一种用于流感和COVID-19联合检测的试纸条及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于流感和COVID‑19联合检测的试纸条及其应用，采用胶体金免疫层析法，通过一次性检测，区分了流感病毒感染和COVID‑19病毒感染，节约了成本，提高了工作效率，特别是三者抗原检测，采用生物素与亲和素的放大系统，提高了检测灵敏度，为临床鉴别诊断提供了重要依据。

【技术实现步骤摘要】
一种用于流感和COVID-19联合检测的试纸条及其应用
本专利技术属于生物检测
，涉及一种用于流感和COVID-19联合检测的试纸条及其应用。
技术介绍
新型冠状病毒(COVID-19)正在严重危及中国乃至全球人类的生命以及财产安全。该疾病一般呈现3-7天的潜伏期，有些患者出现更长的潜伏期，患者在潜伏期无明显症状，但是具有传染性，病情一旦发展，致死率高，所以早期筛查和快速诊断意义重大。目前临床必须结合核酸诊断和CT扫描，才能实现确诊，但核酸诊断试剂盒检测阳性率低，而且核酸检测对实验环境要求较高，普通医院实验室以及基层卫生防疫检疫机构无法达到该要求，检测时间长，限制了其广泛应用。同样，流感病毒也是一种急性传染病，其主要病源体是流感病毒A型和B型，在具有潜在病理学患者中会产生并发症，多次引起世界大流行，严重者可导致死亡。由于流感病毒症状与新型冠状病毒症状在临床上均有发热、咳嗽、呼吸困难，引起肺炎等相似症状，在临床上有时无法区别。因此，开发出一次性检测且能区分流感病毒和新型冠状病毒感染尤其重要。根据目前的文献和专利，尚未发现三者联合检测的试剂盒与技术方法。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种用于流感和COVID-19联合检测的试纸条及其应用。为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：1、一种用于流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测的试纸条，包括PVC底板，在PVC底板上依次贴覆样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中，结合垫上喷有胶体金标记的抗人IgM抗体和胶体金标记的抗鸡IgY；硝酸纤维素膜依次包被有3条检测线和1条质控线，所述的3条检测线分别为流感病毒A型抗原、流感病毒B型抗原和COVID-19抗原，所述的1条质控线为抗体鸡IgY。优选的，所述结合垫为玻璃纤维膜。2、一种用于流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测的试剂盒，是由样本稀释液与试纸卡组成的，其中，试纸卡包括卡壳和上述试纸条，卡壳由上盖和下盖组成，在上盖靠近样品垫的一端开设有加样孔。上述试剂盒的制备方法，具体步骤如下：1)样本稀释液制备：所述样本稀释液所采用的缓冲液为磷酸盐缓冲液PH6.0-8.0或生理盐水，包含0.01-1％的表面活性剂吐温20或TritonX-100。2)样品垫的处理①所述样品垫处理液中含有0.1-0.7％的酪蛋白钠盐，0.05-1％Tween20，2-4％蔗糖，0.1-0.5％红细胞腹水(购自厦门波生生物科技有限公司，用于阻断红细胞)，含0.01-0.1％鼠IgG与兔IgG作为阻断剂，采用20mMTris-CLPH8.5-9.0的缓冲液溶解。②将玻璃纤维素膜采用样品垫处理浸泡，37℃干燥12-24小时。3)胶体金结合垫制备：①所述结合垫处理液所采用的缓冲液为碱性缓冲液PH8.0-9.0，如硼酸盐缓冲液和Tris-cl缓冲液等，包含有0.1-2％牛血清白蛋白，2-5％的海藻糖，0.01-1％的表面活性剂Tween20或TritonX-100，0.1-0.5％酪蛋白钠盐。②将玻璃纤维素膜采用结合垫处理液浸泡，37℃干燥12-24小时。③再将胶体金标记结合物按一定比例进行混合(胶体金标记的抗人IgM抗体和胶体金标记的抗鸡IgY按照体积比4：1混合)，喷制在处理好的结合垫上。④将喷有胶体金标记物的结合垫37℃干燥12-24小时。4)NC膜包被液制备：所述样品垫处理液所采用的缓冲液为碱磷酸盐缓冲液PH7.2-7.5，包含有0.01-1％牛血清白蛋白，1-5％的海藻糖或蔗糖。5)NC膜制备：将NC膜贴上PVC板上，37℃干燥12-24小时。6)裁切：将制备好的样品垫、胶体金结合垫、吸水纸进行裁切，按次序贴在有NC膜的PVC板上，再裁切成宽为3±1mm的试纸条。7)装卡：将裁切好的试纸条装入卡壳中，组成检测试纸卡。8)组装：将组装好的试纸卡连同干燥剂用铝箔袋密封装置，室温保存。3、上述试纸条或试剂盒在作为流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测试剂中的应用。4、利用上述试剂盒实现的一种流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测方法，采用间接法，先将待测样本滴入加样孔中，再加入样本稀释液得到样本，样本中流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体与结合垫上的胶体金标记的抗人IgM抗体结合，在层析作用下，再与硝酸纤维素膜上流感病毒A型抗原、流感病毒B型抗原和COVID-19抗原结合，通过颜色的有无判断是否含有流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体。优选的，所述待测样本选自血清、血浆、全血或末梢血中的任一种。5、一种用于流感病毒抗体和COVID-19抗体联合检测的试纸条，包括PVC底板，在PVC底板上依次贴覆样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中，结合垫上喷有胶体金标记的流感病毒融合抗原和COVID-19抗原和胶体金标记的抗鸡IgY；硝酸纤维素膜依次包被有2条检测线和1条质控线，所述的2条检测线分别为流感病毒融合抗原和COVID-19抗原，所述的1条质控线为抗体鸡IgY。优选的，所述结合垫为玻璃纤维膜。6、一种用于流感病毒抗体和COVID-19抗体联合检测的试剂盒，是由样本稀释液与试纸卡组成的，其中，试纸卡包括卡壳和上述试纸条，卡壳由上盖和下盖组成，在上盖靠近样品垫的一端开设有加样孔。7、上述试纸条或试剂盒在作为流感病毒抗体和COVID-19抗体联合检测试剂中的应用。8、利用上述试剂盒实现的一种流感病毒抗体和COVID-19抗体联合检测方法，采用双抗原夹心法，先将待测样本滴入加样孔中，再加入样本稀释液得到样本，样本中流感病毒抗体和COVID-19抗体与结合垫上的胶体金标记的流感病毒融合抗原和COVID-19抗原结合，在层析作用下，再与硝酸纤维素膜上流感病毒抗原和COVID-19抗原结合，形成夹心结构，通过颜色的有无判断是否含有流感病毒抗体和COVID-19抗体。优选的，所述待测样本选自血清、血浆、全血或末梢血中的任一种。9、一种用于流感病毒A型抗原、流感病毒B型抗原和COVID-19抗原联合检测的试纸条，包括PVC底板，在PVC底板上依次贴覆样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中，结合垫上喷有胶体金标记的链霉亲和素和胶体金标记的抗鸡IgY；硝酸纤维素膜依次包被有3条检测线和1条质控线，所述的3条检测线分别为流感病毒A型单克隆抗体、流感病毒B型单克隆抗体和COVID-19单克隆抗体，所述的1条质控线为抗体鸡IgY。优选的，所述结合垫为玻璃纤维膜。10、一种用于流感病毒A型抗原、流感病毒B型抗原和COVID-19抗原联合检测的试剂盒，是由样本稀释液与试纸卡组本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测的试纸条，包括PVC底板，在PVC底板上依次贴覆样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于，结合垫上喷有胶体金标记的抗人IgM抗体和胶体金标记的抗鸡IgY；硝酸纤维素膜依次包被有3条检测线和1条质控线，所述的3条检测线分别为流感病毒A型抗原、流感病毒B型抗原和COVID-19抗原，所述的1条质控线为抗体鸡IgY。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测的试纸条，包括PVC底板，在PVC底板上依次贴覆样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于，结合垫上喷有胶体金标记的抗人IgM抗体和胶体金标记的抗鸡IgY；硝酸纤维素膜依次包被有3条检测线和1条质控线，所述的3条检测线分别为流感病毒A型抗原、流感病毒B型抗原和COVID-19抗原，所述的1条质控线为抗体鸡IgY。


2.一种用于流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测的试剂盒，是由样本稀释液与试纸卡组成的，其中，试纸卡包括卡壳和权利要求1所述试纸条，卡壳由上盖和下盖组成，在上盖靠近样品垫的一端开设有加样孔。


3.权利要求1所述试纸条或权利要求2所述试剂盒在作为流感病毒A型IgM抗体、流感病毒B型IgM抗体和COVID-19IgM抗体联合检测试剂中的应用。


4.一种用于流感病毒抗体和COVID-19抗体联合检测的试纸条，包括PVC底板，在PVC底板上依次贴覆样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于，结合垫上喷有胶体金标记的流感病毒融合抗原和COVID-19抗原和胶体金标记的抗鸡IgY；硝酸纤维素膜依次包被有2条检测线和1条质控线，所述的2条检测线分别为流感病毒融合抗原和COVI...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡道奇，周松辉，周咏武，吴刚强，童鹏，李光，
申请(专利权)人：湖南康润药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43