一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法技术

本发明专利技术涉及植物组织培养技术领域，具体公开了一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法，包括以箭叶淫羊藿种胚为外植体，通过对完全干燥的种子消毒、种子低温培养、诱导外植体生成愈伤组织、诱导愈伤组织分化出不定芽或丛生芽、诱导芽体形成须根、炼苗、育苗等过程获得箭叶淫羊藿再生苗，建立了箭叶淫羊藿植物组织培养快速繁殖体系。具有操作简单，污染率低，繁殖周期短，繁殖率高，成本低，幼苗田间存活率高等优点，为箭叶淫羊藿工厂化生产，提供技术支撑，对箭叶淫羊藿野生资源的保护有一定的促进作用。

【技术实现步骤摘要】
一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法
本专利技术涉及植物组织培养
，更具体涉及一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法。
技术介绍
中药材淫羊藿为小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属(Epimedium)植物的干燥叶片，在我国作为药材使用已有2000余年历史。目前淫羊藿药材的获取主要依靠于野外采摘，灭绝式采挖使淫羊藿药材野生资源急剧减少，供需矛盾日益加剧。箭叶淫羊藿(Epimediumsagittatum(Sieb.etZucc.)Maxim.)是《中国药典》淫羊藿药材的基原植物之一，使用量较大，目前该种的人工种植已经在多个省份开展起来。种苗繁育技术作为人工种植的关键环节，箭叶淫羊藿的种苗繁育主要是地下根茎分兜繁殖和种胚繁殖，但是根茎繁殖繁殖系数低、种胚繁殖周期长，严重制约了箭叶淫羊藿规模化种植产业的发展。植物组织培养技术利用植物细胞全能性，将植物的器官、组织、原生质体等作为组织培养的外植体，在适宜的环境下，经过诱导进而分化成完整植株。由于高效快速，植物组织培养技术已经广泛应用于园林园艺及药用植株的种苗生产。目前，箭叶淫羊藿关于组培技术报本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)干燥后种子的消毒：选取干燥健康饱满的种子，撕去种子上的种膜，用洗洁精1:500比例溶液清洗，置于震荡箱中120rpm，震荡1h，去除其表面附着的灰尘，清水冲洗3-4次除去残留的洗洁精；移入超净工作台，然后用75％的酒精溶液震荡消毒30s，无菌水冲洗2遍，将种子置于0.1％质量浓度的HgCl

【技术特征摘要】
1.一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)干燥后种子的消毒：选取干燥健康饱满的种子，撕去种子上的种膜，用洗洁精1:500比例溶液清洗，置于震荡箱中120rpm，震荡1h，去除其表面附着的灰尘，清水冲洗3-4次除去残留的洗洁精；移入超净工作台，然后用75％的酒精溶液震荡消毒30s，无菌水冲洗2遍，将种子置于0.1％质量浓度的HgCl2溶液中，120rpm震荡消毒10min，取出用无菌水漂洗3-4次除去残留的HgCl2溶液；然后置于灭过菌的滤纸除去残留的水分备用；
(2)种子低温培养：将消毒后的种子接种到播种培养皿上，封口膜密封后，放置于4℃冰箱无菌冷藏培养60天；
(3)诱导外植体生成愈伤组织：挑取冰箱中刚萌芽的种子置于超净工作台中，用无菌镊子与解剖针剥除种皮，取出种胚，并用灭过菌的解剖刀沿种胚纵向轻轻划伤1道，轻贴于愈伤组织诱导培养基a上；在光强1000-2000lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-26℃条件下；每三周更换一次培养基，所换培养基配方与原培养基一致，诱导生成愈伤组织；待初步生成愈伤组织后，转接愈伤组织诱导培养基b上，同等光照和温度条件，促进愈伤组织加速形成；
(4)诱导愈伤组织分化出不定芽或丛生芽：诱导产生的愈伤组织转接到芽分化培养基上，在光强1500-2500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-26℃条件下，诱导不定芽的形成；
芽的增殖培养：切取单个芽体接种到芽增殖培养基，进行继代培养，在光强1500-2500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-26℃条件下，诱导形成丛生芽；
(5)诱导芽体形成须根：无菌条件下切取单个芽体，接种于生根培养基，在光强1500-2500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-26℃条件下，形成白色须根；
(6)炼苗、育苗：挑选长势良好，根系相对发达的组培苗，在炼苗准备室，揭去组培瓶的盖子，在光强1500-2500lux，14h/天光照进行培养，培养温度24-26℃，空气湿度60％-80％条件下，炼苗5-7天；洗净培养基，栽种到田园土：蛭石：泥炭土：腐殖土＝2:1:2:1...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁琼，张燕君，于淑霞，黄天悦，于东悦，王兰香，
申请(专利权)人：中国科学院武汉植物园，
类型：发明
国别省市：湖北;42