【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、免疫疗法已成为对抗多种类型疾病(包括癌症)的有力手段。免疫疗法利用患者自身免疫系统的力量来对抗多种类型的肿瘤。
2、嵌合抗原受体(car)t细胞疗法是特定形式的基于细胞的免疫疗法，该免疫疗法使用工程化的t细胞对抗癌症。在car-t细胞疗法中，将t细胞从患者血液中收获，离体工程化以表达含有抗原结合结构域和t细胞激活结构域的car，扩增至更大的群体并且施用至患者。car-t细胞用作结合至癌细胞并引起这些癌细胞的破坏的活的药物。当成功时，car-t细胞治疗的作用往往会持续很长时间，如通过在临床缓解后很长时间在患者中检测car-t细胞的持久性和扩增所证明的。
3、尽管几种有前景的car疗法已获批准使用，但仍需要开发针对新靶标的car以扩展可使用此疗法进行治疗的适应症数量。本文描述了针对人steap2的新型car以及使用其治疗癌症(例如前列腺癌)的方法。
技术实现思路
1、本披露的一些方面涉及包含编码嵌合抗原受体(car)的核苷酸序列的多核苷酸，其中car包含...
【技术保护点】
1.一种多核苷酸，该多核苷酸包含编码嵌合抗原受体(CAR)的核苷酸序列，其中该CAR包含：
2.如权利要求1所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域结合人STEAP2的细胞外环上的表位。
3.如权利要求1或2所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、单链可变片段(scFv)、单链抗体、VHH、vNAR、纳米抗体(单结构域抗体)或其任何组合。
4.如权利要求1至3中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含scFv。
5.如权利要求1至4中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种多核苷酸，该多核苷酸包含编码嵌合抗原受体(car)的核苷酸序列，其中该car包含：
2.如权利要求1所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域结合人steap2的细胞外环上的表位。
3.如权利要求1或2所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含fab、fab'、f(ab')2、fd、fv、单链可变片段(scfv)、单链抗体、vhh、vnar、纳米抗体(单结构域抗体)或其任何组合。
4.如权利要求1至3中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含scfv。
5.如权利要求1至4中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含可变重链区(vh)和可变轻链区(vl)，其中该vh包含vh互补决定区(cdr)1、vh-cdr2、vh-cdr3；且其中该vl包含vl-cdr1、vl-cdr2和vl-cdr3。
6.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh-cdr3，其包含选自seq id no:6、16、26、36、46和96的氨基酸序列。
7.如权利要求1至6中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh-cdr2，其包含选自seq id no:5、15、25、35、45和95的氨基酸序列。
8.如权利要求1至7中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh-cdr1，其包含选自seq id no:4、14、24、34、44和94的氨基酸序列。
9.如权利要求1至8中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl-cdr3，其包含选自seq id no:3、13、23、33、43和93的氨基酸序列。
10.如权利要求1至9中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl-cdr2，其包含选自seq id no:2、12、22、32、42和92的氨基酸序列。
11.如权利要求1至10中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl-cdr1，其包含选自seq id no:1、11、21、31、41和91的氨基酸序列。
12.如权利要求1至11中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含：
13.如权利要求1至12中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh，该vh包含与选自seq id no:7、17、27、37、47和97的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
14.如权利要求1至13中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh，该vh包含选自seq id no:7、17、27、37、47和97的氨基酸序列。
15.如权利要求1至14中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl，该vl包含与选自seq id no:8、18、28、38、48和98的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
16.如权利要求1至15中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl，该vl包含选自seq id no:8、18、28、38、48和98的氨基酸序列。
17.如权利要求1至12中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含：
18.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh，该vh包含与seq id no:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
19.如权利要求1至5和18中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl，该vl包含与seq id no:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
20.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh，该vh包含与seq id no:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
21.如权利要求1至5和20中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl，该vl包含与seq id no:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
22.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh，该vh包含与seq id no:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
23.如权利要求1至5和22中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl，该vl包含与seq id no:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
24.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh，该vh包含与seq id no:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
25.如权利要求1至5和24中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl，该vl包含与seq id no:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
26.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vh，该vh包含与seq id no:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
27.如权利要求1至5和26中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含vl，该vl包含与seq id no:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
28.如权利要求1至27中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含：
29.包含seq id no:97中所示氨基酸序列的vh，和包含seq id no:98中所示氨基酸序列的vl。如权利要求1至17和28中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含与seq id no:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
30.如权利要求1至17和28中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含与seq id no:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
31.如权利要求1至30中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含共刺激结构域或其部分。
32.如权利要求1至31中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含共刺激结构域，该共刺激结构域选自由以下组成的组：cd3z的细胞内结构域、cd28共刺激结构域、cd27共刺激结构域、4-1bb共刺激结构域、icos共刺激结构域、ox-40共刺激结构域、gitr共刺激结构域、cd2共刺激结构域、il-2rβ共刺激结构域、myd88/cd40a cd28共刺激结构域及其任何组合。
33.如权利要求1至32中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含4-1bb共刺激结构域。
34.如权利要求1至32中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含cd3z的细胞内结构域和cd28共刺激结构域。
35.如权利要求1至32中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含：包含seqid no:131的cd3z的细胞内结构域和包含seq id no:130的4-1bb共刺激结构域。
36.如权利要求1至35中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含cd3z的细胞内结构域、cd28共刺激结构域和4-1bb共刺激结构域。
37.如权利要求1至36中任一项所述的多核苷酸，其中该跨膜结构域包含选自cd4、cd8α或cd28的跨膜结构域的跨膜结构域。
38.如权利要求1至37中任一项所述的多核苷酸，其中该跨膜结构域包含cd28的跨膜结构域并包含seq id no:129。
39.如权利要求1至38中任一项所述的多核苷酸，其中该car还包含铰链区/间隔区结构域。
40.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含免疫球蛋白铰链区/间隔区。
41.如权利要求39或40所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含igg铰链区结构域。
42.如权利要求39至41中任一项所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含igg1铰链区结构域、igg2铰链区结构域、igg3铰链区结构域或igg4铰链区结构域。
43.如权利要求39至42中任一项所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含igg4铰链区结构域并包含seq id no:128。
44.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:10中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
45.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:108中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
46.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:109中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
47.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:110中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
48.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:111中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
49.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:112中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
50.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:113中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
51.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:114中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
52.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:115中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
53.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:116中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
54.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:118中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
55.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该car包含与seq id no:119中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
56.如权利要求1至55中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸进一步编码装甲分子，其中当在细胞表面上表达时，该装甲分子对抗肿瘤微环境中细胞的免疫抑制。
57.如权利要求56所述的多核苷酸，其中该装甲分子包含显性负性2型tgf-β受体(tgfβriidn)。
58.如权利要求56或57所述的多核苷酸，其中该装甲分子包含与seq id no:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
59.如权利要求56至58中任一项所述的多核苷酸，其中该装甲分子包含seq id no:105中所示氨基酸序列。
60.如权利要求1至59中任一项所述的多核苷酸，其中编码该car的核苷酸序列与seqid no:101或103中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。
61.如权利要求60所述的多核苷酸，其中编码该car的核苷酸序列包含seq id no:101或103中所示核苷酸序列。
62.如权利要求1至61中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸进一步包含编码装甲分子的第二核苷酸序列，其中该第二核苷酸序列与seq id no:104中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。
63.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该第二核苷酸包含seq id no:104中所示核苷酸序列。
64.如权利要求63所述的多核苷酸，其中编码该car的核苷酸序列包含seq id no:101中所示核苷酸序列，以及该第二核苷酸序列包含seq id no:104中所示核苷酸序列。
65.如权利要求63所述的多核苷酸，其中编码该car的核苷酸序列包含seq id no:103中所示核苷酸序列，以及该第二核苷酸序列包含seq id no:104中所示核苷酸序列。
66.如权利要求56至65中任一项所述的多核苷酸，其中编码该car的核苷酸序列和该第二核苷酸序列通过第三核苷酸序列连接，其中该第三核苷酸序列编码可切割的肽接头。
67.如权利要求66所述的多核苷酸，其中该可切割的肽接头是自切割的肽接头。
68.如权利要求66或67所述的多核苷酸，其中该可切割的肽接头包含t2a肽。
69.如权利要求66至68中任一项所述的多核苷酸，其中该可切割的肽接头包含seq idno:126。
70.如权利要求1-17、28、31-43、56-64或66-69中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸包含与seq id no:107中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。
71.如权利要求1-17、28、31-43、56-64或66-70中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸包含seq id no:107中所示核苷酸序列。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：E·博斯科，D·范戴克，G·穆迪，C·法森贝克，张建瑛，
申请(专利权)人：阿斯利康瑞典有限公司，
类型：发明
国别省市：
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