活体表达谱制造技术

本发明专利技术涉及使用多个特定靶向基团的活体表达谱，其中每个靶向基团用能够同时识别每个靶向基团到靶标的连接的不同化合物标记。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于改善活体诊断成像的方法和工具。本专利技术还涉及用 于生产能够精确诊断成像的工具的工具和方法，该成像基于多个生物医 学靶标或生物医学疾病诊断靶标的同时的活体定性和/或定量检测，比如 多个基因的表达或非表达，或者多个基因产物的存在或缺乏，基因产物 诸如或者循环或者结合的蛋白质、碳水化合物或脂质或代谢物。
技术介绍
病症比如癌症的诊断基于很多的步骤，包括物理检查、生物医学和 组织病理学研究和诊断成像技术。肿瘤疾病的最终确诊需要通过物理介入(活组织切片检查、外科手术等)从可疑身体区域中提取组织取样。根据TNM分类系统，该组织 在组织学上的特征提供重要的参数来分类肿瘤，该分类系统始终是用于 定义适当的治疗方案和疾病预测结果的黄金标准。组织学分析允许将组 织分类为恶性、良性或正常的。此外，还确定该区别的程度，提供研究 的癌症细胞的扩散程度的指示。过去几年间的发展使其有可能监视可疑 组织的代谢改变从而传递被研究组织状态的重要信息。所有采集到一起 的诊断信息允许进入被研究癌症的最终阶段，其将确定阶段与所需的治 疗方式、临床结论和存活几率直接联系起来。最近已经显示肿瘤的分类有可能通过多个基因或蛋白质的组合的活 性和表达水平即所谓生物分子或表达谱的图案的研究来进行。这些 图案的分析在可疑被感染身体区域的病体血清或病体组织上完成。当前诊断成像方法利用识别与病理条件相关联的靶标的靶向造影 剂。单个蛋白质的检测在区分组成较高级哺乳动物的器官的成百个不同 细胞类型时具有有限的作用。而且单个蛋白质通常不能以适宜的高灵敏度和/或特异性来区分细胞的不同生理状态。例如，当今所有用于癌性肿瘤诊断的肿瘤标志物(例如用于前列腺癌的PSA，用于卵巢癌的CA-125等)都受困于在非常早的阶段正确检测疾病的低灵敏度和特异性。基于 这种蛋白质存在的临床结论预测通常显示出与个体疾病进展有很少的联系。相反，最近己经显示通过使用体外多个蛋白质或等同分析物(DNA、 RNA、代谢物)的组合，基于分子属性将例如肿瘤细胞分类为一致的子 分类也是可能的。多种研究已经表明过去怎样应用DNA阵列来分析并 对癌症进行分类。尽管单个标志物的方式是 有价值的，但其是基于癌症病原和进程的过于简化的基本原理之上的。 已证明了癌症显型的外在表达是在癌症细胞和宿主中很多交互路径和进 程的结果。为了获得癌症的分子状态的更加完整的画面，在公共和私人 部门的研究者都转向了可被用于同时测量成千基因的表达图案的DNA 阵列。此外，已经显示了基于使用包括多个分子的状态(例如表达水平)的图案而不是使用单个事件来改善对肿瘤疾病的整体临床结论的预测是 可行的(Shipp等人(2002)Nature Med. 8, 68-74; Shipp等人(2002)Nature, 415, 530-536; Pomeroy (2002) Nature, 415, 436-442; Beer等人(2002) Nature Med. 8, 816-824; Rosenwald等人(2002) New Engl. J. Med. 346, 1937-1947)。例如在乳腺癌的情况下，当今临床使用的对于转移的最强 预测(例如淋巴结状态、组织分级)不能根据它们的临床表现精确地分 类乳腺肿瘤。通过使用在初期乳腺肿瘤上的体外基因表达分析和应用监 督分类算法，可在诊断局部淋巴结中没有肿瘤细胞时能较强地识别出基因表达谱来预测在病人体内到远距离转移的短间隔("弱预测")。这种 体外表达谱由涉及细胞循环、介入、转移和血管新生进程的基因组成(Van，t Veer等(2002) Nature 415, 530-536; Van de Vijver等(2002) New Engl. J. Med. 347, 1999-2009)。光学成像在活体成像工具中用于组织解剖、生理学和新陈代谢和分 子功能的评估是极度灵敏的。当使用低水平辐射时荧光染料可在低浓度 时检测到，此时产生对于病人无害的荧光信号。此外，用于疾病的光学 活体成像的光学仪器和新造影剂在过去几年在市场上也同样出现了。对于器官和生物分子的光学成像使用了大量的标记。最新开发的一 类用于活体光学成像的化合物是量子点。量子点在生物成像中的使用已 被Goa等人证明，并且由例 如Michalet等人进行 了综述。尽管对于疾病的诊断和分类而言体外分子生物技术是可用的，但是 仍然存在对于能够实现详细的特定病人的活体诊断即基于非介入整个身 体的分析的技术的进一步需要。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种用于增强活体诊断成像的可替换的和/ 或改进的方法和工具。本专利技术的一个方面涉及用于生产能够精确诊断成像的工具的工具和 方法，该成像基于多个生物医学目标或生物医学疾病诊断目标的同时的 活体定性和/或定量检测，比如多个基因的表达或非表达(是否是野生型 或突变的)，或多个碳水化合物或蛋白质或脂质(循环或结合的)的存 在或缺乏。本专利技术的另一方面涉及通过非介入成像方式为疾病的精确诊 断获得相关参数。本专利技术的方法涉及定性和定量的活体成像，从而确定与特定疾病状 态相关联的标识谱的存在，其已经基于组织的分子生物参数而被确定。 这使得使用非介入的诊断方法不仅能够诊断疾病状态而且更特别的是诊断疾病的亚型和进程阶段。其为疾病的治疗方案和结论预测提供了那些 非常关键的信息。根据本专利技术的一个特定实施例，其中本专利技术的方法被应用到癌症的 诊断，它们不仅实现了对于癌症存在的识别而且能够分类恶性或良性肿 瘤，以及在恶性肿瘤的情况下，能够确定不同的程度和类别。因此，使 用非介入的活体诊断方法，可以定义适当的治疗方案并预测用于治疗某 种疾病的结论参数。根据本专利技术的第一方面，提供了一种基于对疾病或病症预先识别的 标识谱对所述疾病或病症的活体诊断的方法。因此，本专利技术的方法包括 第一方面，其基于作为生物医学靶标或生物医学疾病靶标或生物医学疾 病诊断耙标的多个因素来确定疾病状态(所述疾病或病症的不同类型和 进程阶段)的标识谱。这种表达谱可以例如是基因表达谱，比如多个基 因的表达谱，例如基因的表达或非表达，或者基因产物比如蛋白质(酶、 受体、结构化蛋白质等)的存在或缺乏，或碳水化合物、脂质、代谢物 (结合或循环)的表达谱。第二方面包括测定所述标识谱能否通过病人 的活体成像被检测到。这可通过利用不同的生物医学靶向基团例如基因 和/或特定蛋白质和/或碳水化合物和/或脂质靶向基团(或结合或循环， 以及或野生型的或突变的)来实现，所述每个靶向基团都用发射不同波 长光的化合物标记。本专利技术的方法的一个特定实施例是癌症的诊断，其中本专利技术的方法 能够识别特定类型的癌症(恶性、良性、初期、中期、扩散和非扩散肿瘤)。此外，在癌症的诊断中，本专利技术的方法能够识别转移归巢(metastases homing)的位置。根据另一方面，本专利技术提供制备用于通过表达谱进行疾病和病症的 活体诊断的试剂盒的方法，其中试剂盒包括两个或多个，优选为多个特 别针对不同因素的靶向基团。根据该方法的特定实施例包括制备或获得 对于从包括基因和/或蛋白质和/或碳水化合物和/或脂质和/或代谢物的组 中选择的因素特定的靶向基团。这些方法包括a)基于靶标或因素谱，例 如多个基因的基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于疾病或病症的活体诊断的方法，包括步骤：　　　　基于多个因素的表达谱确定所述疾病或病症的不同类型和进程阶段的标识谱；　　　　利用对于每个所述因素的不同的特定靶向基团，确定在病人体内是否检测到所述标识谱，其中每个所述靶向基团被不同地标记。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：R霍夫曼，H赫梅尔，M温特，
申请(专利权)人：皇家飞利浦电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：NL[荷兰]