一种包膜替换型病毒载体疫苗及其构建方法技术

一种包膜替换型病毒载体疫苗，以水泡性口炎病毒VSV为载体，将VSV病毒基因组中的GP基因替换为冠状病毒的刺突蛋白S基因的截短体或病毒刺突蛋白S基因的胞外段与GP‑C段融合体ECD‑CA，刺突蛋白S基因截短体选自C端部分氨基酸缺失的基因，ECD‑CA为病毒刺突蛋白S基因的胞外段融合VSV病毒囊膜蛋白的跨膜和胞内段基因后的基因。本发明专利技术还涉及包膜替换型病毒载体疫苗的构建方法，首次将冠状病毒包膜完整的呈现给免疫细胞，此包膜替换型病毒具备良好的复制能力，可规模化快速生产，作为活疫苗接种最高程度地模拟冠状病毒侵染宿主细胞的生物学过程，快速激活机体的免疫系统，产生高强度和持久性的抗新冠病毒的中和抗体。

【技术实现步骤摘要】
一种包膜替换型病毒载体疫苗及其构建方法
本专利技术涉及一种利用水泡性口炎病毒(VSV)构建的有效预防冠状病毒感染，尤其包含SARS-CoV-2冠状病毒包膜进行替换的病毒载体疫苗及其构建方法。
技术介绍
世界卫生组织(WHO)近期宣布2019冠状病毒病(Covid-19)构成国际关注的突发公共卫生事件，截至2020年3月24日,全球共有38万例实验室确诊病例。在近期的研究中,一些Covid-19病例的严重程度与SARS-CoV相似，鉴于Covid-19的迅速传播,针对新冠病毒的疫苗已经迫在眉睫。冠状病毒(Coronavirus)在病毒学分类上属于巢状病毒目(orderNidovirals)、冠状病毒科(familyCoronavirade)、冠状病毒属(genusCoronavirus)的成员，基因组为单股、正链的RNA，基因组全长在26～32kb之间，是目前已知基因组最大的RNA病毒。冠状病毒在自然界的感染普非常广泛，常见的哺乳类动物如犬、猫、鼠、猪、牛以及家禽类都易感。冠状病毒按照核酸序列的系统发生分析，国际病毒学分类委员会(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包膜替换型病毒载体疫苗，其特征在于：所述包膜替换型病毒载体疫苗是将弹状病毒基因组中的GP基因替换为冠状病毒的刺突蛋白S基因截短体或病毒刺突蛋白S基因的胞外段融合体ECD-CA，利用反向遗传系统构建得到的用于预防冠状病毒感染的包膜替换型病毒载体疫苗，所述ECD-CA定义为病毒刺突蛋白S基因的胞外段ECD融合VSV病毒囊膜蛋白GP的跨膜和胞内段后的基因。/n

【技术特征摘要】
1.一种包膜替换型病毒载体疫苗，其特征在于：所述包膜替换型病毒载体疫苗是将弹状病毒基因组中的GP基因替换为冠状病毒的刺突蛋白S基因截短体或病毒刺突蛋白S基因的胞外段融合体ECD-CA，利用反向遗传系统构建得到的用于预防冠状病毒感染的包膜替换型病毒载体疫苗，所述ECD-CA定义为病毒刺突蛋白S基因的胞外段ECD融合VSV病毒囊膜蛋白GP的跨膜和胞内段后的基因。


2.根据权利要求1所述包膜替换型病毒载体疫苗，其特征在于：所述弹状病毒载体选自水泡性口炎病毒VSV，所述VSV选自印第安那株，所述刺突蛋白S基因选自SARS或SARS-CoV-2冠状病毒，所述刺突蛋白S基因截短体选自C端氨基酸缺失对应的基因，所述C端氨基酸缺失个数为18～72个。


3.根据权利要求2所述包膜替换型病毒载体疫苗，其特征在于：所述刺突蛋白S基因截短体选自C端缺失的基因，所述C端氨基酸缺失数目优选30个，且对应修饰后的刺突蛋白S对应的氨基酸序列为SEQIDNO.1。


4.根据权利要求1所述包膜替换型病毒载体疫苗，其特征在于：所述弹状病毒载体选自水泡性口炎病毒VSV，所述VSV选自印第安那株，所述刺突蛋白S基因的胞外段融合体ECD-CA选自冠状病毒，所述ECD-CA包含冠状病毒刺突蛋白S基因的胞外段ECD，所述ECD的C端融合了VSV的囊膜蛋白的跨膜和胞内段基因CA。


5.根据权利要求4所述的包膜替换型病毒载体疫苗，其特征在于：所述ECD-CA克隆到VSV基因组中M基因和L基因之间的编码阅读框中，所述ECD-CA氨基酸序列为SEQIDNO.2,所述ECD-CA人源化密码子基因序列为SEQIDNO.3。


6.根据权利要求2所述冠状病毒包膜替换型病毒载体疫苗，其特征在于：所述水泡性口炎病毒是其基质蛋白M的氨基酸发生突变后得到的病毒，所述基质蛋白M中氨基酸突变位点为第20位的亮氨酸、第51位甲硫氨酸、第110位的苯丙氨酸中的一个或多个且为非同义突变。


7.根据权利要求4所述冠状病毒包膜替换型病毒载体，其特征在于：所述病毒载体是减毒水泡性...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴飞，韦治明，秦晓峰，
申请(专利权)人：苏州奥特铭医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32