【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种血液检测方法及血液分析系统
本专利技术涉及血液检测,特别涉及血小板的光学检测方法及其血液分析系统。
技术介绍
人血液中含有红细胞、白细胞、血小板等各种细胞,其中血小板是直径为2-3微米的无核细胞,正常人的血液中含有15万至35万个/微升血小板。众所周知,血小板的常用测定方法之一是电阻抗法。该方法是使含血细胞的样本从具有两个电极的小孔间通过,当有血细胞(例如血小板)通过时,电阻发生变化,从而产生电阻脉冲,然后将检测到的脉冲绘制成直方图进行分析。正常的血液中,血小板的体积最小,白细胞体积最大,红细胞体积居中。检测到的脉冲强度与经过小孔的细胞体积相关,因而通过体积划分,就能够区分不同细胞种类。然而,在测试有些特殊样本时(如含有体积较大的血小板和体积较小的红细胞的样本)会影响血小板的检测准确性和精确度。这些特殊样本通常来自患有疾病的受试者,因而检测值的偏差会给临床诊断带来不利影响。针对这种情况,已提出了用对血小板的表面抗原有特异性的标记抗体对血小板进行标记并计数的方法(美国临床病理学杂志(2001):115,p460-464)。该方法,由于在测试过程中需要使用抗原抗体反应,因而得到结果需要花很长时间。因此,该方法不适用于诸如判断是否需要输血等需紧急作出判断的测定。而且该方法中的检测试剂也相对昂贵。流式细胞技术可以迅速测定血液中的细胞,比如美国专利US6,114,173、US4,882,284及US5,891,731中都公开了在非溶血条件下,利用染料对血细胞进行染色以更好地区分出血小板的方法。但是在血液中有 ...
【技术保护点】
一种血液检测方法,所述方法包括:/n用第一试剂处理血液样本以获得待测试样,所述第一试剂包括溶血剂,所述溶血剂将所述血液样本中的红细胞裂解为其光散射特性显著不同于血小板的碎片;/n使待测试样中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区,获取所述待测试样的光学信息;和/n根据所述光学信息中的至少两种获得血小板的光学信息。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180428 CN 2018104026761一种血液检测方法,所述方法包括:
用第一试剂处理血液样本以获得待测试样,所述第一试剂包括溶血剂,所述溶血剂将所述血液样本中的红细胞裂解为其光散射特性显著不同于血小板的碎片;
使待测试样中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区,获取所述待测试样的光学信息;和
根据所述光学信息中的至少两种获得血小板的光学信息。
根据权利要求1所述血液检测方法,其中所述至少两种光学信息为前向散射光强度和侧向散射光强度以将血小板与裂解的红细胞碎片区分开。
根据权利要求2所述血液检测方法,所述方法进一步包括根据前向散射光强度和侧向散射光强度的光学信息获得白细胞的光学信息,优选地根据所获得的白细胞光学信息区分白细胞亚群以获得白细胞的至少包括单核细胞、淋巴细胞和中性粒细胞的亚群。
根据权利要求1所述血液检测方法,其中所述溶血剂为选自烷基糖苷、三萜皂苷、甾族皂苷中的至少一种。
根据权利要求4所述血液检测方法,其中所述烷基糖苷选自具有通式I的糖苷类化合物:
R-(CH
2)
n-CH
3(I)
其中,R选自由单糖、去氧单糖和多糖所组成的组,n为5~17的整数。
根据权利要求1所述的血液检测方法,其中所述第一试剂进一步包括:
具有通式II的非离子型表面活性剂:
R
1-R
2-(CH
2CH
2O)
m-H(II)
其中,R
1为C8-C23的烷基,R
2为-O-、
或-COO-,m为10~50的整数;和
可选地,至少一种有机酸或其盐,其中所述有机酸或其盐选自由具有至少一个羧基或磺酸基的有机酸及其碱金属的盐所组成的组中。
根据权利要求1所述的血液检测方法,所述方法进一步包括用第二试剂处理所述血液样本,所述第二试剂包括荧光染料。
根据权利要求7所述的血液检测方法,其中使待测试样中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区,获取所述待测试样的光学信息进一步包括荧光信息,并且根据侧向散射光强度和荧光强度信息区分白细胞亚群以获得白细胞的至少包括单核细胞、淋巴细胞和中性粒细胞的亚群和/或识别幼稚粒细胞。
根据权利要求7或8所述的血液检测方法,其中所述荧光染料包括选自膜特异性染料和线粒体特异性染料中的一种第一荧光染料。
根据权利要求9所述的血液检测方法,其中所述膜特异性染料选自DiA、DiD、DiI、DiO、DiR、DiS、FDA、AlexaFluor488、SuperFluor488及以它们为母体的变形结构所组成的组,以及所述线粒体特异性染料选自JanusGreenB、MitoLiteRed、罗丹明123和Mitotracker系列及以它们的母体所组成的组。
根据权利要求9或10所述的血液检测方法,其中根据荧光强度和前向散射光强度信息识别血小板。
根据权利要求9或10所述的血液检测方法,其中所述方法进一步包括:当根据前向散射光强度和荧光强度构成的散点图的预设区域中的粒子数超过预定阈值时报警网织红细胞。
根据权利要求7或8所述的血液检测方法,其中所述荧光染料包括选自核酸特异性染料中的一种的第二荧光染料,优选地,所述核酸特异性染料为对网织红细胞的核酸特异性染料。
根据权利要求13所述的血液检测方法,其中所述方法进一步包括:根据荧光强度和散射光强度信息识别网织红细胞,优选的,根据荧光强度和前向散射光强度信息区分血小板和网织红细胞。
根据权利要求14所述的血液检测方法,其中所述方法进一步包括:根据荧光强度和前向散射光强度信息对网织红细胞进行计数。
根据权利要求7或8所述的血液检测方法,其中所述荧光染料包括选自膜特异性染料和线粒体特异性染料中的一种的第一荧光染料和选自核酸特异性染料中的一种的第二荧光染料。
根据权利要求16所述的血液检测方法,其中所述方法进一步包括:根据荧光强度和侧向散射光强度信息区分血小板和网织红细胞。
根据权利要求1~17中任一项所述的血液检测方法,其中所述方法进一步包括:根据所获得血小板的光学信息对血小板计数。
根据权利要求1~18中任一项所述的血液检测方法,其中所述光学检测系统,包括:光学子系统、流动室、第一检测器;
所述光学子系统包括:激光器、前光组件及后光组件,所述前光组件包括光隔离器;其中,
所述激光器,配置为发射激光光束;
所述前光组件,配置为对所述激光光束进行前光处理,经所述前光处理的激光光束在第一方向上汇聚于所述流动室的血细胞被测样本处并产生散射光;
所述后光组件,沿所述激光光束的传播方向设置于所述流动室之后,配置为对所述散射光进行后光处理,使得经所述后光处理的所述散射光进入所述第一检测器进行光强检测;
所述光隔离器,配置为将反射光与所述激光器隔离;所述反射光为所述激光光束经所述流动室所产生。
根据权利要求19所述的血液检测方法,其中所述光隔离器由采用粘合方式相互连接的分光棱镜及偏振态转换组件构成;
所述分光棱镜,配置为反射入射的所述激光光束的S偏振分量,透射入射的所述激光光束的P偏振分量;
所述偏振态转换组件,配置为改变经所述分光棱镜透射的所述P偏振分量的偏振态,使所述P偏振分量从线偏振光变成圆偏振光,并改变所述圆偏振光反射后的偏振态为S偏振光而被所述分光棱镜反射。
如权利要求19所述的血液检测方法,其中所述光隔离器由采用粘合方式相互连接的检偏器及偏振态转换组件组成;
所述检偏器,配置为仅允许所述激光光束的P偏振分量通过;
所述偏振态转换组件,配置为改变经所述检偏器的所述P偏振分量的偏振态,使所述P偏振分量从线偏振光变成圆偏振光,并改变所述圆偏振光的反射光偏振态为S偏振光而被所述检偏器隔离。
如权利要求19所述的血液检测方法,所述光隔离器由采用粘合方式相互连接的带通滤光片及倍频晶体组成;
所述带通滤光片,配置为使波长为λ的所述激光光束通过;
所述倍频晶体,配置为对经所述带通滤光片的激光光束进行倍频,并对所述倍频后的激光光束的反射光再次进行倍频,而被所述带通滤光片滤除。
如权利要求19所述的血液检测方法,其中所述前光组件还包括准直透镜;
所述准直透镜,沿所述激光光束的传播方向设置于所述激光器与所述光隔离器之间,配置为对所述激光光束进行准直处理,使所述激光光束成为平行光束。
如权利要求19所述的血液检测方法,其中所述后光组件还包括挡直光阑;
所述前光组件,还配置为对所述激光光束进行前光处理,使得经所述前光处理的激光光束在第二方向上汇聚于所述挡直光阑处。
如权利要求19所述的血液检测方法,其中所述前光组件还包括第一光汇聚组件及第二光汇聚组件;
所述第一光汇聚组件,配置为对所述激光光束进行第一聚焦,使所述激光光束在第一方向上汇聚于所述流动室的血细胞被测样本处并产生散射光;
所述第二光汇聚组件,配置为对所述激光光束进行第二聚焦,使所述激光光束在第二方向上汇聚于所述后光组件包括的挡直光阑处。
如权利要求19所述的血液检测方法,其中所述后光组件还包括第三汇聚组件及小孔光阑;
所述第三汇...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈庚文,张子千,叶燚,李朝阳,
申请(专利权)人:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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