Dkk-3蛋白功能性片段及其应用制造技术

本公开提供了一种Dkk‑3蛋白功能性片段及其应用。具体来说，本公开揭示了一种由氨基酸编码的Dkk‑3蛋白的不同片段在肌肉萎缩中的功能。其中，Dkk‑3蛋白的N端片段具有诱导肌肉萎缩的完整功能，Dkk‑3蛋白的L‑CDR2‑C片段具有拮抗N端片段诱导肌肉萎缩的功能。本公开还提供了以Dkk‑3蛋白的特定位点为靶点治疗肌肉萎缩的药物，Dkk‑3蛋白的L‑CDR2‑C片段本身或其融合蛋白可以作为拮抗Dkk‑3诱导肌肉萎缩功能的靶向药物。

【技术实现步骤摘要】
Dkk-3蛋白功能性片段及其应用
本公开涉及生物
，具体涉及肌肉萎缩相关的蛋白质分子标记Dkk-3蛋白的功能性片段、前述功能性片段的筛选及其应用。
技术介绍
Dkk蛋白家族(Dickkopffamilyprotein)属于分泌型的糖蛋白，包括五个家族成员，分别是Dkk-1、Dkk-2、Dkk-3、Dkk-4和DkkL1(Niehrs，2006)。Dkk蛋白家族成员的蛋白结构包括N端的信号肽(Signalpeptide)，两个半胱氨酸富集区(Cysteine-richdomain，CRD)(DkkL1除外)以及连接两个半胱氨酸富集区的连接肽段(Linker)(见图2)。每一个CRD区域都存在十个保守的半胱氨酸位点。靠近N端的CRD1为Dkk蛋白家族所特有(Krupniketal.，1999)。另一个靠近C端(碳端)的半胱氨酸富集区CRD2在蛋白质序列上与共脂肪酶折叠区(Colipasefold)的功能域相似(AravindandKoonin，1998)。与功能研究相似，在Dkk蛋白家族中，结构研究较多家族成员是Dkk-1和D本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白，所述蛋白由氨基酸序列编码，其中，所述氨基酸序列选自以下序列：/n(a)所述氨基酸序列与SEQ ID NO：3所示的序列相比，具有80％以上且90％以下的同源性；优选的，具有82％以上且86％以下的同源性；更优选的，具有84％以上且85％以下的同源性。/n

【技术特征摘要】
1.一种蛋白，所述蛋白由氨基酸序列编码，其中，所述氨基酸序列选自以下序列：
(a)所述氨基酸序列与SEQIDNO：3所示的序列相比，具有80％以上且90％以下的同源性；优选的，具有82％以上且86％以下的同源性；更优选的，具有84％以上且85％以下的同源性。


2.如权利要求1所述的蛋白，其特征在于，所述核苷酸的序列为如SEQIDNO：4所示的序列。


3.一种蛋白，所述蛋白由氨基酸序列编码，其中，所述氨基酸序列选自以下序列：
(b)所述氨基酸序列与SEQIDNO：5所示的序列相比，具有75％以上且84％以下的同源性；优选的，具有77％以上且82％以下的同源性；更优选的，具有79％以上且80％以下的同源性；
可选的，所述氨基酸序列中氨基酸的数量比SEQIDNO：5所示的氨基酸数量多1个。


4.如权利要求3所述的蛋白，其特征在于，所述氨基酸序列为如SEQIDNO：6所示的序列。


5.一种核酸，所述核酸编码如权利要求1-4任一项所述的蛋白。


6.一种遗传修饰的载体，其特征在于，所述载体包含核苷酸序列，其中，所述核苷酸序列编码如权利要求1-4任一项所述的蛋白；可选的，所述核苷酸序列包含如SEQIDNO：8所示的序列或如SEQIDNO：10所示的序列。


7.一种表达蛋白的细胞，其含有如权利要求6所述的载体。


8.一种抗体或其片段，所述抗体或其片段竞争性地结合权利要求1-2任一项所述的蛋白；优选的，所述抗体为单克隆抗体。


9.一种制备蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：
(s1)将权利要求6所述的载体转染表达蛋白的细胞；
(s2)收集步骤(s1)中的所述细胞表达的所述蛋白。


10.一种制备单克隆抗体的方法，所述方法包括以下步骤(s1)-(s3)或以下步骤(s1)-(s2)、(s4)：
(s1)将权利要求6所述的载体转染表达蛋白的细胞；
(s2)收集步骤(s1)中的所述细胞表达的蛋白；
(s3)用步骤(s2)获得的蛋白免疫动物，从被免疫动物的淋巴细胞中分离特异性识别所述蛋白的所述单克隆抗体；或者
(s4)用步骤(s2)获得的蛋白筛选单克隆抗体噬菌体展示文库，得到特...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴思，胡苹，
申请(专利权)人：苏州神肌赢生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32