一种柔毛淫羊藿未成熟胚组培快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种柔毛淫羊藿未成熟胚组培快繁方法，包括：新鲜种荚低温冷藏培养、种荚消毒、诱导未成熟胚生成愈伤组织、诱导愈伤组织分化出不定芽或丛生芽、诱导芽体形成须根、炼苗、育苗。本发明专利技术已形成一套完整的技术体系，具有操作简单，繁殖周期短，繁殖率高，成本低，幼苗田间存活率高等优点。本发明专利技术愈伤组织分化出芽的分化率高达86.7％，丛生芽的增殖系数可达5.2，为柔毛淫羊藿工厂化生产，提供技术支撑，对柔毛淫羊藿野生资源的保护有一定的促进作用。

【技术实现步骤摘要】
一种柔毛淫羊藿未成熟胚组培快繁方法
本专利技术涉及植物组织培养
，更具体涉及一种柔毛淫羊藿未成熟胚组培快繁方法。
技术介绍
柔毛淫羊藿(Epimediumpubescens)为小檗科(Berberidaceae)淫羊藿(EpimediumL.)多年生草本植物。作为滋补类中药，中药材淫羊藿始载于《神农本草经》，是我国应用最广泛、最悠久的中草药之一，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等传统功效。现代药理学表明，淫羊藿还具有改善心血管系统、抗衰老、抗骨质疏松、抑制肿瘤等功效，因而也是最具开发潜力的中药材之一。柔毛淫羊藿为淫羊藿药材4个基原植物之一，分布于四川、陕西、甘肃，属于较为优异的药材。但是，目前淫羊藿原药材大部分来自野生资源，随着对淫羊藿药材需求量逐年增加和野生淫羊藿药材的大量采挖，包括柔毛淫羊藿在内的淫羊藿野生资源逐渐趋于枯竭。淫羊藿规模化种植是促进我国淫羊藿资源可持续利用最为有效的方法，而植物组织培养技术是目前最常用的一种高效的无性繁殖技术，可以为淫羊藿规模化种植快速提供质优稳定的种苗。植物组织培养技术利用植物细胞的全能性，以植物的器本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种柔毛淫羊藿未成熟胚组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)新鲜种荚低温冷藏培养：从柔毛淫羊藿植株上摘取新鲜饱满未成熟裂开的绿色果序，将果序放入4℃恒温冰箱中冷藏培养3周；/n(2)种荚消毒：将冷藏后的果序用84消毒液以1：200浓度清洗，置于震荡箱中，120rpm震荡0.5h，去除其表面附着的灰尘，清水冲洗除去消毒液；移入超净工作台，然后用75％的酒精溶液震荡消毒30s，无菌水冲洗2遍，将种子置于0.1％质量浓度的HgCl

【技术特征摘要】
1.一种柔毛淫羊藿未成熟胚组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)新鲜种荚低温冷藏培养：从柔毛淫羊藿植株上摘取新鲜饱满未成熟裂开的绿色果序，将果序放入4℃恒温冰箱中冷藏培养3周；
(2)种荚消毒：将冷藏后的果序用84消毒液以1：200浓度清洗，置于震荡箱中，120rpm震荡0.5h，去除其表面附着的灰尘，清水冲洗除去消毒液；移入超净工作台，然后用75％的酒精溶液震荡消毒30s，无菌水冲洗2遍，将种子置于0.1％质量浓度的HgCl2溶液中，120rpm震荡消毒10min，取出用无菌水漂洗3-4次除去残留的HgCl2溶液；最后置于灭过菌的滤纸除去残留的水分备用；
(3)诱导未成熟胚生成愈伤组织：在超净工作台上将消毒后的种荚用已灭菌的镊子与解剖针轻轻撕开，取出种子，撕去种子白色种膜，配合使用解剖刀取出种子未成熟胚，将取出的未成熟胚沿长轴方向用解剖刀轻轻划伤1-2道，形成创口，将创口向下轻贴于愈伤组织诱导培养基a上；在光强1000-1500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-25℃条件下；每三周更换一次培养基，所换培养基配方与原培养基一致，诱导生成愈伤组织；待初步生成愈伤组织后，转接愈伤组织诱导培养基b上，同等光照和温度条件，促进愈伤组织加速形成；
(4)诱导愈伤组织分化出不定芽或丛生芽：诱导产生的愈伤组织转接到芽分化培养基上，在光强1500-2500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-25℃条件下，诱导不定芽的形成；
芽的增殖培养：将1-3个芽体接种到芽增殖培养基，进行继代培养，在光强1500-2500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-25℃条件下，诱导形成丛芽；
(5)诱导芽体形成须根：无菌条件下切取单个芽体，接种于生根培养基，在光强1500-2500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-25℃条件下，形成白色须根；
(6)炼苗、育苗：挑选长势良好，根系相对发达的组培苗，在炼苗准备室取下组培瓶的盖子，在光强150...

【专利技术属性】
技术研发人员：张燕君，于淑霞，黄天悦，于东悦，王兰香，杨路路，
申请(专利权)人：中国科学院武汉植物园，
类型：发明
国别省市：湖北;42