艾蒿内酯C用于治疗人骨肉瘤的用途制造技术

本发明专利技术公开了艾蒿内酯C用于治疗人骨肉瘤的用途。本发明专利技术发现，艾蒿内酯C对人骨肉瘤MG63细胞具有显著的增殖抑制作用，其作用机制可能与抑制细胞中COX‑2蛋白表达有关。因此，艾蒿内酯C具有开发成治疗人骨肉瘤药物的前景，可以开发成以艾蒿内酯C为有效成分的药物制剂，药物剂型包括但不限于常规的片剂、丸剂、胶囊、注射剂，使用的辅料包括但不限于常规的固体辅料、液体辅料或者半固体辅料。

【技术实现步骤摘要】
艾蒿内酯C用于治疗人骨肉瘤的用途
本专利技术属于医药领域，具体涉及艾蒿内酯C用于治疗人骨肉瘤的用途。
技术介绍
骨肉瘤(Osteosarcoma，OS)是青少年最常见的原发于骨组织的恶性肿瘤，其目前的主要治疗手段是手术联合新辅助化疗。但近30年以来，骨肉瘤的总体疗效没有显著的提高。寻找新的治疗和诊断方法成为骨肉瘤研究热点。艾蒿内酯C和1-表-4,5-二氢灰蒿素C是存在于艾蒿中的两种天然化合物，现有技术没有这两种化合物用于人骨肉瘤治疗的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供艾蒿内酯C用于治疗人骨肉瘤的用途。实现本专利技术上述目的技术方案如下：艾蒿内酯C用于制备治疗人骨肉瘤的药物的用途。一种药物制剂，用于治疗人骨肉瘤，以艾蒿内酯C为有效成分，还含有药学辅料。优选地，所述药学辅料包括但不限于常规的固体辅料、液体辅料或者半固体辅料，药物剂型包括但不限于常规的片剂、丸剂、胶囊、注射剂。本专利技术的突出优点：研究发现，艾蒿内酯C对人骨肉瘤MG63细胞具有显著的增殖抑制作用，其作用机制可能与抑制细胞中COX-2蛋白表达有关。因此，艾蒿内酯C具有开发成治疗人骨肉瘤药物的前景，可以开发成以艾蒿内酯C为有效成分的药物制剂，药物剂型包括但不限于常规的片剂、丸剂、胶囊、注射剂，使用的辅料包括但不限于常规的固体辅料、液体辅料或者半固体辅料。附图说明图1为Westernblotting实验结果，该结果显示随着药物浓度的增加，艾蒿内酯C、1-表-4,5-二氢灰蒿素C对人骨肉瘤MG63细胞中COX-2蛋白表达的抑制作用也增强。具体实施方式下面就结合实施例具体介绍本专利技术的实质性内容，由于篇幅原因，实验过程的描述无法做到非常详细，凡是实验中未详细描述的部分均为本领域技术人员熟知的常规操作。一、实验材料人骨肉瘤MG63细胞购自ATCC，于液氮中保存。将人骨肉瘤MG63细胞按照常规方法复苏后，用含有10％胎牛血清的RPMI1640培养基于37℃、5％CO2培养箱中培养。胎牛血清购自索莱宝，RPMI1640培养基购自ThermoFisherScientific。MTT、DMSO购自碧云天生物。艾蒿内酯C、1-表-4,5-二氢灰蒿素C纯度不低于98％。COX-2一抗、二抗购自艾美捷科技有限公司。二、实验方法1、细胞培养将人骨肉瘤MG63细胞按照常规方法复苏后，用含有10％胎牛血清的RPMI1640培养基于37℃、5％CO2培养箱中培养传代。2、MTT法测定细胞增殖活性取对数生长期的人骨肉瘤MG63细胞制成浓度为2.5×104/mL的细胞悬液，以每孔200μL接种于96孔板中，于37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，将培养基更换为含有1、2、5、10、20μM艾蒿内酯C(药物组A)或1-表-4,5-二氢灰蒿素C(药物组B)的完全培养基，每个浓度设置5个复孔，另设不加药物的对照组。然后于37℃、5％CO2培养箱中继续培养48h后取出，每孔加入20μL5mg/mL灭菌的MTT溶液，培养4h后弃去上清液，每孔加入150μLDMSO，遮光低速振荡使产生的结晶物溶解，最后用酶标仪选择570nm波长处测各孔吸光度(A)值，并按公式计算不同浓度药物对细胞的增殖抑制率：抑制率/％＝(A对照－A药物)/A对照×100％。3、Westernblotting法检测COX-2蛋白的表达取对数生长期的人骨肉瘤MG63细胞制成浓度为2.5×104/mL的细胞悬液，接种于培养皿中，于37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，将培养基更换为含有5、10、20μM艾蒿内酯C(药物组A)或1-表-4,5-二氢灰蒿素C(药物组B)的完全培养基，另设不加药物的对照组，继续培养48h后，用预冷的PBS冲洗MG63细胞3次，裂解液裂解细胞，提取总蛋白，置于冰上30min。并于4℃环境下12000r/min，离心10min，取上清液，BCA法测定蛋白浓度，取20μg总蛋白加入上样缓冲液煮沸5min，行凝胶电泳，转至PVDF膜，封闭液37℃封闭2h，分别加入兔抗人COX-2多克隆抗体(1:1000)，4℃孵育过夜，辣根过氧化物酶标记的二抗室温孵育2h，显色，灰度扫描分析。4、统计学方法所有实验重复3次，所有数据采用SPSS17.0统计分析，计量资料以均值±标准差表示，多组比较采用q检验，两两比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。三、实验结果1、药物对人骨肉瘤MG63细胞增殖的影响MTT实验结果如表1所示，该结果显示随着药物浓度的增加，艾蒿内酯C、1-表-4,5-二氢灰蒿素C对人骨肉瘤MG63细胞的增殖抑制率也增强。表1药物对人骨肉瘤MG63细胞的增殖抑制作用2、药物对人骨肉瘤MG63细胞中COX-2蛋白表达的影响Westernblotting实验结果如图1所示，该结果显示随着药物浓度的增加，艾蒿内酯C、1-表-4,5-二氢灰蒿素C对人骨肉瘤MG63细胞中COX-2蛋白表达的抑制作用也增强。上述实验结果说明，艾蒿内酯C、1-表-4,5-二氢灰蒿素C对人骨肉瘤MG63细胞具有显著的增殖抑制作用，其作用机制可能与抑制细胞中COX-2蛋白表达有关。因此，艾蒿内酯C、1-表-4,5-二氢灰蒿素C具有开发成治疗人骨肉瘤药物的前景，可以开发成以艾蒿内酯C或1-表-4,5-二氢灰蒿素C为有效成分的药物制剂，药物剂型包括但不限于常规的片剂、丸剂、胶囊、注射剂，使用的辅料包括但不限于常规的固体辅料、液体辅料或者半固体辅料。上述实施例是对本专利技术实质性内容的体现，用于更好地解释本专利技术，但本领域技术人员应当知晓，不应将本专利技术的保护范围局限于上述具体的实施例。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.艾蒿内酯C用于制备治疗人骨肉瘤的药物的用途。/n

【技术特征摘要】
1.艾蒿内酯C用于制备治疗人骨肉瘤的药物的用途。


2.一种药物制剂，用于治疗人骨肉瘤，以艾蒿内酯C为有效成分，还含有药学辅料。

【专利技术属性】
技术研发人员：王莉，童凯，张艳峰，
申请(专利权)人：南京盖斯夫医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32