【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于农业领域，具体涉及一种美国山核桃接种云南硬皮马勃液体菌株制备菌根苗的方法。
技术介绍
1、迄今为止，硬皮马勃属在中国发现21种，大多数硬皮马勃属的物种具有毒性，不能食用。云南硬皮马勃（scleroderma yunnanense），隶属硬皮马勃科，硬皮马勃属，在云南省的热带和亚热带地区均有分布，是我国特有种。云南硬皮马勃具有可食性，也是世界上唯一可食用的硬皮马勃物种，其子实体含有丰富的矿物元素、蛋白质、粗纤维和粗脂肪，同时还含有丰富的氨基酸。在中国云南当地的蘑菇市场上是一种常见的野生菌，味道较为鲜美可口，营养价值较高，深受人们的喜爱。由于野生云南硬皮马勃的产量低、产地较为单一，需要依靠人工栽培来满足日益增长的市场需求，而有效的菌种培养方法及接种方法不仅是云南硬皮马勃菌根化生产的前提，也是栽培成败的关键。现有技术中的云南硬皮马勃菌根化生产时接种成功率还未超过90%。
2、美国山核桃（carya illinoinensis）隶属胡桃科（juglandaceae）山核桃属（carya），又名长山核桃、薄壳山核桃，为高大乔木，是世界四大坚果之一，原产地为北美，分布于美国、意大利、以色列、墨西哥、日本、法国、中国等地。该树种是一个极具市场竞争力的高效生态经济型干果油料树种，其壳薄，较易取出果仁，出仁率高达50%~70%，含油率达到70%~80%，不饱和脂肪酸含量较高，为60%左右；与油橄榄相比，不饱和脂肪酸和对人体有益的各种氨基酸较高，且富含维生素b1和b2；同时在园林绿化中应用也较为广泛，其优良的材质，美观的树
3、美国山核桃是核桃品种中一个适合低海拔栽培的树种，在中国的引种历史悠久，引种范围较广。但目前国内的美国山核桃的栽培面积、种植规模与国内的消费需求严重不匹配，供不应求，大部分还是依赖于进口，因此对美国山核桃的开发，提高其结实率非常有必要。
4、美国山核桃作为一种外来树种，在引入中国云南之后为了使其更好的本土化，增加其结实率，对美国山核桃的研究，除了对其的栽培措施、防治病虫害、品种选育以外，了解美国山核桃林下的本土共生菌，形成美国山核桃苗菌根合成体系，增加其结实率十分必要。现有技术中报道的云南硬皮马勃对美国山核桃的接种成功率低。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种美国山核桃接种云南硬皮马勃液体菌株制备菌根苗的方法，通过宿主植物幼苗培育和营造菌种生长环境，形成菌根苗，提高云南硬皮马勃接种成功率和美国山核桃结实率，实现林菌共营，同时接种云南硬皮马勃的美国山核桃株高更高，基径更粗，使其更加适应云南的生长环境。
2、本专利技术提供了一种美国山核桃接种云南硬皮马勃液体菌株制备菌根苗的方法，所述方法包括如下步骤：
3、美国山核桃无菌苗和云南硬皮马勃菌液在移栽基质中进行培养，得到菌根苗；所述美国山核桃无菌苗的须根数量为5个以上，须根长度为7~12 cm。
4、优选的，每棵美国山核桃无菌苗施用云南硬皮马勃菌液10~30 ml；每30~50 ml云南硬皮马勃菌液中含有5~7个菌丝团；每个菌丝团直径为1~1.5 cm。
5、优选的，所述方法包括如下步骤：
6、将部分云南硬皮马勃菌液与移栽基质混合，得到接种基质；
7、将部分云南硬皮马勃菌液施用于美国山核桃无菌苗根系，得到施用菌液后的美国山核桃无菌苗；
8、将所述施用菌液后的美国山核桃无菌苗栽种于接种基质中进行培养，得到菌根苗。
9、优选的，部分云南硬皮马勃菌液施用于美国山核桃无菌苗根系之前，还包括修剪根系。
10、优选的，所述美国山核桃无菌苗的培育方法包括：
11、对美国山核桃种子依次进行春化、清洗、浸种和消毒，得到预处理后的种子；
12、将所述预处理后的种子与催芽基质混合后进行培育，得到无菌苗；所述催芽基质包括珍珠岩和蛭石。
13、优选的，所述浸种用的溶液包括添加植物生长调节剂的水溶液；所述植物生长调节剂包括赤霉素和/或乙烯利。
14、优选的，所述云南硬皮马勃菌液的制备方法包括：云南硬皮马勃接种于mmn液体培养基中进行扩大培养，得到云南硬皮马勃菌液。
15、优选的，所述扩大培养的温度为21~26℃，扩大培养的时间为28~32 d。
16、优选的，所述移栽基质包括腐质土、蛭石和珍珠岩；所述移栽基质和水混合后应用，腐质土、蛭石、珍珠岩和水的体积比为2：2：（1~1.5）：2.5。
17、优选的，所述接种基质的ph值为5.5~6.5。
18、本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一种美国山核桃接种云南硬皮马勃液体菌株制备菌根苗的方法，所述方法包括如下步骤：美国山核桃无菌苗和云南硬皮马勃菌液在移栽基质中进行培养，得到菌根苗；所述美国山核桃无菌苗的须根数量为5个以上，须根长度为7~12 cm。本专利技术充分考虑到了美国山核桃幼苗及云南硬皮马勃自身的生长周期及生物活性，在美国山核桃长出须根后，再接种云南硬皮马勃菌液，菌液中存在菌丝，菌丝的形式加大了美国山核桃与云南硬皮马勃菌种的接触面积，使菌丝更好的接触美国山核桃须根，增强其感染率，确保云南硬皮马勃的菌根合成率达到90%以上，节省了云南硬皮马勃的菌种成本。本专利技术的方法简单、实用、高效，生产成本较低，并且不受季节的影响，经济效益显著，且能够使美国山核桃更加适应云南本土环境，在发展美国山核桃生产的同时，也能生产可食用的野生菌，提高山区土地经营效益。
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1.一种美国山核桃接种云南硬皮马勃液体菌株制备菌根苗的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，每棵美国山核桃无菌苗施用云南硬皮马勃菌液10~30mL；每30~50mL云南硬皮马勃菌液中含有5~7个菌丝团，每个菌丝团直径为1~1.5cm。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，部分云南硬皮马勃菌液施用于美国山核桃无菌苗根系之前，还包括修剪根系。
5.根据权利要求1~4任一项所述方法，其特征在于，所述美国山核桃无菌苗的培育方法包括：
6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述浸种用的溶液包括添加植物生长调节剂的水溶液；所述植物生长调节剂包括赤霉素和/或乙烯利。
7.根据权利要求1~4任一项所述方法，其特征在于，所述云南硬皮马勃菌液的制备方法包括：云南硬皮马勃接种于MMN液体培养基中进行扩大培养，得到云南硬皮马勃菌液。
8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述扩大培养的温度为21~26℃，扩
9.根据权利要求1或3所述方法，其特征在于，所述移栽基质包括腐质土、蛭石和珍珠岩；所述移栽基质和水混合后应用，腐质土、蛭石、珍珠岩和水的体积比为2：2：（1~1.5）：2.5。
10.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述接种基质的pH值为5.5~6.5。
...【技术特征摘要】
1.一种美国山核桃接种云南硬皮马勃液体菌株制备菌根苗的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，每棵美国山核桃无菌苗施用云南硬皮马勃菌液10~30ml；每30~50ml云南硬皮马勃菌液中含有5~7个菌丝团，每个菌丝团直径为1~1.5cm。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，部分云南硬皮马勃菌液施用于美国山核桃无菌苗根系之前，还包括修剪根系。
5.根据权利要求1~4任一项所述方法，其特征在于，所述美国山核桃无菌苗的培育方法包括：
6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述浸种用的...
【专利技术属性】
技术研发人员：葛再伟，吴瑞，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：
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