【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于农业，具体涉及一种美国山核桃接种丽江块菌制备丽江块菌菌根苗的方法。
技术介绍
1、丽江块菌（tuber lijiangense），俗名黄块菌、黄栗子菌等，是中国的特有种，迄今仅在云南丽江一带发现，其菌肉质感细腻，味道鲜美，具有较好的可食性。研究发现，块菌含有200余种特殊气味成分，富含18种氨基酸、蛋白质以及不饱和脂肪酸、雄性酮、甾醇、鞘脂类等50余种生理活性成分及多样的微量元素，并含有人体必需的8种氨基酸、锌、锰、铁、钙、磷、硒等必需营养微量元素，能够预防和治疗糖尿病、防治老年痴呆及中老年心血管硬化、降低胆固醇；具有保肝护肝、增强免疫力、增智、抗衰老、益胃、清神、止血、疗痔、治疗便秘等药用价值；具有抗癌活性，对癌细胞、肿瘤有一定的抑制作用，可以激发脑细胞活力，块菌药效广泛，营养价值丰富，具有较高的药用和食用价值。由于野生丽江块菌产量低、目前只发现分布于云南丽江一带，需要依靠人工栽培来满足日益增长的市场需求，而有效的接种方法不仅是丽江块菌菌根化生产的前提，也是块菌栽培成败的关键。
2、美国山核桃（carya illinoinensis）隶属胡桃科（juglandaceae）山核桃属（carya），又名长山核桃、薄壳山核桃，为高大乔木，是世界四大坚果之一，原产地为美国和墨西哥，在法国、意大利、以色列、南非、澳大利亚、日本、中国等地有较大面积引种。该树种是一个极具市场竞争力的高效生态经济型干果油料树种，其果壳薄，较易取出果仁，出仁率高（50%~70%），含油率达到70%~80%，不饱和脂肪酸含量较高，为60
3、丽江块菌因其极高的经济价值，遭到人类的过度采挖，破坏了其生境，严重影响了其产量；此外，块菌与树木形成菌根非常不易，从侵染宿主植物开始到产生块菌子实体需要5~8年的时间，现在人工种植虽然已经有地区种植成功，但是如此的破坏自然块菌资源，无异于加剧了块菌成为濒危物种的步伐。目前，丽江块菌尚不能人工栽培，国内外还没有关于丽江块菌的栽培接种技术的报道。菌根化苗制备就是建立丽江块菌与其宿主树的共生关系，是实现丽江块菌人工栽培的基础。现有技术中报道了攀枝花块菌接种美国山核桃制备菌根化苗，菌根合成率最高为87.8%（参见cn201710413848.0攀枝花块菌的菌根苗培育方法），菌根合成率较低。目前还未见丽江块菌和美国山核桃制备菌根化苗的报道。
技术实现思路
1、现有丽江块菌并未有人工栽培的报道，为了解决这一问题，本专利技术的目的是提供一种美国山核桃接种丽江块菌制备丽江块菌菌根苗的方法，通过宿主植物幼苗培育和营造菌种生长环境，形成丽江块菌菌根化苗，为丽江块菌的人工种植奠定基础，同时接种丽江块菌的美国山核桃株高更高，基径更粗，促进了美国山核桃的生长发育，使其更加适应云南的生长环境。
2、本专利技术提供了一种美国山核桃接种丽江块菌制备丽江块菌菌根苗的方法，所述方法包括如下步骤：
3、利用丽江块菌子实体菌悬液对美国山核桃无菌幼苗根系进行浸泡，得到接种丽江块菌子实体菌悬液的美国山核桃无菌幼苗；
4、将浸泡后剩余的丽江块菌子实体菌悬液与移栽基质混合，得到接种基质；
5、将所述接种丽江块菌子实体菌悬液的美国山核桃无菌幼苗栽种于接种基质中进行培养，得到丽江块菌菌根化苗；丽江块菌子实体菌悬液中有效孢子数为≥5×107个孢子/ml；所述接种基质的ph值为7.0~7.5。
6、优选的，所述美国山核桃无菌幼苗的须根数量为4~5个，须根长度为7~12cm。
7、优选的，所述美国山核桃无菌幼苗在浸泡之前进行修剪。
8、优选的，每棵美国山核桃无菌幼苗施用0.25g~0.7g丽江块菌子实体制备得到的丽江块菌子实体菌悬液。
9、优选的，所述丽江块菌子实体菌悬液的制备方法包括：粉碎丽江块菌子实体得到浆液；将所述浆液与无菌水混合得到丽江块菌子实体菌悬液。
10、优选的，所述移栽基质包括腐质土、蛭石和珍珠岩。
11、优选的，所述移栽基质和水混合后应用，所述腐质土、蛭石、珍珠岩和水的体积比为2：2：（1~1.5）：2.5。
12、优选的，所述浸泡的时间为2~6min。
13、优选的，所述培养的温度为15~26℃、湿度为75%~85%；光照强度为30000~35000lux。
14、优选的，所述美国山核桃无菌幼苗的培育方法包括：
15、将美国山核桃种子依次进行春化、刷洗、浸种、筛种和消毒后，将美国山核桃种子与催芽基质混合后进行催芽培养，得到无菌幼苗。
16、本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一种美国山核桃接种丽江块菌制备丽江块菌菌根苗的方法，所述方法包括如下步骤：利用丽江块菌子实体菌悬液浸泡美国山核桃无菌幼苗根系，得到接种丽江块菌子实体菌悬液的美国山核桃无菌幼苗；再将浸泡后剩余的丽江块菌子实体菌悬液与移栽基质混合，得到接种基质；将所述接种丽江块菌子实体菌悬液的美国山核桃无菌幼苗栽种于接种基质中进行培养，得到丽江块菌菌根化苗；丽江块菌子实体菌悬液中有效孢子数为≥5×107个孢子/ml；所述接种基质的ph值为7.0~7.5。
17、本专利技术在人工条件下，接种丽江块菌三个月后，能够成功侵染美国山核桃，形成菌根，菌根合成率达到95%以上，为丽江块菌后期的人工培育奠定基础；提高丽江块菌的接种成功率，降低生产成本，接种丽江块菌的美国山核桃株高更高，基径更粗，促进了美国山核桃的生长发育，同时美国山核桃又有效地促进了丽江块菌的生长发育，打破了野外丽江块菌只在云南丽江一带分布的局限性，为丽江块菌的多地种植提供了可能性。本专利技术的制备方法简单、实用、高效，生产成本较低，并且不受季节的影响，经济效益显著。
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1.一种美国山核桃接种丽江块菌制备丽江块菌菌根苗的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述美国山核桃无菌幼苗的须根数量为4~5个，须根长度为7~12cm。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述美国山核桃无菌幼苗在浸泡之前进行修剪。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，每棵美国山核桃无菌幼苗施用0.25g~0.7g丽江块菌子实体制备得到的丽江块菌子实体菌悬液。
5.根据权利要求1或4所述方法，其特征在于，所述丽江块菌子实体菌悬液的制备方法包括：粉碎丽江块菌子实体得到浆液；将所述浆液与无菌水混合得到丽江块菌子实体菌悬液。
6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述移栽基质包括腐质土、蛭石和珍珠岩。
7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述移栽基质和水混合后应用，所述腐质土、蛭石、珍珠岩和水的体积比为2：2：（1~1.5）：2.5。
8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述浸泡的时间为2~6min。
9.根据权利要求1所述方
10.根据权利要求1~4任一项所述方法，其特征在于，所述美国山核桃无菌幼苗的培育方法包括：
...【技术特征摘要】
1.一种美国山核桃接种丽江块菌制备丽江块菌菌根苗的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述美国山核桃无菌幼苗的须根数量为4~5个，须根长度为7~12cm。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述美国山核桃无菌幼苗在浸泡之前进行修剪。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，每棵美国山核桃无菌幼苗施用0.25g~0.7g丽江块菌子实体制备得到的丽江块菌子实体菌悬液。
5.根据权利要求1或4所述方法，其特征在于，所述丽江块菌子实体菌悬液的制备方法包括：粉碎丽江块菌子实体得到浆液；将所述浆液与无菌水混合得...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴瑞，周吕蓉，葛再伟，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：
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