小叶丁香的组织培养方法及快速获取小叶丁香大苗的方法技术

本申请涉及小叶丁香的组织培养方法及快速获取小叶丁香大苗的方法，组织培养方法包括以下步骤：(1)外植体选择及消毒：剪取当年生幼嫩枝条顶端部分，将其剪切为带有顶芽或1‑2个腋芽的茎段作为外植体，进行消毒处理；(2)启动培养：将外植体放入启动培养基中，使顶芽或腋芽刚好接触培养基，直至顶芽或腋芽萌发；启动培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6‑BA1mg/L、激素NAA0.2mg/L，调节pH为5.8～6.2；(3)继代培养；(4)生根培养；(5)移栽，得到组培苗。该方法使小叶丁香外植体在启动培养过程中存活率高，不易出现愈伤组织，腋芽或顶芽诱导率高。

【技术实现步骤摘要】
小叶丁香的组织培养方法及快速获取小叶丁香大苗的方法
本专利技术涉及小叶丁香无性繁殖领域，具体涉及一种小叶丁香的组织培养方法及快速获取小叶丁香大苗的方法。
技术介绍
小叶丁香(SyringamicrophyllaDiels)，别名又叫四季丁香、二度梅、野丁香等。科属为木犀科丁香属，属于落叶灌木，高约2.5m，幼枝灰褐色，被柔毛。叶卵圆形或椭圆状卵形，全缘，有缘毛。圆锥花序疏松，侧生，淡紫红色。小叶丁香的叶子比普通丁香小，枝干也较低,枝条柔细，树姿秀丽，花色鲜艳，且一年二度开花，解决了夏秋无花的现状,为园林中优良的花灌木。适于种在庭园、居住区、医院、学校、幼儿园或其他园林、风景区。可孤植、丛植或在路边、草坪、角隅、林缘成片栽植，也可与其他乔灌木尤其是常绿树种配植。小叶丁香无性繁殖方法目前主要有：嫁接、扦插、压条、分株等。上述无性繁殖方法对繁殖材料需求量大，不适用于材料有限的优良单株进行大量繁殖，且嫁接繁殖成活率低，扦插繁殖的繁殖系数小、周期长，受气候条件影响大、生产成本高、不利于工厂化育苗生产。也有文献公开通过组织培养的方式繁殖小叶丁香，但现有的方法中，存在外植体启动培养较为困难，容易出现外植体褐化、坏死、生长停止，腋芽诱导率低且植株容易死亡、以愈伤组织分化为主，不出现丛生芽，或丛生芽诱导率低甚至死亡、增殖过程中继代苗生长势减弱等问题，且组培苗生长缓慢，形成商品大苗一般需要5年以上，不利于产品的供应。
技术实现思路
因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中的通过组织培养繁殖小叶丁香时腋芽诱导率低的缺陷，从而提供一种小叶丁香的组织培养方法。本专利技术还提供一种快速获取小叶丁香大苗的方法。为此，本专利技术提供一种小叶丁香的组织培养方法，包括以下步骤：(1)外植体选择及消毒：剪取当年生幼嫩枝条顶端部分，将其剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段作为外植体，进行消毒处理；(2)启动培养：将外植体放入启动培养基中，使顶芽或腋芽刚好接触培养基，直至顶芽或腋芽萌发；所述启动培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA1mg/L、激素NAA0.2mg/L，调节pH为5.8～6.2；(3)继代培养：剪取步骤(2)中萌发的腋芽或顶芽并接种于继代培养基中进行培养，直至长出丛生芽；(4)生根培养：将新长出的丛生芽剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段，转移至生根培养基中进行培养直至生根得到生根苗；(5)移栽：将步骤(4)得到的生根苗用温水洗净根部的生根培养基，然后移栽至基质中进行培养，得到组培生根苗。进一步地，所述启动培养过程中萌发的顶芽或腋芽长度为5mm～1cm；所述继代培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA4mg/L，调节pH为5.8～6.2，继代培养过程中丛生芽长至3～6cm；所述生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素IBA1.5mg/L，调节pH为5.8～6.2，生根苗的根长为3～4cm，植株高5～6cm。进一步地，步骤(1)中消毒为用次氯酸钠溶液浸泡然后用无菌水冲洗。进一步地，所述次氯酸钠溶液中有效氯为1％，浸泡时间为20min，无菌水冲洗次数为3-5次。进一步地，继代培养步骤中还包括一次或多次重复继代步骤：将丛生芽剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段，重新转移至新的继代培养基中继续培养，直至重新长出丛生芽且丛生芽高至3～6cm。进一步地，继代培养步骤后还包括继代苗复壮的步骤：将重新长出的丛生芽转移至复壮培养基中直至丛生芽的增殖倍数不低于5，复壮培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA2.4mg/L，调节pH为5.8～6.2。进一步地，启动培养、继代培养、生根培养和继代苗复壮过程中的培养条件为：温度：25±5℃；光照强度：2000～2200lx；光处理：12～14h/d，暗处理10～12h/d，培养20～30d。进一步地，步骤(5)中移栽的基质为质量比为3:2:1的粗草炭土、粗蛭石和粗珍珠岩的混合物，移栽后浇水，使土壤湿度保持在65～80％直至长出新根，待新长出的根部生长健壮后，使土壤湿度保持在为70～80％。具体地，步骤(5)中将生根苗移栽到基质中后，先浇水，利用育苗盖使土壤湿度保持在65～75％，直至生根苗长出新根，然后使土壤湿度保持在70～80％，待根部生长健壮后撤掉育苗盖，使其土壤湿度为70～75％，待生根苗完全适应外界环境之后，每2d浇次水，使其土壤湿度保持在70～80％。本专利技术还提供一种快速获取小叶丁香大苗的方法，包括以下步骤：(1)通过组织培养得到组培生根苗；(2)剪取组培苗中带芽茎段作为嫁接穗条，以暴马丁香作为砧木进行嫁接。进一步地，步骤(2)中，穗条的长度为8-10cm，粗0.2～0.5cm，带有2-3个芽，暴马丁香砧木为至少提前1年种植所得；嫁接前5-7天对砧木栽植地浇透水，利用劈接的方式进行嫁接，劈接口深度为1.5-2cm，嫁接后立即密封嫁接口，嫁接后10-15d再次进行浇水，随时抹除砧木萌芽。本专利技术技术方案，具有如下优点：1.本专利技术提供的小叶丁香的组织培养方法，选择合适的外植体部位，和启动培养基，使小叶丁香外植体在启动培养过程中不易出现愈伤组织，腋芽或顶芽诱导率高，存活率高；选择带有顶芽或1-2个腋芽的茎段作为外植体，使外植体有合适的长度，保证外植体既在启动培养中能够有效繁殖，又能够减少病菌的感染几率。2.本专利技术提供的小叶丁香的组织培养方法，继代培养和生根培养过程中通过选择合理的激素种类及其适宜的浓度，使得小叶丁香在组织培养过程中不易出现愈伤组织，丛生芽诱导率高，存活率高；通过丛生芽进行继代增殖，使小叶丁香成苗速度快、繁殖量大、可以使无性系后代保持原品种特性。3.本专利技术提供的小叶丁香的组织培养方法，消毒方法为用次氯酸钠溶液浸泡、无菌水冲洗，使得外植体在启动培养过程中不易出现褐化、坏死、停止生长等问题，存活率可达80％以上。4.本专利技术提供的小叶丁香的组织培养方法，还包括继代苗复壮的步骤，小叶丁香组织培养过程中，继代次数过多会出现继代苗生长势减弱、增殖倍数降低的现象，通过适当调整培养基中激素浓度，使得小叶丁香的苗高、粗度、增殖倍数存在显著增长。5.本专利技术提供的小叶丁香的组织培养方法，通过选择合适的培养条件，使得培养得到的生根苗木质化程度高，适应性强，在移栽过程中不需要提前适应外界环境，可以直接移栽，移栽成活率高、缩短培养时间。6.本专利技术提供的小叶丁香的组织培养方法，繁殖系数高，不受气候影响、有利于工厂化育苗、可以节约能源，减少占用可耕地面积、可以避免地域、气候及自然灾害的影响,从而达到提高产量、降低成本的目的。其次，组织培养能够将少量材料进行大量繁殖，解决材料稀缺植物品系无性繁殖；本方法培育小叶丁香能本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)外植体选择及消毒：/n剪取当年生幼嫩枝条顶端部分，将其剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段作为外植体，进行消毒处理；/n(2)启动培养：/n将外植体放入启动培养基中，使顶芽或腋芽刚好接触培养基，直至顶芽或腋芽萌发；所述启动培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA 1mg/L、激素NAA 0.2mg/L，调节pH为5.8～6.2；/n(3)继代培养：/n剪取步骤(2)中萌发的腋芽或顶芽并接种于继代培养基中进行培养，直至长出丛生芽；/n(4)生根培养：/n将新长出的丛生芽剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段，转移至生根培养基中进行培养直至生根得到生根苗；/n(5)移栽：/n将步骤(4)得到的生根苗用温水洗净根部的生根培养基，然后移栽至基质中进行培养，得到组培生根苗。/n

【技术特征摘要】
1.一种小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)外植体选择及消毒：
剪取当年生幼嫩枝条顶端部分，将其剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段作为外植体，进行消毒处理；
(2)启动培养：
将外植体放入启动培养基中，使顶芽或腋芽刚好接触培养基，直至顶芽或腋芽萌发；所述启动培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA1mg/L、激素NAA0.2mg/L，调节pH为5.8～6.2；
(3)继代培养：
剪取步骤(2)中萌发的腋芽或顶芽并接种于继代培养基中进行培养，直至长出丛生芽；
(4)生根培养：
将新长出的丛生芽剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段，转移至生根培养基中进行培养直至生根得到生根苗；
(5)移栽：
将步骤(4)得到的生根苗用温水洗净根部的生根培养基，然后移栽至基质中进行培养，得到组培生根苗。


2.根据权利要求1所述的小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，所述启动培养过程中萌发的顶芽或腋芽长度为5mm～1cm；所述继代培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA4mg/L，调节pH为5.8～6.2，继代培养过程中丛生芽长至3～6cm；所述生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素IBA1.5mg/L，调节pH为5.8～6.2，生根苗的根长为3～4cm，植株高5～6cm。


3.根据权利要求1所述的小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，步骤(1)中消毒为用次氯酸钠溶液浸泡然后用无菌水冲洗。


4.根据权利要求3所述的小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，所述次氯酸钠溶液中有效氯为1％，浸泡时间为20min，无菌水冲洗次数为3-5次。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的小叶...

【专利技术属性】
技术研发人员：李瑞静，田菊，
申请(专利权)人：内蒙古和盛生态科技研究院有限公司，蒙树生态建设集团有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15