功能基因组研究的广泛与深入，独具特色又有广阔应用前景的药用植物次生代谢合成相关功能基因的研究逐渐成为研究的热点，这些基因的克隆将为诠释药用植物有效成分的生物合成途径及其调控机制，为药材品质的形成提供理论基础，同时为利用生物技术提高目标成分含量或直接生产有效成分或中间体带来广阔的应用空间。桑是我国重要的传统中药材，含有桑药用部位的中药复方达200种以上。桑叶、桑椹、桑根皮、桑枝均可入药，其中桑叶祛风清热，凉血明目；桑葚补血滋阴，生津润燥；桑白皮(桑除去栓皮的干燥根皮)清肺平喘，行水消肿；桑枝祛风湿，利关节。20世纪70年代以来，国内外学者系统研究了白桑、山桑、鲁桑、蒙桑等桑种的化学成分，分离鉴定芳香类、多羟基生物碱类、香豆素类和三萜类等多种具有良好生物活性的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蛋白质，为如下任一所示蛋白质：/n(A1)氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的蛋白质；/n(A2)将SEQ ID No.4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；/n(A3)与(A1)-(A2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且具有相同功能的蛋白质；/n(A4)在(A1)-(A3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。/n

【技术特征摘要】
1.蛋白质，为如下任一所示蛋白质：
(A1)氨基酸序列如SEQIDNo.4所示的蛋白质；
(A2)将SEQIDNo.4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；
(A3)与(A1)-(A2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且具有相同功能的蛋白质；
(A4)在(A1)-(A3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。


2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。


3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为基因；所述基因是如下任一所述的DNA分子：
(B1)SEQIDNo.2所示的DNA分子；
(B2)在严格条件下与(B1)限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；
(B3)与(B1)-(B2)限定的DNA序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。


4.含有权利要求2或3所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因细胞系。


5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为含有权利要求2或3所述核酸分子的重组酵母；
进一步地，所述酵母为毕赤酵母。


6.权利要求1所述蛋白质在作为Diels-Alder型加合物合成代谢途径中的FAD依赖氧化酶中的应用。


7.权利要求1所述蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：王瑞杉，戴均贵，王升，郭娟，康传志，黄璐琦，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11