牛蒡子苷或苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途制造技术

本发明专利技术属于医药领域，具体涉及一种牛蒡子苷或苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。本发明专利技术提供的牛蒡子苷或牛蒡子苷元能够抑制基质金属蛋白酶‑13的表达，逆转骨性关节炎膝关节软骨磨损，从而能够应用于骨性关节炎的治疗。

【技术实现步骤摘要】
牛蒡子苷或苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途
本专利技术涉及医药领域，具体涉及一种牛蒡子苷或苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。
技术介绍
骨性关节炎(osteoarthritis，OA)是一种以关节软骨的变性、破坏及骨质增生为特征的慢性退行性关节病，其临床表现为缓慢发展的关节疼痛、压痛、僵硬、关节肿胀、活动受限和关节畸形等。骨性关节炎是最常见的一类关节炎，其发病人数比风湿性关节炎高出十倍以上，全球约有2.5亿人患有骨性关节炎。骨性关节炎的病程可以长达20-30年的发展周期，在早期多数患者无明显症状，随着病程进展，患者逐渐出现病变的关节持续性隐痛，活动增加时加重，休息后好转。后期关节肿胀、增大及运动受限，疼痛加重，而到晚期，则部分患者需要进行住院治疗或者进行关节置换手术。据统计，在美国，2011年大概有96万骨性关节炎病人进行住院治疗，而这些病人的花费总计达到140亿美元，成为美国住院病人花费高居第二位的疾病。目前，针对骨性关节炎的治疗还是对症治疗为主，在早中期主要为锻炼和生活习惯管理；到了后期则主要是针对疼痛进行对症治疗，服用抗炎镇痛类药物；最后则只能是进行关节置换术。所有的这些治疗均不能阻止骨性关节炎的病程，最终病人还是会承受极大的痛苦和经济负担。因此开发治疗阻断骨性关节炎病理进程的抗骨性关节炎的治疗药物将极大减轻病人痛苦和减轻社会负担。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种牛蒡子苷或苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。本专利技术提供了一种牛蒡子苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。本专利技术还提供了一种牛蒡子苷在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本专利技术各较佳实例。本专利技术所用试剂和原料均市售可得。本专利技术的积极进步效果在于：提供一种牛蒡子苷或苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。附图说明图1为实施例1中牛蒡、牛蒡子提取物、牛蒡子苷和牛蒡子苷元对抑制基质金属蛋白酶-13的表达。图2为实施例2中牛蒡子苷元缩短前交叉韧带切除术后的骨性关节炎模型小鼠的潜伏期。图3为实施例3中牛蒡子苷元逆转骨性关节炎小鼠的膝关节软骨磨损。图4为实施例3中各组小鼠的骨性关节炎评分值。具体实施方式下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。实施例1：牛蒡、牛蒡子提取物，牛蒡子苷和牛蒡子苷元明显抑制H2O2诱导小鼠原代软骨细胞的MMP13增加。通过原代培养小鼠软骨细胞，然后加入H2O2诱导原代软骨细胞高表达基质金属蛋白酶-13(matrixmetalloproteinase13，MMP13)，另一方面，H2O2诱导的同时分别加入牛蒡、牛蒡子提取物，牛蒡子苷和牛蒡子苷元，然后通过ELISA实验检测细胞培养液中的MMP13水平，评价牛蒡、牛蒡子提取物，牛蒡子苷和牛蒡子苷元是否可以抑制H2O2诱导的MMP13表达增加。结果表明，牛蒡、牛蒡子提取物，牛蒡子苷和牛蒡子苷元均可以明显的抑制H2O2诱导小鼠原代软骨细胞的MMP13增加。1、实验原理研究发现，MMP13由关节软骨和滑膜细胞分泌，在骨性关节炎患者的关节滑膜和软骨细胞中发现MMP13大量表达，增加关机软骨细胞外基质的降解，导致软骨破坏的出现，并最终导致骨性关节炎的发生、发展。最近的研究也表明采用MMP13的抑制剂能够明显改善骨性关节炎的软骨降解，阻断骨性关节炎的病理进程，从而起到治疗骨性关节炎的作用。另一方面，氧化应激为导致骨性关节炎的重要因素之一。因此，本实验采用H2O2诱导小鼠原代软骨细胞的MMP13增加，同时加入牛蒡、牛蒡子提取物，牛蒡子苷和牛蒡子苷元，检测其是否可以抑制H2O2诱导小鼠原代软骨细胞的MMP13增加。2、实验材料和方法6周龄的C57小鼠购于上海灵畅实验动物有限公司，所有试剂(DMEM，FBS，PS，胰蛋白酶等)购于Gibico公司。6周龄的C57小鼠的膝关节软骨组织在无菌条件下分离，并切成小于1mm3的组织块，并用冷PBS重复洗涤2-3次。将组织与0.25％胰蛋白酶在37℃恒温振荡器中孵育15-20分钟，然后在4℃下以1000g/min离心2分钟。弃去上清液，然后将组织与0.2％胶原酶II在37℃恒温振荡器中孵育60分钟。用过滤器过滤组织培养基，然后在4℃下以1000g/min离心8分钟，将细胞悬浮在含有10％胎牛血清(FBS)，100单位/mL青霉素-链霉素的Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)中。并在37℃，5％CO2细胞培养箱中培养。原代培养的软骨细胞铺板于6孔板中，细胞密度培养至80％后，加入100μM的H2O2，另一方面分别同时加入牛蒡、牛蒡子提取物，牛蒡子苷和牛蒡子苷元，以及溶剂(0.1％DMSO)作为对照，同时以未加入H2O2作为阴性对照，24小时后收集细胞培养液，然后通过EILSA实验检测细胞培养液中的MMP13水平。3、实验结果结果如图1(###，P＜0.001，H2O2处理组与无H2O2处理组比较；**，P＜0.01,***,P＜0.001,化合物处理组与H2O2处理组比较；+表示经H2O2诱导)所示，100μM的H2O2能够明显的增加原代软骨细胞的MMP13的表达，而牛蒡、牛蒡子提取物，牛蒡子苷和牛蒡子苷元均能够明显的抑制H2O2诱导小鼠原代软骨细胞的MMP13增加。实施例2：牛蒡子苷元(arctigenin)明显增加前交叉韧带切除术(Anteriorcruciateligamenttransection，ACLT)的骨性关节炎模型小鼠疼痛敏感性和机动性。通过对小鼠膝关节前交叉韧带切除术诱导小鼠的骨性关节炎模型，然后给予牛蒡子苷元进行治疗，随后通过热板实验检测牛蒡子苷元对骨性关节炎小鼠的疼痛敏感性和机动性。结果表明牛蒡子苷元能够明显的增加骨性关节炎小鼠的疼痛敏感性和机动性。1、实验原理小鼠膝关节的前交叉韧带切除术能够导致小鼠的膝关节半月板不稳定(destabilizationofthemedicalmeniscus，DMM)，从而诱导小鼠骨性关节炎。骨性关节炎的一个重要临床特征为关节疼痛、关节肿胀和活动受限，所以增加骨性关节炎小鼠的疼痛敏感性和小鼠机动性被认为对骨性关节炎具有治疗作用。因此，本实验对C57小鼠进行前交叉韧带切除术，诱导小鼠骨性关节炎，并给予牛蒡子苷元进行治疗，然后通过热板实验检测骨性关节炎小鼠的疼痛敏感性和机动性，进而评价牛蒡子苷元对骨性关节炎的治疗作用。2、实验材料和方法实验动物：30只野生型小鼠(C57BL/6J)(购于上海灵畅实验动物有限公司)，20只进行膝关节前交叉韧带切断术，10只进行假手术(暴露髌骨沟，不行前交叉韧带切除)。骨性关节炎模型：左腿膝盖处的内侧，切开2cm的切口；生理盐水本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种牛蒡子苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。/n

【技术特征摘要】
1.一种牛蒡子苷元在制备治疗骨性关节炎药物中的用途。
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【专利技术属性】
技术研发人员：朱志远，刘军，刘聪聪，
申请(专利权)人：苏州青雅启瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32