【技术实现步骤摘要】
一种核酸聚合酶活性检测方法的应用及试剂盒
本专利技术涉及生物检测
，特别是涉及一种核酸聚合酶活性检测方法的应用及试剂盒。
技术介绍
聚合酶链式反应(polymerasechainreaction，PCR)是常用的分子检测技术，PCR技术是以双链DNA作为模板，单链寡核苷酸为引物，通过热稳定的DNA聚合酶在一定反应环境内催化引物按碱基互补配对原则沿着模板链延伸。经过热变性、退火、延伸三个步骤的重复循环，实现在体外将特定的核苷酸片段进行指数级扩增的目的。PCR发生循环反应时对不同的循环步骤有不同的温度，要求的温度分别为变性(90℃左右)、退火(50℃左右)、延伸(70℃左右)。TaqDNA聚合酶在90℃以上仍能保持一定活性，因而是PCR反应常用的聚合酶。TaqDNA聚合酶的最高生物学活性温度在70℃～75℃，然而PCR反应在升温时(20℃～70℃)，TaqDNA聚合酶仍然有一定的聚合酶活性，如果没有进行热启动封闭，那么聚合酶就可能在该环境下进行催化延伸，容易使PCR反应发生引物二聚体以及非特异性的扩增，影响...
【技术保护点】
1.一种核酸聚合酶活性检测方法的应用,其特征在于，核酸聚合酶活性检测方法应用于抗体封闭核酸聚合酶活性的评估和核酸聚合酶延伸活性的评估，所述核酸聚合酶活性检测方法为：/n检测核酸聚合酶延伸活性的模板为单链DNA，所述单链DNA与对应单链DNA设计的引物结合后加入核酸聚合酶进行qPCR链式反应，基于反应结果分析核酸聚合酶的活性。/n
【技术特征摘要】
1.一种核酸聚合酶活性检测方法的应用,其特征在于，核酸聚合酶活性检测方法应用于抗体封闭核酸聚合酶活性的评估和核酸聚合酶延伸活性的评估，所述核酸聚合酶活性检测方法为：
检测核酸聚合酶延伸活性的模板为单链DNA，所述单链DNA与对应单链DNA设计的引物结合后加入核酸聚合酶进行qPCR链式反应，基于反应结果分析核酸聚合酶的活性。
2.根据权利要求1所述的核酸聚合酶活性检测方法的应用,其特征在于，核酸聚合酶活性检测方法应用于抗体封闭TaqDNA聚合酶、高保真聚合酶活性的评估和TaqDNA聚合酶、高保真聚合酶延伸活性的评估。
3.一种实现如权利要求1或2所述应用的试剂盒，其特征在于，包含10×PCRbuffer、dNTP、荧光染料以及单链DNA和对应单链DNA设计的引物。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于，所述单链DNA的序列如SEQIDNO:1所示。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄秀，付亮剑，
申请(专利权)人：北京启衡星生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。