间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用，涉及生物技术领域，经过发明专利技术人研究发现，相对于体细胞来源的MSCs，人胚胎干细胞来源的MSCs的质量更稳定，且不受供体身体素质、疾病和治疗过程的影响，能够通过增强组织重构、血管新生、脂肪细胞存活和降低组织纤维化来促进脂肪移植。

【技术实现步骤摘要】
间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用
本专利技术涉及生物
，且特别涉及间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用。
技术介绍
自体脂肪填充术被用来矫正和修复软组织畸形已有超过100年的历史。它主要用于癌症手术后的面部及身体其它部位重构，修复伤疤和皱纹以及隆胸(Zhuetal.2010)。自体脂肪通常从皮下脂肪组织抽提，由于其天然形态，高度生物相容性，低价，无免疫原性及外源病原体污染的优点，已成为最常被使用的填充材料。尽管如此，由于移植物存活率很不稳定(25-90％)，另外，因为缺少血管生成引起部分坏死，自体脂肪移植依然存在许多障碍(Butala,Hazenetal.2012,TrojahnKolle,Oliverietal.2012)。脂肪移植物的存活有赖于血管快速形成以提供氧气和营养(Domenisetal.2015)，而血供不足可导致大量的脂肪细胞死亡，处于移植物中心的细胞尤甚、容易纤维化，从而导致移植物变小。鉴于此，提出本申请。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用以及制剂。本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。第一方面，本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。第二方面，本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于激活脂肪移植早期的CCL2信号通路的制剂中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。第三方面，本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于在脂肪移植早期的募集巨噬细胞的制剂中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。第四方面，本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于促进脂肪细胞的重聚的药物中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。第五方面，本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于促进血管再生的药物中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。第六方面，本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于提高脂肪细胞的存活率的药物中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。第七方面，本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于抑制组织纤维化的药物中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。有益效果是：本专利技术实施例提供了间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞(简称为EMSCs)。经过研究发现，相对于体细胞来源的MSCs，EMSCs的质量更稳定，且不受供体身体素质、疾病和治疗过程的影响，能够通过增强组织重构、血管新生、脂肪细胞存活和降低组织纤维化来促进脂肪移植。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实施例和试验例1提供的EMSCs促进人脂肪抽提后的重聚和移植的结果图；图2为本专利技术试验例1中所提供的EMSCs促进脂肪重聚和存留的结果图；图3为本专利技术试验例2中EMSCs在脂肪移植物中的存留与分化实验结果图；图4为本专利技术试验例2中宿主小鼠组织参与对人类脂肪的移植的结果图；图5为本专利技术试验例3中脂肪移植物的转录组学分析图；图6为本专利技术试验例3中EMSC组中小鼠免疫应答以及炎症相关的基因的表达图；图7为本专利技术试验例4中EMSCs的促移植作用依赖于CCL2的实验结果图；图8为本专利技术试验例4中CCL2在EMSC促进脂肪移植中的作用的实验结果图；图9为本专利技术试验例5中EMSCs或者PBS组的脂肪移植依赖于巨噬细胞的实验结果图；图10为本专利技术试验例5中RNA测序分析结果图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用和制剂进行具体说明。名词定义本文中的“MSCs”是指间充质干细胞，是一种多能干细胞，存在于身体绝大多数组织间质中的一组具有多能性的细胞，它们参与组织稳态、修改以及再生过程。一旦从组织中分离并在体外扩增，MSCs能够自我更新、增殖并分化成多种其他类型的细胞，例如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、血管平滑肌、内皮细胞、神经细胞和肝细胞。MSCs与其他类型的干细胞不同，具有显著的免疫调节功能。本文中的“hESCs”是指人胚胎干细胞，指一类取自早期胚胎，处于未分化状态，可以长期自我分化和自我更新，具有在一定条件下分化形成各种组织细胞潜能的细胞。在组分明确的支持条件下，可以基本上维持其基因稳态。本文中的“EMSCs”是指来源于hESCs的MSCs。技术方案已往研究显示，与单独的脂肪抽提物移植相比，使用混合Ad-MSCs(来源于脂肪的间充质干细胞)的脂肪抽提物对颅面短小畸形进行矫正，移植物中脂肪细胞的体积及存活率显著提高。但是，由于依赖于供体的捐献，体细胞来源的MSCs质量不稳定，而且易被病原体污染。另外，来源于病人的Ad-MSCs的质量还可能受到疾病本身以及治疗过程的影响，而且难以从瘦小的病人体内获得大量的脂肪抽提物。基于此，本专利技术实施例提供了一种间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞，即由hESCs细胞系诱导分化而成。已往研究表明体细胞来源的MSCs可通过以下途径促进脂肪移植：(1)旁分泌(主要途径)；(2)直接分化为脂肪及血管细胞(次要途径)(Chenetal.2016；Fuetal.2013)。尽管如此，由什么因子介导其促移植作用依然不清楚。在本申请中，专利技术人使用hESCs来生产MSCs(EMSCs)，发现EMSCs能够促进脂肪移植，并通过活细胞示踪、RNA测序、基因敲除等方法揭示了介导该促进作用的新的机制。在移植后的第1天可知，含EMSCs的脂肪移植物很快的就变成相互粘连、在悬浮到PBS之后依然保持完整的整体，而对照组移植物则更为松散、在悬浮于PBS后迅速分离。EMSCs通过促进细胞外基质(ECM)的重构以及脂肪细胞的重聚而像胶水一样帮助脂肪组织粘合在一起。这是一个新的发现，这个功能有助于EMSCs促进脂肪移植。在一些实施方式中，所述间充质干细胞还通过在移植早期提高血管再生和/或脂肪细胞的存活率，以促进脂肪移植。在移植后的第14、30和90天可知，含EMSCs的移植物比对照组具有更好的移植效果，表现为移植物更大、更重而且在其表面含有更多的毛细血管。组织学分析也显示含EMSCs的移植物中存在较多的脂肪细胞和血管细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。/n

【技术特征摘要】
1.间充质干细胞在制备用于促进脂肪移植的制剂中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。


2.间充质干细胞在制备用于激活脂肪移植早期的CCL2信号通路的制剂中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。


3.间充质干细胞在制备用于在脂肪移植早期的募集巨噬细胞的制剂中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。


4.间充质干细胞在制备用于促进脂肪细胞的重聚的药物中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。


5.间充质干细胞在制备用于促进血管再生的药物中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人胚胎干细胞。


6.间充质干细胞在制备用于提高脂肪细胞的存活率的药物中的应用，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐仁和，薄柔美，郑德锦，李恩琴，
申请(专利权)人：澳门大学，
类型：发明
国别省市：澳门;82