糖胺聚糖衍生物及其制备方法和用途技术

公开了一种糖胺聚糖羧基化衍生物、其制备方法，及其用于抑制肿瘤生长和/或转移的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】糖胺聚糖衍生物及其制备方法和用途
本专利技术涉及糖胺聚糖衍生物(特别地，糖胺聚糖羧基化衍生物)、其制备方法，及其用于抑制肿瘤生长和/或转移的用途。
技术介绍
乙酰肝素酶，又名类肝素酶，是一种β-葡萄糖醛酸内切酶，其能够断裂硫酸乙酰肝素蛋白聚糖中的硫酸乙酰肝素(heparan sulfate，HS)，例如多配体聚糖-1(syndecan-1)，从而释放与硫酸乙酰肝素结合的生长因子。乙酰肝素酶在大部分人肿瘤细胞中高表达，并显著增加肿瘤细胞的血管生成和迁移能力。研究已经证实升高的乙酰肝素酶水平与许多肿瘤类型的晚期进展和转移相关。例如，高水平的乙酰肝素酶与患者较短的手术后存活时间相关。在Vlodavsky和Sanderson的实验室已证明乙酰肝素酶在肿瘤转移中的直接作用。除了酶促功能(包括释放与HS结合的生长因子和降解细胞外基质(ECM))，乙酰肝素酶还具有非酶促功能，其可影响肿瘤行为及微环境。肝素是糖胺聚糖家族中的一种线形多分散的硫酸化多糖，其具有抗凝血和抗血栓形成活性。肝素的糖链由交替的糖醛酸和D-葡糖胺组成，主要的重复单元是2-O-硫酸化L-艾杜糖醛酸(IdoA2S)α(1→4)和N-，6-O-二硫酸化D-葡糖胺(GlcN6S)；较少组分是非硫酸化L-艾杜糖醛酸和D-葡萄糖醛酸，以及N-乙酰基D-葡糖胺和N-，3-O-，6-O-三硫酸化D-葡糖胺(Casu B.，2005.“Structure and active domains of heparin.”In：Chemistry and biology of heparin and heparan sulfate.Amsterdam：Elsevier.1-28；Casu B.和Lindahl U.，2001，“Structure and biological interactions of heparin and heparan sulfate.”Adv Carbohydr Chem Biochem，57：159-206)。肝素可有效地抑制乙酰肝素酶，但是在乙酰肝素酶抑制策略中，由于其抗凝血活性，将肝素以高剂量使用是不可能的。有趣的是，比肝素更可被生物利用且较低抗凝血活性的低分子量肝素(LMWH)似乎可能通过对肿瘤生长和转移的直接作用延长癌症患者的存活期。这可能至少部分由于对乙酰肝素酶活性的抑制(Zacharski L.R.和Lee，A.Y.2008.Heparin as an anticancer therapeutic.Expert Opin Investig Drugs 17：1029-1037)。现有技术已经公开了一类可作为乙酰肝素酶抑制剂的非抗凝血肝素，其中大部分包含结构改造后的非硫酸化糖醛酸残基，此类结构可通过断裂糖胺聚糖残基上的2位-3位碳-碳键(二醇裂解)而使糖苷环开环获得。CN105744940A中公开了糖胺聚糖的羧基化衍生物及其抗肿瘤的用途。
技术实现思路
本专利技术提供一种糖胺聚糖衍生物，其同时具有抗肿瘤生长和抗肿瘤转移活性，特别是具有良好的抗肿瘤转移活性。本专利技术的第一方面提供糖胺聚糖衍生物，其包含式(I)的结构单元、式(IV)的结构单元和式(V)的结构单元：其中：R1m、R1n和R1x在每次出现时各自独立地选自H、-SO3-·(1/q Eq+)和-(C＝O)CH3，并且R1m、R1n和R1x在每次出现时优选为-SO3-·(1/q Eq+)或-(C＝O)CH3；R2m、R2n和R2x在每次出现时各自独立地选自H和-SO3-·(1/q Eq+)；R3n在每次出现时各自独立地选自H和-SO3-·(1/q Eq+)；R4m、R4n和R4x在每次出现时各自独立地选自H和-SO3-·(1/q Eq+)；E在每次出现时各自独立地选自H、碱金属(优选锂、钠、钾、铷或铯)、碱土金属(优选镁或钙)和铝；q在每次出现时各自独立地为1、2或3的整数；所述糖胺聚糖衍生物的重均分子量为7000-14000Da，优选为8000-13500Da，例如8500-13000Da、8500-12500Da或9000-12500Da；并且所述糖胺聚糖衍生物的糖醛酸开环度为25％-80％，优选25-60％。本专利技术的第二方面提供药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本专利技术的糖胺聚糖衍生物以及一种或多种药学上可接受的载体，所述药物组合物优选为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂。本专利技术的第三方面提供本专利技术的糖胺聚糖衍生物或者本专利技术的药物组合物在制备用于抑制肿瘤生长和/或转移的药物中的用途。本专利技术的第四方面提供本专利技术的糖胺聚糖衍生物或者本专利技术的药物组合物，其用于抑制肿瘤生长和/或转移。本专利技术的第五方面提供抑制肿瘤生长和/或转移的方法，所述方法包括向需要其的个体给药有效量的本专利技术的糖胺聚糖衍生物或者本专利技术的药物组合物。本专利技术的第六方面提供本专利技术的糖胺聚糖衍生物的制备方法。附图说明图1显示给予测试样品后小鼠的生存率。具体实施方式本文中的术语“硫酸化程度”是指磺羧比(SO3-/COO-摩尔比率)，其通过根据Casu B.和Gennaro U.，1975，Carbohydr Res 39，168-176的电导滴定来测定。本文中的术语“羧基增量”是指原料的硫酸化程度与羧基化衍生物的硫酸化程度的比率。更具体地，原料的硫酸化程度是将原料经第一个氧化步骤后获得的糖胺聚糖中间体的样品用NaBH4还原后测定的硫酸化程度。本文中的术语“糖醛酸开环度”是指开环的糖醛酸残基数量/总的糖醛酸残基数量，并且术语“糖醛酸环氧度”是指式(V)的具有环氧结构的糖醛酸结构单元占总糖醛酸残基的比例。它们的检测和计算参考文献Guerrini，M.，Guglieri，S.，Naggi，A.，Sasisekharan，R.，&Torri，G.(2007).Low molecular weight heparins：Structural differentiation by bidimentional nuclear magnetic resonance spectroscopy.Seminars in Thrombosis and Hemostasis，33，478-487中的核磁方法进行。糖胺聚糖衍生物在一些实施方案中，本专利技术提供糖胺聚糖衍生物，其包含式(I)的结构单元、式(IV)的结构单元和式(V)的结构单元：其中：R1m、R1n和R1x在每次出现时各自独立地选自H、-SO3-·(1/q Eq+)和-(C＝O)CH3，并且R1m、R本文档来自技高网...

【技术保护点】
糖胺聚糖衍生物，其包含式(I)的结构单元、式(IV)的结构单元和式(V)的结构单元：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180202 CN 2018101055283糖胺聚糖衍生物，其包含式(I)的结构单元、式(IV)的结构单元和式(V)的结构单元：



其中：
R
1m、R
1n和R
1x在每次出现时各自独立地选自H、-SO
3-·(1/q E
q+)和-(C＝O)CH
3，并且R
1m、R
1n和R
1x在每次出现时优选为-SO
3-·(1/q E
q+)或-(C＝O)CH
3；

R
2m、R
2n和R
2x在每次出现时各自独立地选自H和-SO
3-·(1/q E
q+)；

R
3n在每次出现时各自独立地选自H和-SO
3-·(1/q E
q+)；

R
4m、R
4n和R
4x在每次出现时各自独立地选自H和-SO
3-·(1/q E
q+)；

E在每次出现时各自独立地选自H、碱金属(优选锂、钠、钾、铷或铯)、碱土金属(优选镁或钙)和铝；
q在每次出现时各自独立地为1、2或3的整数；
所述糖胺聚糖衍生物的重均分子量为7000-14000Da，优选为8000-13500Da，例如8500-13000Da、8500-12500Da或9000-12500Da；并且
所述糖胺聚糖衍生物的糖醛酸开环度为25％-80％，优选25-60％。


权利要求1的糖胺聚糖衍生物，其还包含式(II)的结构单元：



其中：
R
2t和R
3t在每次出现时各自独立地选自H和-SO
3-·(1/q E
q+)；

E在每次出现时各自独立地选自H、碱金属(优选锂、钠、钾、铷或铯)、碱土金属(优选镁或钙)和铝；并且
q在每次出现时各自独立地为1、2或3的整数。


权利要求1或2的糖胺聚糖衍生物，其还包含式(III)的结构单元：



其中：
R
2p在每次出现时各自独立地选自H和-SO
3-·(1/q E
q+)；

E在每次出现时各自独立地选自H、碱金属(优选锂、钠、钾、铷或铯)、碱土金属(优选镁或钙)和铝；并且
q在每次出现时各自独立地为1、2或3的整数。


权利要求1-3中任一项的糖胺聚糖衍生物，其还包含式(VI)的结构单元：



其中：
R
2r和R
3r在每次出现时各自独立地选自H和-SO
3-·(1/q E
q+)；

E在每次出现时各自独立地选自H、碱金属(优选锂、钠、钾、铷或铯)、碱土金属(优选镁或钙)和铝；并且
q在每次出现时各自独立地为1、2或3的整数。


权利要求1-4中任一项的糖胺聚糖衍生物，其还包含式(VII)的结构单元：



其中：
R
1s在每次出现时各自独立地选自H、-SO
3-·(1/q E
q+)和-(C＝O)CH
3，并且优选为-SO
3-·(1/q E
q+)或-(C＝O)CH
3；

R
2s、R
3s和R
4s在每次出现时各自独立地选自H和-SO
3-·(1/q E
q+)；

E在每次出现时各自独立地选自H、碱金属(优选锂、钠、钾、铷或铯)、碱土金属(优选镁或钙)和铝；并且
q在每次出现时各自独立地为1、2或3的整数。


权利要求1-5中任一项的糖胺聚糖衍生物，其中糖醛酸环氧度小于25％。


权利要求1-6中任一项的糖胺聚糖衍...

【专利技术属性】
技术研发人员：任丽鸽，王景文，金学文，张利利，林森茂，李锂，
申请(专利权)人：深圳市海普瑞药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44