一种体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞的方法技术

一种体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞的方法，它涉及干细胞、细胞培养领域。它用于促进毛囊再生和改善脱发，并和其他干细胞及3‑D组织工程材料结合，替代皮肤移植修复损伤。方法：一、人脐带间充质干细胞取材，原代培养、消化传代、扩增及冻存；二、诱导hUC‑MSCs分化为SKPs细胞悬球，即完成。本发明专利技术高效诱导MSCs分化诱导成为SKPs细胞，以替代来源极为受限的皮肤中的真皮干细胞，为临床解决真皮干细胞采集困难的问题提供了新出路，在临床用于促进毛囊再生和改善脱发。并和其他干细胞及3‑D组织工程材料结合，替代皮肤移植修复损伤。本发明专利技术应用于体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞。

【技术实现步骤摘要】
一种体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞的方法
本专利技术属于干细胞、细胞培养领域，具体涉及体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞的方法。
技术介绍
皮肤是人体最大的器官，是人体与外界接触的第一道屏障。烧烫伤、创伤、及慢性疾病如糖尿病并发症造成的大面缺损和深度损伤无法自发修复，需皮肤修补和植皮等人工干预治疗。由于移植皮肤来源和应用受到多重限制，研究实用的皮肤替代物一直方兴未艾。另一方面，作为皮肤病中最常见的脱发，在日常生活中给众多的患者带来很大的烦恼。病理性脱发是指头发异常或过度的脱落。实质上是毛囊细胞长期处于休止期或退行期的表现。随着生活工作压力的增加，脱发年龄越来越年轻。当然治疗脱发要首先从病因上着手，但是许多脱发原因是不能完全去除的。局部对症用药和全身用药，包括促进血液循环和中医中药扶正固本疗法疗效都有限。毛发移植价格昂贵，而且因为毛囊的生存条件没有得到足够改善，移植的毛发难以长期生存。皮肤中存在着多种不同的干细胞。毛囊干细胞(hairfolliclestemcells,HFSCs)，存在于毛囊上段的突起区域，能够分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞的方法，其特征在于它按以下步骤实现：/n一、人脐带间充质干细胞取材，进行原代培养、消化传代、扩增及冻存；/n二、诱导人脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞悬球：人脐带间充质干细胞经过上述消化传代后悬浮于真皮干细胞培养基中，计数，稀释到密度为1×10

【技术特征摘要】
1.一种体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞的方法，其特征在于它按以下步骤实现：
一、人脐带间充质干细胞取材，进行原代培养、消化传代、扩增及冻存；
二、诱导人脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞悬球：人脐带间充质干细胞经过上述消化传代后悬浮于真皮干细胞培养基中，计数，稀释到密度为1×105/ml，单细胞悬液按1.5ml/孔接种在低吸附6孔培养板中，真皮干细胞培养基中加入体积百分含量为1‰的10mMY-27632，每2-3天换液一次，培养6天，收集真皮干细胞细胞悬球，300rpm离心2min，然后悬浮于真皮干细胞培养基，即完成体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞。


2.根据权利要求1所述的一种体外诱导脐带间充质干细胞分化为真皮干细胞的方法，其特征在于步骤一中所述人脐带间充质干细胞取材，进行原代培养、消化传代、扩增及冻存的具体操作如下：
a、新生儿脐带经体积百分含量为75％的酒精消毒处理，然后用生理盐水清洗2次；
b、将清洗后的脐带剪成长度为2-3cm的段，在平皿内剥离华通式胶；
c、将华通式胶置于离心管内，用手术剪剪碎至1-2mm3的块状；
d、按照2g/T75培养瓶接种于脐带间充质干细胞完全培养基，在37℃、5％CO2培养箱中培养，4-...

【专利技术属性】
技术研发人员：阎军，李洋，张怡，刘艳青，
申请(专利权)人：天晴干细胞股份有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23