一种多菌种发酵椰蓉制备生物饲料的方法技术

本发明专利技术涉及生物饲料技术领域，特别涉及一种多菌种发酵椰蓉制备生物饲料的方法。该方法包括：将椰蓉和豆粕的混合物作为发酵底物，采用酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌组成混合菌种进行有氧发酵2～5天，再添加植物乳杆菌对发酵底物进行厌氧发酵5～15天，通过两步固态发酵从而得到发酵椰蓉生物饲料。三种菌种的活菌数比例为(27～54):(1.9～5.7):36。本发明专利技术发酵饲料具有发酵香味，因此能提高畜禽的采食量。通过微生物发酵技术开发海南当地特色的地源性饲料，另外海南属于热带地区，微生物种类繁多，气候适合微生物生长，代谢能力强，能在短时间内能把大量的地源性农业废弃物转化为有用的发酵饲料，从而减少生产开发成本。

【技术实现步骤摘要】
一种多菌种发酵椰蓉制备生物饲料的方法
本专利技术涉及生物饲料
，特别涉及一种多菌种发酵椰蓉制备生物饲料的方法。
技术介绍
近年来，精饲料资源缺少并且价格昂贵，丰富的粗饲料资源因未被合理应用到饲料中而被大量废弃或烧毁，饲料资源匮乏从而影响畜牧业发展。微生物发酵饲料产业的发展是解决饲料短缺的重要途径之一，同时也使得地源性资源开发成为研究的热点。地源性发酵饲料具有独特的营养价值和良好的饲料品质，通过合理的发酵可以降低成本，提高当地养殖场的经济效益和减少环境污染，开发地源性发酵饲料有助于实现生态循环和健康养殖。海南椰子资源丰富，椰蓉作为海南特色的地源性资源大部分用在食品上，用在饲料上并未做深入研究。椰蓉含有很多活性物质，尤其是脂肪酸含量较高，有很大的饲料开发应用潜力和很高的经济价值，因此通过微生物发酵椰蓉生产畜禽饲料，有利于海南饲料资源开发利用。目前，还未见有采用椰蓉制备生物饲料的技术。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种多菌种发酵椰蓉制备生物饲料的方法。该方法利用复合微生物通过两步固体发酵椰蓉制备一种新型的营养丰富、适口性好、活菌含量高的高品质生物饲料，从而减少饲料抗生素添加剂的使用和环境污染，使得动物性食品安全得到保障，为海南椰蓉资源开发利用提供一定的理论依据和实践基础。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种椰蓉饲料的制备方法，包括如下步骤：以椰蓉和豆粕的混合物为发酵底物，先采用酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌组成混合菌种对发酵底物进行有氧发酵2～5天，然后再加入植物乳杆菌进行厌氧发酵5～15天，通过两步固态发酵得到发酵椰蓉生物饲料；所述酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌与植物乳杆菌的体积比例为(27～54):(1.9～5.7):36。作为优选，有氧发酵3天，所述厌氧发酵10天。作为优选，酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌与植物乳杆菌的体积比例为54:3.8:36。作为优选，酿酒酵母菌的菌液浓度为2.7×108CFU/mL，枯草芽孢杆菌的菌液浓度为1.9×107CFU/mL，植物乳杆菌的菌液浓度为3.6×108CFU/mL。作为优选，以质量百分含量计，酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌在发酵底物中的添加量为6％～10％。优选地，以质量百分含量计，酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌在发酵底物中的添加量为10％。作为优选，以质量百分含量计，有氧发酵的含水量为36％～40％。优选地，以质量百分含量计，所述有氧发酵的含水量为36％。作为优选，发酵底物中椰蓉(新鲜样本)与豆粕的质量比为(1～2)：(1～2)。优选地，发酵底物中椰蓉(新鲜样本)与豆粕的质量比为1：1。作为优选，酿酒酵母菌为活化后的酿酒酵母菌，酿酒酵母菌的活化方法为：将酿酒酵母菌接种到YPD液体培养基中，在30℃条件下培养8～12小时后，再次接种到YPD液体培养基中，在30℃、150r/min的条件下培养12～16小时。作为优选，枯草芽孢杆菌为活化后的枯草芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌的活化方法为：将枯草芽孢杆菌接种到LB液体培养基中，在37℃条件下培养8～12小时后，再次接种到LB液体培养基中，在37℃、150r/min的条件下培养12～16小时。作为优选，植物乳杆菌为活化后的植物乳杆菌，植物乳杆菌的活化方法为：将植乳乳杆菌置于MRS肉汤中，在37℃条件下厌氧培养8～12小时后，再次接种到MRS肉汤中，在37℃条件下厌氧过夜培养12～16小时。本专利技术还提供了由上述方法制得的椰蓉饲料。本专利技术提供了一种多菌种发酵椰蓉制备生物饲料的方法及椰蓉饲料。该方法包括如下步骤：将椰蓉和豆粕的混合物作为发酵底物，采用酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌复合菌种进行有氧发酵2～5天，再添加植物乳杆菌对发酵底物进行厌氧发酵5～15天，从而得到椰蓉发酵饲料。三种菌的活菌数比例为(27～54):(1.9～5.7):36。开发海南当地源性资源发酵饲料具有如下优势：①由于发酵饲料具有良好的发酵香味，因此能提高畜禽的采食量。②通过发酵技术开发利用海南当地特色的地源性饲料，海南属于热带地区，微生物种类繁多，气候适合微生物生长，代谢能力强，能在短时间内能把大量的农业废弃物等地源性资源转化为优质发酵饲料，从而减少生产开发成本。③受限的条件少，海南具有得天独厚的自然环境，发酵饲料产出效率高。饲料生产不需要占用很大空间。发酵过程中产生大量的有益微生物及代谢产物和消化酶，有利于调节机体肠道的微生态平衡，提高动物机体对营养物质的消化、吸收和利用。④有效利用当地的农业废弃物资源，减少浪费和对环境的污染，降低生产成本，是目前有发展潜力又受养殖户欢迎的生态健康型饲料。附图说明图1示菌株3镜检图(10×100)；图2示菌株3的PCR图；M﹕DL2000DNAMarker；3﹕菌株3；图3示菌株3的系统进化树；图4示菌株16的镜检图(10×100)；图5示菌株16的PCR图；M﹕DL2000DNAMarker；16﹕菌株16；图6示菌株16的系统进化树；图7示菌种添加量和水分含量交互作用对粗蛋白影响的响应面(7-1)和等高线(7-2)；图8示菌种添加量和菌种比交互作用对粗蛋白影响的响应面(8-1)和等高线(8-2)；图9示水分含量和菌种比交互作用对粗蛋白影响的响应面(9-1)和等高线(9-2)；图10示菌种添加量和水分含量交互作用对粗脂肪影响的响应面(10-1)和等高线(10-2)；图11示菌种添加量和菌种比交互作用对粗脂肪影响的响应面(11-1)和等高线(11-2)；图12示水分含量和菌种比交互作用对粗脂肪影响的响应面(12-1)和等高线(12-2)；图13示椰蓉发酵工艺流程。具体实施方式本专利技术公开了一种多菌种发酵椰蓉制备生物饲料的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本研究通过以自然发酵椰蓉作为分离源，分离筛选生产动物饲料所需菌种并进行分子生物学及生理生化实验鉴定，得到国家农业部允许使用的微生物添加剂菌种即酿酒酵母和植物乳杆菌。采用两步发酵以椰蓉和豆粕为底料，酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌为菌种通过两步发酵制备发酵饲料，利用响应面法进行发酵椰蓉饲料工艺流程及发酵条件的优化，并得到最佳的发酵工艺，为今后椰蓉的开发利用奠定基础。椰蓉中饲用发酵微生物的筛选：利用YPD培养基和MRS培养基从发酵的椰蓉中分离筛选纯化及生理生化鉴定得到两株发酵菌，分别命名为菌株3和菌株16。菌株3在YPD琼脂培养基上菌落形态为圆形，乳白色，不透明本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种椰蓉饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以椰蓉和豆粕为发酵底物，先采用酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌组成混合菌种对发酵底物进行有氧发酵2～5天，然后再加入植物乳杆菌进行厌氧发酵5～15天，通过两步固态发酵得到发酵椰蓉生物饲料；/n所述酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌与植物乳杆菌的体积比例为(27～54):(1.9～5.7):36。/n

【技术特征摘要】
1.一种椰蓉饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以椰蓉和豆粕为发酵底物，先采用酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌组成混合菌种对发酵底物进行有氧发酵2～5天，然后再加入植物乳杆菌进行厌氧发酵5～15天，通过两步固态发酵得到发酵椰蓉生物饲料；
所述酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌与植物乳杆菌的体积比例为(27～54):(1.9～5.7):36。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述有氧发酵3天，所述厌氧发酵10天。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌与植物乳杆菌的体积比例为54:3.8:36。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酿酒酵母菌的菌液浓度为2.7×108CFU/mL，所述枯草芽孢杆菌的菌液浓度为1.9×107CFU/mL，所述植物乳杆菌的菌液浓度为3.6×108CFU/mL。


5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，以质量百分含量计，酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌在发酵底物中的添加量为6％～10％。


6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，以质量百分含量计，酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：王学梅，张晓梦，王闫宇，吴军龙，白国松，刘晓烜，孙楠，陈应强，杨雨辉，张昌和，
申请(专利权)人：海南大学，广州市科胜生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：海南;46