诊断多发性硬化的方法技术

本发明专利技术涉及用于诊断受试对象多发性硬化的方法，所述方法包括确定在源自所述受试对象的生物样品中的标志的磷酸化水平，其中所述标志选自α－１抗胰蛋白酶（ａ１ＡＴ）和维生素Ｄ结合蛋白（ＶＤＢＰ），并且将在所述样品中的所述标志的磷酸化水平与参考值进行比较。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于多发性硬化的生物标志(biomaker)。更具体地，本专利技术 涉及这些标志用于诊断多发性硬化的用途、用于监测疾病过程的用途和在 临床试验或临床前试验中的用途及用于药物筛选和药物开发的用途。
技术介绍
多发性硬化(MS)为牵涉神经系统的自身免疫性疾病，其在全世界影响 近250万个体，其中女性是男性的两倍。在西方世界，每100,000人口中有 多于80人受到影响。MS发病的平均年龄为30岁；存在两个易发病的年龄 组。大部分的患者在发病时为21至25岁，较少百分比的患者为41至45 岁。。与所述疾病相关的经济负担是 很大的。已估计的是，在美国用于所有患有MS的人的总年花费多于90亿 美元。。可将MS分成四种不同的形式分别为临床孤立综合征型(clinical isolated syndrome, CIS)、复发緩解型(relapsing remitting, RR)、继发进展型 (secondary progressive, SP)和原发进展型(primary progressive, PP)。 CIS可以 是所述疾病发展的第一阶段，其中30-80。/。实际上发展成MS。 。 RR的特征为一系列恶化，这些恶化使能力 丧失的程度发生变化，患者从所述能力丧失康复。在约60-80%的RP患者 中，所述疾病的过程平稳地变成SP，在SP中，患者不经历恶化，但取而 代之的是，患者报告出现逐渐的衰弱。PP不包括在RR中的典型恶化，取 而代之的是，所述疾病过程逐渐发展。MS为慢性脱髓鞘病，在慢性脱髓鞘病中，CNS的炎症与典型出现在 位于白质(white matter)中的斑块(plaques)中的损伤相关。这种炎症过程牵涉T细胞、巨噬细胞和小胶质细胞的活化和募集到损伤位点。相信的是，症状 由于轴突脱髓鞘而出现，轴突脱髓鞘在神经系统中抑制或阻断传导。可在 脑和脊髓中发现斑块。已将症状的康复归结于髓鞘的部分再生和炎症的消 退。已基于从对MS患者的免疫研究积累的数据和丰富的动物模型数据，将 自身免疫性失调视为组织损伤的主要原因。当前的MS免疫病理学4莫型启示，在外周中的自身反应性T细胞一皮活 化。。活化的T细胞 表达水平上调的粘附分子，与纯真、静止的T细胞相比，活化的T细胞能 更有效地迁移经过血脑屏障。经过血脑屏障的渗出^皮i^为牵涉一 系列在可 诱导配基-受体对之间的重叠分子相互作用，所述可诱导配基-受体对在迁移 细胞的表面和内皮屏障上。在脱髓鞘病中，在调节效应细胞经过血脑屏障 并且进到中枢神经系统(CNS)血管周围组织中的转移时，粘附分子、趋化因 子和趋化因子受体及基质金属蛋白酶的选择性表达可能是重要的。不应将MS的病理机制限制于自身免疫。。脱髓鞘可通过提出的多种机制发生Fas/Fas酉己 基相互作用、毒性细胞因子、活性氧簇、基于抗体的细胞毒性和少突胶质 细胞的代谢不稳定性。另外，越来越认识到的是，轴突损伤为MS损伤的突 出病理特征及通常在MS脑中出现的白质的突出病理特征。然而，这些观察 结果没有在MS发病机制中排除炎症脱髓鞘的作用。轴突损伤可在炎症损伤 之前发生，这使以下是可能的独立的轴突病理学可贡献于所述疾病的主 要病理生物学。对在MS中轴突损伤机制和神经变性机制的研究处于其初 期。然而，轴突损伤可在很大程度上决定临床结果。在MS中，CNS组织 毁坏标志不但可用于炎症脱髓鞘过程，而且可用于神经变性过程。MS就其自身免疫致病机制而言为全身性疾病，终器(end-organ)损伤引 起的房室疾病(compartmental disease)出现在CNS中。因而，所述疾病的生 物标志最有可能在位于脑周围的CSF中发现，及在其它较容易得到的可反 映全身性疾病的流体中发现，例如血清或尿。有利影响MS早期过程的治疗的可用性强调及时和准确诊断的重要性。 当前，对MS的诊断是耗时、昂贵和不确定的，尤其是在疾病的早期。也已 将MRI用于评价MS疾病活性、疾病负担和这些参H随时间的动态发展。 。系列的MRI研究已明确表明，临床出现的变化只反映疾病活性的较小组成。所有MRI就其提供 有关MS病理的专属性信息的能力而言是受到限制的。在没有专属性定义检测的情况下，对MS的诊断继续基于临床史和神经学检查而被预测，即使 MRI的使角在早期诊断上已发挥主要作用。。翻译后的修饰例如糖基化模式可使这些蛋白质亚型的原型能区分开 来。。MS的疾病过程在患者中并且在患者之间是高度可变的，这表明存在疾 病不一致性。实际上，已在MRI和病理研究中显示MS损伤的不一致性。 MRI能够确定萎缩和不同类型的损伤，然而它缺乏病理专属性。由于其与 CNS直接相关，已进行相当大量的努力，以在源自患有MS的患者的CSF 中，确定预后和i貪断标志。也将蛋白质的磷酸化视为翻译后的修饰，其可作为用于蛋白质作用的 开或关"f言号。。还没有4艮好地用基 于CSF的蛋白组学方法研究此领域即磷酸化和糖基化，尽管一些研究显示 实侈'J。 。用蛋白组学方法确定在CSF中的蛋白质的特征，这还是很稀少的。许 多出版的研究使用2-D电泳，这种电泳是很麻烦的，并且通常所需要的蛋 白质比可常规用CSF得到的多。此外，显示极低或高分子量、高疏水性、 低丰度和完整代谢组学(metabolome)的蛋白质不能进行电泳。。很低的灵敏度已妨碍一些研究；其它 研究已使用非常大量的流体以进行补偿。这些努力已确定数量非常有限的 蛋白质。。然而，使用2-D电泳蛋白组学和发现导向的策略，研究 人员已确定在CSF中的候选或潜在的生物标志。例如，在患有脑动脉病的 患者的CSF中，确定了一种补体因子。。另一个实例是在帕金森病患者中减少的蛋白质表达。[E.J. Finehout et al" Disease Markers, 21， 2， 93-101(2005)〗。就本专利技术而言，专利技术人已将白蛋白和IgG的消耗连同荧光染料用于总蛋白和磷酸蛋白。这是用于定量在源自MS患者的CSF中的磷酸体蛋白的 tf颖方法。
技术实现思路
本专利技术提供可指示多发性硬化(MS)的生物标志。可将这些生物标志用 于诊断所述疾病、监测其发展、评价治疗响应和筛选用于治疗MS的药物。 当治疗对于患者是非常合适并且可能是最有益时，疾病过程的早期诊断和 知晓可使治疗及早进行。另外，这种信息可预测潜在MS亚型的恶化和分类。 评价治疗响应的能力可进行疾病的个体化治疗，并且提供旨在评价候选药 物有效性的临床试验的基础。由于MS的疾病过程在早期(CIS、 RR)带有明显的炎症组成，随后在所 述疾病的后期(SP)出现显著的生物学变化，达到神经变性状态，所以相信的 是，这表明可将这些生物标志用于监测其它神经炎症和/或神经变性疾病的海默病、轻度认知缺损(Mild Cognitive Impairment)、痴呆、年龄相关的记忆 缺P各(Age-Associated Memory Impairment)、年龄相关的^人知衰退(Age-Related Cognitive Decline)、与神经原纤维缠结(neurofibrillar tangle)病理相关的疾病、 阿尔兹海默病引起的痴呆、精神分裂症引起的痴呆、帕金森病引起的痴呆、 克-雅二氏病(Creutzfeld本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于诊断受试对象多发性硬化的方法，所述方法包括确定在源自所述受试对象的生物样品中的标志的磷酸化水平，其中所述标志选自α－１抗胰蛋白酶（ａ１ＡＴ）和维生素Ｄ结合蛋白（ＶＤＢＰ）；并且将所述样品中的所述标志的磷酸化水平与参考值进行比较。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：博迪尔埃里克森，博弗兰岑，简奥特瓦尔德，
申请(专利权)人：阿斯利康瑞典有限公司，
类型：发明
国别省市：SE[瑞典]