多花蒿烯内酯A-S和多花蒿素A-G及其药物组合物和应用制造技术

本发明专利技术提供结构式(I)所示26个新化合物，多花蒿烯内酯A‑S(artemyrianolidesA‑S,1‑19)和多花蒿素A‑G(artemyrianins A‑G,20‑26)，及其制备方法和应用、药物组合物及其应用，涉及药物技术领域。该类化合物对人肝癌细胞株HepG2、Huh7和SMMC‑7721具有显著的细胞毒活性，能够与可药用载体或赋型剂组成药物组合物，能够用于制备抗肝癌药物。

【技术实现步骤摘要】
多花蒿烯内酯A-S和多花蒿素A-G及其药物组合物和应用
：本专利技术属于药物
具体地，涉及多花蒿烯内酯A-S(artemyrianolidesA-S,1-19)和多花蒿素A-G(artemyrianinsA-G,20-26)，及其制备方法和应用、药物组合物及其应用。
技术介绍
：原发性肝癌是世界上最常见、恶性程度最高的恶性肿瘤之一，其中90％～95％为肝细胞癌(HCC)，其他为肝内胆管细胞癌(ICC)和混合型肝癌等。据最新全球癌症统计数据显示，全球肝癌发病率呈逐年增加趋势，每年全球肝癌新发病例数约80万，而死亡病例数则超过78万，其中约一半的新发病例和死亡病例发生在我国。HCC作为一种全身性疾病，单靠手术切除或局部治疗不能解决所有问题。而且HCC患者多数具有基础肝病(乙型肝炎和肝硬化)，恶性程度高，起病隐匿，发展迅速，就诊时多数已为中晚期，失去最佳治疗时机，导致患者生存期短，预后差。因而目前提倡多学科参与、多种方法结合的综合治疗措施。HCC最有效的根治方法是手术切除，但80％的病例发现时已属中晚期，且多半合并肝硬化及肝功能异常，失去了手术切除治疗的最佳时机。HCC非手术内科治疗分为局部治疗和全身治疗，其中，局部治疗方法目前主要包括肝动脉栓塞化疗术、消融术和放射治疗；HCC全身治疗主要包括系统化疗、分子靶向药物治疗以及免疫与基因治疗。然而，由于HCC本身的复杂性，临床需要上述多学科综合的方法来应对其不同发展阶段和不同严重程度下的治疗需求。迄今HCC的治疗手段以手术治疗、化学药物治疗和放射性治疗为主，但由于这些方法的毒副作用以及化疗药物耐药等复杂情况显著影响患者预后并限制了治疗方案的选择。因此，提高抗肿瘤药物的疗效同时降低毒副反应是今后治疗HCC的方向之一，而补充医学与替代医学在该领域具有得天独厚的优势。目前，有报道具有抗肝癌作用的天然产物主要有黄酮类、生物碱类、萜类及醌类等，且它们可以作用于HCC的不同发展阶段和靶点。众多研究也证实，对于晚期肝癌患者，天然药物及其复方能够在其接受经导管动脉化学栓塞或者化学治疗后，减弱毒副反应、缩小肿瘤尺寸、增强免疫能力和提高生存质量。蒿属(ArtemisiaL.)隶属于菊科(Asteraceae)春黄菊族(AnthemideaeL.)，是菊科中种类最多、分布最广的一个属。蒿属植物多为一、二年生或多年生草本，少数为半灌木或小灌木，全世界380余种，我国有186种，44变种，各省均有分布。该属药用植物多具有清热解毒、抗菌消炎、祛风除湿、通经活络、活血、止血等功效，在国内外民间用药有着悠久的历史。自1972年首次从该属植物青蒿中分离出抗疟有效单体—青蒿素，并开发我国首创的抗疟新药以来，对该属植物的研究日趋深入。特别是自2015年10月5日屠呦呦等三名科学家获得诺贝尔生理或医学奖以来，对蒿属植物的化学成分及药理活性研究已成为全球药物研发的热点。多花蒿(ArtemisiamyrianthaWall.exBess.)为菊科蒿属植物，很早就在云南民间作药用，是一味具有抗炎功效的传统中药。为揭示多花蒿的活性成分，中外研究者对其化学成分进行了研究，表明多花蒿中主要含有倍半萜、黄酮及挥发油类化合物。现有文献中对于这些化合物活性的报道主要集中在抗癌方面，其抗肝癌活性也有报道，如2016年，昝珂等用MTT法，测定了从多花蒿中分离到的倍半萜类成分对5种人肿瘤细胞(人肺腺癌细胞A549，人肝癌细胞Bel-7402，人胃癌细胞BGC-823，人结肠癌细胞HCT-8，人卵巢癌细胞A2780)的细胞毒活性，结果显示，化合物artanomalideA对人结肠癌细胞HCT-8和人胃癌细胞BGC-823有较强的细胞毒活性，IC50分别为2.3和4.5μM。2018年，他们用同样的方法测定了从多花蒿中分离得到的愈创木内酯类成分对5种人肿瘤细胞的细胞毒活性，结果显示，化合物1β,10β-epoxydehydroleucodin对人肝癌细胞Bel-7402有较强的细胞毒活性，IC50为5.4μM，化合物3-O-methyl-iso-secotanapartholide对人胃癌细胞BGC-823有较强的细胞毒活性，IC50为2.7μM。阳性对照5-氟尿嘧啶对人结肠癌细胞HCT-8和人胃癌细胞BGC-823的IC50分别为5.3和6.1μM。在本专利技术的前期工作中发现，多花蒿干燥地上部分的90％乙醇提取物对肝癌细胞HepG2具有一定的细胞毒活性，进一步从中分离得到26个结构新颖且对肝癌细胞株具有细胞毒活性的倍半萜类和木脂素类化合物，多花蒿烯内酯A-S(artemyrianolidesA-S,1-19)和多花蒿素A-G(artemyrianinsA-G,20-26)。迄今，现有技术中无多花蒿烯内酯A-S(artemyrianolidesA-S,1-19)和多花蒿素A-G(artemyrianinsA-G,20-26)的报道，也没有其作为有效成分的药物组合物的报道，也没有其药物组合物在制备或治疗肝癌药物中的应用报道。
技术实现思路
：本专利技术的目的在于提供一类新的具有药用价值的式(I)所示的多花蒿烯内酯A-S(artemyrianolidesA-S,1-19)和多花蒿素A-G(artemyrianinsA-G,20-26)，及其制备方法和应用，药物组合物及其应用，该类化合物对肝癌细胞株具有明显的细胞毒活性，能够用于制备抗肝癌药物中。为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：本专利技术提供了一系列倍半萜和木脂素类化合物，多花蒿烯内酯A-S(artemyrianolidesA-S,1-19)和多花蒿素A-G(artemyrianinsA-G,20-26)，具有如下式(I)所示结构：本专利技术提供了上述化合物1-26的制备方法，取多花蒿干燥地上部分粉碎，用90％乙醇冷浸提取两次，每次4天，合并乙醇提取液并减压浓缩至无醇味，得到乙醇提取物。提取物混悬于水中，用乙酸乙酯萃取3次，得到乙酸乙酯萃取部分(1.2kg)。乙酸乙酯萃取部分经硅胶柱层析，用丙酮-石油醚(5:95,10:90,20:80,30:70,40:60,50:50)梯度洗脱得到6个流分Fr.A～Fr.F。Fr.C(150g)经中压MCICHP20P柱层析，用水-甲醇(50:50,30:70,20:80,0:100)梯度洗脱，得到4个组分Fr.C1～Fr.C4；Fr.D(230g)经中压MCICHP20P柱层析，用水-甲醇(50:50,30:70,10:90)梯度洗脱，得到3个组分Fr.D1～Fr.D3。Fr.C1(29g)经硅胶柱层析(乙酸乙酯-石油醚,10:90至30:70)得到3个流分Fr.C1-1～Fr.C1-3。Fr.C1-1(12.5g)溶于适量甲醇，经多次重结晶，得到化合物23(1.9g)。将Fr.C1-2(7g)经硅胶柱层析(乙酸乙酯-石油醚,15:85)，得到化合物17(8mg)和21(6mg)。Fr.C1-3(4.8g)先经硅胶柱层析(乙酸乙酯-氯仿,2:98至20:80)，再通过半制备HPLC(水-乙腈,35:65)纯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.结构式(I)所示的化合物多花蒿烯内酯A-S(化合物1-19)和多花蒿素A-G(化合物20-26)，/n

【技术特征摘要】
1.结构式(I)所示的化合物多花蒿烯内酯A-S(化合物1-19)和多花蒿素A-G(化合物20-26)，





2.权利要求1所述的式(I)化合物1-26的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：取多花蒿干燥地上部分粉碎，用90％乙醇冷浸提取两次，每次4天，合并乙醇提取液并减压浓缩至无醇味，得到乙醇提取物，提取物混悬于水中，用乙酸乙酯萃取3次，得到乙酸乙酯萃取部分，乙酸乙酯萃取部分经硅胶柱层析，用丙酮-石油醚(5:95,10:90,20:80,30:70,40:60,50:50)梯度洗脱得到6个流分Fr.A～Fr.F；Fr.C经中压MCICHP20P柱层析，用水-甲醇(50:50,30:70,20:80,0:100)梯度洗脱，得到4个组分Fr.C1～Fr.C4；Fr.D经中压MCICHP20P柱层析，用水-甲醇(50:50,30:70,10:90)梯度洗脱，得到3个组分Fr.D1～Fr.D3；Fr.C1经硅胶柱层析(乙酸乙酯-石油醚,10:90至30:70)得到3个流分Fr.C1-1～Fr.C1-3；Fr.C1-1溶于适量甲醇，经多次重结晶，得到化合物23，将Fr.C1-2经硅胶柱层析(乙酸乙酯-石油醚,15:85)，得到化合物17和21；Fr.C1-3先经硅胶柱层析(乙酸乙酯-氯仿,2:98至20:80)，再通过半制备HPLC(水-乙腈,35:65)纯化，得到化合物11；Fr.C2经硅胶柱层析乙酸乙酯-石油醚(15:85至30:70)梯度洗脱得到3个流分Fr.C2-1～Fr.C2-3；将Fr.C2-1经半制备HPLC(水-乙腈,42:58)纯化得到化合物20；Fr.C2-2经硅胶柱层析(氯仿-石油醚,80:20)得到化合物8和10；Fr.C2-3经硅胶柱层析(乙酸乙酯-石油醚,20:80至30:70)，SephadexLH-20凝胶柱层析(甲醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈纪军，唐爽，耿长安，张心湉，马云保，黄晓燕，李天泽，张雪梅，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：云南;53