本公开内容的实施方案包括使用制备的成纤维细胞和/或来自其的条件培养基的方法和组合物。在特定实施方案中，所制备的成纤维细胞具有增强的再生能力并且可以具有一种或多种细胞因子和/或生长因子的分泌增加；可以具有抗凋亡活性的增加；和/或可以具有调节的免疫原性。在具体的实施方案中，通过暴露于低氧和/或一氧化碳来制备成纤维细胞。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】加强成纤维细胞再生活性
本公开内容的实施方案至少涉及细胞生物学、分子生物学、生物化学、细胞疗法和医学领域。
技术介绍
成纤维细胞的主要功能之一是通过连续分泌细胞外基质的前体来维持结缔组织的结构完整性。成纤维细胞分泌细胞外基质所有组分的前体，主要是基质以及各种纤维或结构蛋白。它们还分泌影响和协调邻近细胞的功能和产物以增强组织应答的小分子量扩散因子。细胞外基质的组成显著地决定了结缔组织的物理特性。成纤维细胞参与体内的许多过程。伤口愈合是一个复杂的过程，其需要联合激活包括成纤维细胞活性调节在内的多个过程。在伤口愈合过程期间，真皮成纤维细胞迁移到伤口床，在那里伤口细胞分泌的转化生长因子-1基质分子(例如，纤连蛋白剪接变体)和机械提示(即，基质张力)起始它们分化为肌成纤维细胞。肌成纤维细胞能与真皮成纤维细胞区分开，因为它们表达平滑肌α-肌动蛋白，包含成束的收缩性微丝，并且具有广泛的细胞与基质附着位点。肌成纤维细胞合成、沉积并重塑细胞外基质以形成肉芽组织，并从而使伤口收缩。在愈合过程期间形成的结缔组织通常在性质上是纤维性的，并且通常通过称为纤维化的过程形成结缔组织疤痕。本领域已知使用自体成纤维细胞(即从供体获得的成纤维细胞，供体也将是培养的成纤维细胞的受体)治疗的方法。这种成纤维细胞的已知用途中有通过施用培养的成纤维细胞来促进伤口(例如，上皮伤口或瘘管)愈合的方法，通过加强声带缺陷附近的组织进行矫正手术方法；以及治疗声带结疤和修复皮肤和软组织缺陷的方法。尽管在再生医学中利用成纤维细胞的可能性很多，但是目前限制成纤维细胞治疗应用的因素是缺乏优化成纤维细胞的再生活性的手段。本公开内容提供了针对该需求的解决方案。
技术实现思路
本公开内容的实施方案包括针对成纤维细胞的制备的方法和组合物，使得它们具有一种或多种在未如此制备的成纤维细胞中缺乏的属性。在特定实施方案中，将成纤维细胞制备为具有增强的再生特性。在具体的实施方案中，成纤维细胞具有一种或多种细胞因子和/或一种或多种生长因子的分泌增加，它们具有抗凋亡活性的增加，和/或成纤维细胞的免疫原性得到调节。在具体的实施方案中，将成纤维细胞暴露于足够水平的低氧和/或一氧化碳，使得成纤维细胞的再生能力与未相似地暴露于足够水平的低氧和/或一氧化碳的成纤维细胞相比得到增强。在一些实施方案中，将成纤维细胞和/或从其条件化的培养基提供给有此需要的个体。在具体的实施方案中，所述个体患有医疗病况，需要在医疗病况之后补充细胞或组织，包括在某些情况下在局部位点。条件培养基可以包含一种或多种生长因子、一种或多种细胞因子、一种或多种肽、一种或多种蛋白质和/或其组合。本公开内容的实施方案包括增强多个成纤维细胞的治疗活性的方法，其包括向成纤维细胞提供有效量的一种或多种试剂和/或一种或多种条件的步骤，所述试剂和/或条件包括刺激成纤维细胞中的天然血红素加氧酶(HO)-1表达，将成纤维细胞暴露于外源提供的HO-1，和/或由外源提供的载体在成纤维细胞中表达HO-1。在具体的实施方案中，治疗活性包括成纤维细胞的再生活性。成纤维细胞可以具有一种或多种细胞因子和/或一种或多种生长因子的分泌增加；成纤维细胞可以具有抗凋亡活性增加；和/或成纤维细胞的免疫原性得到调节，例如降低或增加。在特定实施方案中，一种或多种试剂和/或条件包括低氧、一氧化碳或其组合。可以在低氧后将一氧化碳提供给成纤维细胞。可以在低氧的同时将一氧化碳提供给成纤维细胞。在特定实施方案中，将有效量的成纤维细胞和/或来自其的条件培养基提供给个体。所述个体可以患有医学病况，成纤维细胞和/或来自其的条件培养基对所述医学病况是治疗性的，例如，使得改善至少一种症状。在具体的实施方案中，所述医学病况是自身免疫性疾病、退行性疾病、炎性疾病和/或纤维化疾病。所述条件培养基可以包含一种或多种生长因子和/或一种或多种细胞因子。例如，低氧可以是0.1％-10％、0.1％-5％、0.1％-2.5％或0.1％-1％的氧气。在具体的实施方案中，低氧发生至少或不超过30分钟至3天的一段时间，尽管在某些情况下可以少于30分钟或大于3天。可以将成纤维细胞在暴露于低氧、一氧化碳或其组合之前和/或期间暴露于一种或多种生长因子。在一个实施方案中是制备成纤维细胞的方法，其包括将成纤维细胞暴露于有效量的低氧、一氧化碳或两者的步骤。在一个具体的实施方案中，将成纤维细胞同时暴露于低氧和一氧化碳。在具体的实施方案中，将成纤维细胞在不同时间暴露于低氧和一氧化碳。在某些情况下，将成纤维细胞在暴露于一氧化碳之前暴露于低氧。在特定情况下，将有效量的成纤维细胞和/或来自其的条件培养基提供给需要其的个体。所述个体可以患有自身免疫性疾病、退行性疾病、炎性疾病和/或纤维化疾病。前述内容已经相当广泛地概述了本公开内容的特征和技术优点，以便可以更好地理解下面的详细描述。在下文中将描述形成本文权利要求的主题的附加特征和优点。本领域技术人员应当理解，所公开的概念和具体实施方案可以容易地用作修饰或设计用于进行本设计的相同目的的其他结构的基础。本领域技术人员还应该认识到，这样的等效结构不脱离所附权利要求书中阐述的精神和范围。当结合附图考虑时，从以下描述中将更好地理解被认为是本文公开的设计的特征的新颖特征，关于组织和操作方法，以及另外的目的和优点。但是，应当明确地理解，提供每个附图仅出于示例说明和描述的目的并且不旨在作为对本公开内容的限制的定义。附图说明为了更全面地理解本公开内容，现在参考结合附图的以下描述，其中：图1显示了通过用低氧、一氧化碳、或低氧后一氧化碳培养成纤维细胞来刺激VEGF产生。图2显示了通过用低氧、一氧化碳、或低氧同时一氧化碳培养成纤维细胞来刺激VEGF产生。专利技术详述如本文的说明书中所使用的，“a”或“an”可表示一个或多个。如在本文的权利要求书中所使用的，当与单词“comprising”结合使用时，单词“a”或“an”可以表示一个或多于一个。如本文所使用的，“另一”可以表示至少第二或更多。在具体的实施方案中，例如，本公开内容的方面可以“基本上由本公开内容的一个或多个序列组成”或“由本公开内容的一个或多个序列组成”。本公开内容的一些实施方案可以由本公开内容的一个或多个元素、方法步骤和/或方法组成或基本上由其组成。预期能够相对于本文描述的任何其他方法或组合物实施本文描述的任何方法或组合物。可以相对于本文描述的任何其他方法或组合物采用在本公开内容的方法和/或组合物的上下文中讨论的实施方案。因此，关于一种方法或组合物的实施方案也可以应用于本公开内容的其他方法和组合物。本公开内容至少涉及细胞疗法领域，更具体地，本公开内容涉及通过在特定培养条件下进行培养以增强成纤维细胞自身的再生活性来加强成纤维细胞再生活性。本公开内容进一步涉及修饰一种或多种细胞培养条件以诱导能够增加成纤维细胞的治疗活性的细胞程序。在一些实施方案中，如本文使用的术语“再生活性”定义为从头生成细胞和组织的能力。在某些实施方案中是通过向成纤维细胞提供有效量的增强一种或多种活性(例如对于本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种增强多个成纤维细胞的治疗活性的方法，其包括以下步骤：向成纤维细胞提供有效量的一种或多种试剂和/或条件，所述试剂和/或条件包括刺激成纤维细胞中的天然血红素加氧酶(HO)-1表达，将成纤维细胞暴露于外源提供的HO-1，和/或由外源提供的载体在成纤维细胞中表达HO-1。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171220 US 62/608,0311.一种增强多个成纤维细胞的治疗活性的方法，其包括以下步骤：向成纤维细胞提供有效量的一种或多种试剂和/或条件，所述试剂和/或条件包括刺激成纤维细胞中的天然血红素加氧酶(HO)-1表达，将成纤维细胞暴露于外源提供的HO-1，和/或由外源提供的载体在成纤维细胞中表达HO-1。
2.权利要求1所述的方法，其中所述治疗活性包括成纤维细胞的再生活性。
3.权利要求1或2所述的方法，其中所述成纤维细胞具有一种或多种细胞因子和/或生长因子的分泌增加。
4.权利要求1、2或3所述的方法，其中所述成纤维细胞具有抗凋亡活性的增加。
5.权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述成纤维细胞的免疫原性得到调节。
6.权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂和/或条件包括低氧、一氧化碳或其组合。
7.权利要求6所述的方法，其中在低氧后将一氧化碳提供给所述成纤维细胞。
8.权利要求6所述的方法，其中在低氧的同时将一氧化碳提供给所述成纤维细胞。
9.权利要求1-8中任一项所述的方法，其中将有效量的成纤维细胞和/或来自其的条件培养基提供给个体。
10.权利要求9所述的方法，其中所述个体患有自身免疫...
【专利技术属性】
技术研发人员：P·奥希伦，T·伊奇姆，
申请(专利权)人：菲格内有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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