青光眼的诊断和治疗药物制造技术

本发明专利技术提供了诊断青光眼的方法，包括检测患者样本中Ｗｎｔ通路组分或卷曲相关蛋白基因产物的异常水平或生物活性。本发明专利技术还涉及鉴定抗青光眼化合物的方法以及筛检卷曲相关蛋白激动剂或拮抗剂的方法。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供了诊断和治疗青光眼的方法和组合物。2.
技术介绍
音光眼青光眼是一组眼病，其特征在于^L神经变性。它是导致世界范围内 失明的首要原因。发生青光眼的一个主要危险因素是家族史。业已阐释 了几种不同的青光眼遗传方式。原发性先天性青光眼或嬰儿青光眼是一种遗传性疾病，其特征在于 眼内房水回流系统发育异常，导致眼内压增高，glove或角膜增大(即眼 积水)，视神经损伤，最终导致视觉损害。原发性开角型青光眼(POAG)是一种常见疾病，其特征在于视神经 萎缩，导致视野缺损，最终失明。根据发病年龄和临床表现的不同，POAG 又主要被分为两组。青年发病的POAG通常在较大儿童或青年期发病， 进展迅速，病情严重，伴随较高的眼内压。该型POAG对医学治疗反应 较差，通常需要进行眼科手术治疗。成年或晚发型POAG是青光眼中最 常见的类型。其症状较青年发病的POAG为轻，发展也更加緩慢，发病 年龄不定，通常在40岁以后。该型POAG的眼内压轻度或中度升高，对 于常规监测的医学治疗反应满意。不幸的是，由于该病的进展比较緩慢而 且没有痛感，因此通常都是在视神经已经发生不可逆性损伤后才^支发现。两种类型的POAG通常都与眼内压升高有关，而眼内压升高是由于 房水通过小梁网回流时受到抑制导致的。POAG中人小梁网(HTM)的 病理生理学特征在于细胞外基质组分增加，而小梁网细胞数量减少。因 此，有可能是由于HTM细胞在结构、功能或数量上的缺陷影响了 POAG的发病机理。POAG的病理生理学还涉及人巩膜筛板(HLC)细胞，业 已显示该细胞拥有的蛋白表达模式与HTM类似(Steely et al. (2000) Exp. Eye Res 70: 17-30) 因此，POAG的常见起因可能在于对神经视网膜损 伤最具作用的两种组织。因此，为了 了解POAG的分子发病机理并制定 独特治疗方式，确定并了解HTM和HLC的分子控制机制至关重要。业已显示，培养的HTM细胞表达多种生长因子受体mRNA,而且， 业已显示，这些表达的受体具有功能，因为应用外源性生长因子可以引 起生理反应(Wordinger et al. (1998) Invest Ophthalmol Vis Sci 39: 1575-89)。在体内，这些受体可能通过房水中存在的生长因子(aquecrine/旁 分泌)或小梁网细胞本身合成或局部释放的生长因子(自分泌)来激活。 实际上，业已显示，多种TGF-b同工型可以显著抑制EGF刺激的小梁网 细胞增殖，而FGF-1, TGF-a， EGF, IL-la， IL-lb， HGF， TNF-a, PDGF-AA和 IGF-1可以显著刺激细胞外酸化(ibid)。通过高亲和力受体作用的特定 生长因子可能涉及HTM正常微环境的维持，也可能涉及POAG的发病 机理.对分子病理学的一种深入探讨源于这样的观察结果，即可以在人和结构(Wilson etal. (1993) Current Eye Res 12: 783-93).这些细胞骨架:支 变包括肌动蛋白微丝重組形成交联的肌动蛋白网络(CLANs)，而这种 结构改变可能是导致眼内高压的最终生理学改变(Clark etal, (1993) J Glaucoma4: 183-88) 4实际上，降压类固醇四氩可的松业已显示可以降 低由糖皮质激素诱导的眼内高压的眼内压(IOP)，而且还可以抑制这些 糖皮质激素介导的HTM细胞骨架方面的改变(Clark et al. (19%) Inv Ophthal & Vis Sci 37: 805-813 ) 美国专利5,925,748， 5,916,778和5,885,776披露了与GLC1A基因突 变相关的青光眼诊断方法，以及鉴定青光眼治疗的实验方法，所迷青光 眼治疗方法调节GLC1A基因编码的MYOC蛋白活性. 'W似信号通路Wnt基因家族编码在分化和发育过程中起关鍵作用的分泌型配体蛋 白。该家族包括至少15种脊推动物和无脊推动物基因，包括果蝇体节极 性基因W"g/ew以及一种脊推动物同系物/fl￡egra^/， Wnt的名字就是从 上述两种基因衍生的。Wnt蛋白似乎可以使很多发育和平衡过程变得容易。例如，脊推动物『"f/似乎在体节诱导肌节和建立中脑边界的过程中表现积极(见McMahon and Bradley (1990) Cell 62: 1073; Ku and Melton(1993) Development 119: 1161; Stem et al. (1995) Development 121: 367S)。在脊推动物原肠胚形成过程中，『"f3a,『W5fl和『"f56在原条 中的表达是独立而又有所重叠的。在原条区域，Wnt3a是唯一一种能够 产生背部(体节)中胚层的Wnt蛋白，而『w"a无效等位基因的纯合小 鼠没有形成前肢的尾部体节。在脊推动物肢体建立极性方面，『"f基因 也非常重要，正如业已显示的非脊推动物同系物w力g/ew,在昆虫肢体发 育过程中可以建立极性。在两种情况下，还与刺猬蛋白(Hedgehog)家族成员有相互作用.Wnt信号通路包括多种涉及Wnt/无翅蛋白信号传导的蛋白质，并与刺猬蛋白发育通路紧密相联。在果蝇中的无翅-刺謂蛋白(wingless-hedgehog) 通路中，分泌型无翅蛋白通过巻曲蛋白受体与邻近细胞结合， 介导细胞间的相互作用。然后巻曲蛋白受体激活Dishelveled蛋白，阻断 Zeste-white-3激酶对Armadillo蛋白(一种P-连环蛋白)的抑制作用。活 化的Armadillo蛋白可以与高迁移率组(HMG)蛋白LEF/TCF (淋巴增 强因子/T细胞因子)作用，促进细胞核表达刺猬蛋冷f7iW基因。刺邻蛋 白是一种分泌型蛋白质，可以通过另一个受体一一Patched蛋白与邻近 Wnt/无翅蛋白活化细胞的细胞结合.刺稍蛋白与Patched受体的结合，激 活细胞核表达无翅蛋白，然后该蛋白分泌，进一步加强与邻近刺猬蛋白 分泌细胞的相互信号作用.因此，Wnt/无翅蛋白-刺稩蛋白相互信号系统 在脊推动物和非脊推动物发育过程中，使两种邻近细胞的分化决定更加 容易。这导致了分化界线的穗定，其中一边組织分泌刺稩蛋白，而另一 边組织則产生无翅蛋白。实际上，细胞表面通过影响一个细胞与另一个 细胞以及细胞外基质的差异粘附，在发育和平衡过程中起到至关重要的 作用。而且， 一旦细胞差异粘附发生，Wnt/无翅蛋白-刺猬蛋白的过程作 用就会使邻近细胞层之间的后续信号更加容易。这种Wnt/无翅蛋白分界对于果蝇体节和附器的产生以及哺乳动物脑 和肢体的细分非常重要(Ingham (1994) Curr Biol 4:1; Niswander et al.(1994) Nature 371: 609; Wilder and Pernmon (1995) Development 121: 477)。在非洲爪塘(Xenopus)中，眼原基和耳泡的原肠胚形成后，巻 曲蛋白-2受体(xfz2)高度表达，在鸡中，Wnt基因家族中的一个特别成员『"f"，业已显示在晶状体和睫状边缘的色素和非色素层增殖上皮中表达(Jaso本文档来自技高网...

【技术保护点】
诊断青光眼的方法，包括检测患者样本中Ｗｎｔ通路组分或卷曲相关蛋白基因产物的异常水平或生物活性。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：AF克拉克，J芬格尔特，L麦克纳特，EM斯通，WH王，
申请(专利权)人：阿尔康公司，衣阿华大学研究基金会，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]