真皮再生片用生物墨水组合物、利用其的定制型真皮再生片的制造方法以及利用所述制造方法制造的定制型真皮再生片技术

本发明专利技术涉及一种真皮再生片用生物墨水组合物(adipose tissue derived stromal vascular fraction)以及利用其的定制型真皮再生片的制造方法，所述真皮再生片用生物墨水组合物包括：包含脂肪组织源性基质血管组分、细胞外基质及纤维蛋白原的第一液；以及包含凝血酶的第二液。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】真皮再生片用生物墨水组合物、利用其的定制型真皮再生片的制造方法以及利用所述制造方法制造的定制型真皮再生片
本说明书要求于2018年1月31日向韩国专利局提交的韩国专利申请第10-2018-0012220号的申请日的权益，其全部内容包含于本说明书。本专利技术涉及一种真皮再生片用生物墨水组合物、利用其的定制型真皮再生片的制造方法以及利用所述制造方法制造的定制型真皮再生片。
技术介绍
本说明主张2018年1月31日向韩国专利厅提交的韩国专利申请第10-2018-0012220号的申请日的利益，其内容全部包含于本说明。本专利技术涉及一种真皮再生片用生物墨水组合物、利用其的定制型真皮再生片的制造方法及利用所述制造方法制造的定制型真皮再生片。作为专利技术背景的技术皮肤作为覆盖人体整个表面的最大器官，执行防止体液流失、阻止有害物质和微生物从外部侵入、保护我们身体免受物理刺激、放射线和紫外线等的功能。皮肤具有毛囊、毛发、汗腺、皮脂腺等多个附属器官，是除保护膜功能之外还执行多种不同功能的重要的综合性器官。皮肤大致分为表皮层(epidermis)、真皮层(dermis)及皮下组织(subcutaneoustissue、hypodermis)。真皮层作为位于表皮之下的层，是提供基质以支撑血管、神经等多种不同结构物的层，由胶原蛋白、弹性纤维及细胞外基质(extracellularmatrix)组成。真皮层大致由上层部的成纤维细胞(fibroblast)丰富且有毛细血管分布的乳头层(papillarylayer)和厚胶原纤维丰富的网状结缔组织(reticularconnectivetissue)组成。皮肤组织中，组织的一部分可因烧伤、外伤及皮肤疾病等而受损，此时，为了治愈受损的组织或为了再造整形，使用移植本人皮肤组织的自体移植(autograft)、移植他人皮肤的同种移植(homograft、allograft)、移植动物皮肤的异种移植(heterograft、xenograft)方法。在这些方法中，自体移植最为理想，但是难度在于：当治疗部位是大范围时，能够确保组织的部位有限，且取皮部位会留下新的伤口部位。同种移植起到帮助伤口周边部细胞移动和治愈的作用，而不是帮助永久植活。人工皮肤(skinequivalent或reconstructedskin)是利用皮肤细胞和作为皮肤组成物质的胶原蛋白、弹性蛋白等的三维重建皮肤，由于是由活成纤维细胞与角质形成细胞组成的，并表现出与实际皮肤类似的形态学、生理学特性，因而称为仿生皮肤(skinequivalent或reconstructedskin)。人工皮肤研发于1980年，旨在治疗需要进行皮肤移植，却由于烧伤程度过重或是患部过大而无法仅凭自身皮肤进行移植的重度烧伤患者，通过持续的改良与研究，目前应用于皮肤生理研究、皮肤刺激评价、皮肤功效评价等多种不同领域。但是，原有的人工皮肤在制造方法方面，问题在于，在组织培养中出现真皮逐渐收缩的现象，且在真皮收缩严重时，人工皮肤整体形态发生变形。原有的细胞治疗剂采用了利用同种细胞进行移植或是移植自体细胞的方法。同种细胞的移植虽然具有旁分泌(paracrine)效应，但问题在于，其会被身体视作异物(foreignbody)而最终消失。此外，在通过注射注入方法来移植自体细胞时，如果细胞没有生长所需的环境(例如，支架)，则消失的概率高，终将难以看到注入的细胞所带来的效果。此外，将自体组织取一部分进行增殖培养的自体移植，问题在于，有供区发生疤痕的可能性、当移植部位大时，供区不足等；同种移植及异种移植，问题在于，有免疫排斥反应或引发炎症等。因此，实情是，需要开发一种方法，能够用于替代或再生受损的皮肤，并将如上所述副作用最小化。[现有技术文献][专利文献]韩国授权专利公报：10-1710615
技术实现思路
专利技术所要解决的技术问题本专利技术旨在提供一种能够将移植排斥反应最小化、并能够用于制造患者定制型真皮再生片的真皮再生片用生物墨水组合物、利用其的定制型真皮再生片的制造方法以及真皮再生片。解决技术问题的技术手段本专利技术的一种实施状态提供一种真皮再生片用生物墨水组合物，包括：包含脂肪组织源性基质血管组分、细胞外基质及纤维蛋白原的第一液；以及包含凝血酶的第二液。本专利技术的另一实施状态提供一种定制型真皮再生片的制造方法，包括：a)利用3D扫描仪来获取缺损的真皮部位的三维数据的步骤；b)利用包含脂肪组织源性基质血管组分、细胞外基质及纤维蛋白原的第一液，形成与所述获取的三维数据的形状对应的第一层的步骤；c)将包含凝血酶的第二液涂布于所述第一层上而形成第二层的步骤；以及d)所述第一层及所述第二层进行反应而形成真皮再生片的步骤。本专利技术的又一实施状态提供一种利用所述制造方法制造的定制型真皮再生片。专利技术的效果根据本专利技术的真皮再生片用生物墨水组合物以及利用其的定制型真皮再生片的制造方法，优点在于，能够制造适合患者受损的皮肤组织的真皮再生片。具体地，本专利技术的定制型真皮再生片的制造方法能够3D扫描患部的准确形态，制造形状与患部一致的真皮再生片。根据本专利技术的真皮再生片，优点在于，能够无免疫排斥反应地进行移植，此外，能够在短时间内制造，因此能够将健康的细胞移植到患部。附图说明图1示出了为制造根据本专利技术的定制型真皮再生片而分别制备第一液及第二液的过程。图2显示了对根据实验例1的定制型真皮再生片的细胞存活能力进行确认的照片。图3显示了用来实现实验例2的动物实验中，去除皮肤的照片。图4显示了根据实验例2制造的对照组以及实施例的定制型真皮再生片。图5显示了根据实验例2的定制型真皮再生片的移植过程。图6显示了实验例2的动物实验中的马松三色染色结果。图7是利用CD31染色观察的根据实验例2的动物实验结果——移植部位形成血管与否。具体实施方式在本说明书中，当提到某构件位于另一构件“之上”时，这不仅仅涉及某构件与另一构件接触的情形，还包括还有其他构件存在于两构件之间的情形。在本说明书中，当提到某部分“包括”某组成要素时，只要没有特别记载相反的情况，这并不意味着排除其他组成要素，而是意味着还可包括其他组成要素。以下对本专利技术进行详细说明。本专利技术的一种实施状态提供一种真皮再生片用生物墨水组合物，包括：包含脂肪组织源性基质血管组分(adiposetissuederivedstromalvascularfraction)、细胞外基质及纤维蛋白原的第一液；以及包含凝血酶的第二液。本专利技术的真皮再生片用生物墨水组合物为二液型，所述第一液与所述第二液在依次涂布后，能够反应而形成真皮再生片。具体地，所述第二液中的凝血酶与所述第一液中的纤维蛋白原能够反应而形成纤维蛋白网络，这能够起到充分固定所述脂肪组织源性基质血管组分以及细胞外基质的作用。所述脂肪组织源性基质血管组分(adipo本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种真皮再生片用生物墨水组合物，包括：/n包含脂肪组织源性基质血管组分、细胞外基质及纤维蛋白原的第一液；以及/n包含凝血酶的第二液。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180131 KR 10-2018-00122201.一种真皮再生片用生物墨水组合物，包括：
包含脂肪组织源性基质血管组分、细胞外基质及纤维蛋白原的第一液；以及
包含凝血酶的第二液。


2.根据权利要求1所述的真皮再生片用生物墨水组合物，其特征在于，
所述第一液中的脂肪组织源性基质血管组分的浓度为105个/ml至107个/ml。


3.根据权利要求1所述的真皮再生片用生物墨水组合物，其特征在于，
所述第一液中的细胞外基质的含量为20wt％至60wt％。


4.根据权利要求1所述的真皮再生片用生物墨水组合物，其特征在于，
所述细胞外基质为直径5μm至100μm的颗粒。


5.根据权利要求1所述的真皮再生片用生物墨水组合物，其特征在于，
所述第一液中的纤维蛋白原的浓度为4㎎/ml至50㎎/ml。


6.根据权利要求1所述的真皮再生片用生物墨水组合物，其特征在于，
所述第二液中的凝血酶的浓度为30IU/ml至250IU/ml。


7.根据权利要求1所述的真皮再生片用生物墨水组合物，其特征在于，
所述脂肪组织源性基质血管组分及所述细胞外基质分别从自体脂肪组织提取。

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【专利技术属性】
技术研发人员：柳石焕，
申请(专利权)人：罗基医疗保健公司，
类型：发明
国别省市：韩国;KR