一种检测蛋白含量的氨基黑染色液、试剂盒及方法技术

本发明专利技术适用于蛋白定量技术领域，提供了一种检测蛋白含量的氨基黑染色液、试剂盒及方法，该试剂盒包括氨基黑染色液、漂洗液、洗脱液以及若干组不同浓度的标准蛋白溶液；其中，氨基黑染色液包括甲醇、冰醋酸、氨基黑和水。本发明专利技术提供的含有氨基黑染色液的试剂盒，充分利用蛋白质中氨基酸的氨基和羧基在适当的酸碱环境中可以反应，使得蛋白质带正电荷，而氨基黑是以负离子形式出现，在正负电荷的相互作用下，使蛋白质的表面有大量的染料分子沉积，从而使蛋白痕迹呈染料颜色显出，进而可以提供一种操作简单，灵敏度高，准确性好的蛋白定量方法。

【技术实现步骤摘要】
一种检测蛋白含量的氨基黑染色液、试剂盒及方法
本专利技术属于蛋白定量
，尤其涉及一种检测蛋白含量的氨基黑染色液、试剂盒及方法。
技术介绍
蛋白定量结果是生物医学研究中的基础数据。其准确与否关系到研究结果的可靠程度。蛋白定量是我们在做许多生物医学实验前需要做的前提工作，尤其在做蛋白免疫印迹WesternBlot时，只有将待测样品中蛋白含量确定，才能明确我们的上样量，方能为进一步的实验打下基础。样品总蛋白定量技术方法由于限制条件较多,操作复杂,适用面较窄，目前，实验中测定蛋白含量的方法有：Lowry法，BCA法，Bradford法，磺基水杨酸沉淀法等。其测定原理为：Lowry法的测定原理为蛋白质与碱性硫酸铜作用形成铜-肽键络合物，后者与色氨酸和酪氨酸共同作用使酚试剂中的磷钼酸和磷钨酸还原生成蓝色化合物；BCA法的测定原理为蛋白质价铜离子还原成亚铜离子，后者在碱性溶液中与BCA结合生成紫红色络合物。Lowry法与BCA法同属于化学法。磺基水杨酸沉淀法属于物理法，Bradford法属于染料结合法，即考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中呈红棕色本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测蛋白含量的氨基黑染色液，其特征在于，每升所述氨基黑染色液包括以下组分：甲醇200~400mL、冰醋酸50~150mL、氨基黑0.05~0.15g，余量为水。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测蛋白含量的氨基黑染色液，其特征在于，每升所述氨基黑染色液包括以下组分：甲醇200~400mL、冰醋酸50~150mL、氨基黑0.05~0.15g，余量为水。


2.根据权利要求1所述的一种检测蛋白含量的氨基黑染色液，其特征在于，每升所述氨基黑染色液包括以下组分：甲醇250~350mL、冰醋酸80~120mL、氨基黑0.08~0.12g，余量为水。


3.一种检测蛋白含量的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1或2所述的氨基黑染色液。


4.根据权利要求3所述的一种检测蛋白含量的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括漂洗液、洗脱液以及若干组不同浓度的标准蛋白溶液。


5.根据权利要求4所述的一种检测蛋白含量的试剂盒，其特征在于，所述标准蛋白溶液为标准牛血清白蛋白溶液。


6.根据权利要求4所述的一种检测蛋白含量的试剂盒，其特征在于，所述漂洗液为甲醇水溶液，其体积浓度为40%~60%。


7.根据权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈洪栋，
申请(专利权)人：陕西健吉跃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61