一种靶向血管内皮细胞防治心脑血管疾病的罗布麻茶复配功能饮料制造技术

本发明专利技术公开了一种通过靶向血管内皮细胞来防治心脑血管疾病的罗布麻茶(以总黄酮终浓度3‑100mg/L计算原液量)复配功能饮料，额外添加成分为：5‑羟基色氨酸(4‑200mg/L)、二氢硫辛酸(4‑100mg/L)、泛酸(1‑10mg/L)和烟酸(2‑20mg/L)。配方存在良好协同作用，在罗布麻茶抑制NADPH氧化酶的情况下，补充烟酸不易产生活性氧簇(ROS)损伤，也防止了一氧化氮与ROS形成活性氮诱导硝化应激损伤血管内皮细胞，本发明专利技术的添加成分通过诱导内皮细胞高一氧化氮低ROS状态增强罗布麻茶生理效果并降低副作用。另外本配方开发上利用高通量的标准化细胞实验和随机双盲对照多中心志愿者实验，精确探明了配方成分的作用范围和毒性阈值，在使用剂量上有一定宽容度和极强安全性，适合作为产品开发的核心配方。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向血管内皮细胞防治心脑血管疾病的罗布麻茶复配功能饮料
本专利技术属于生物
，涉及一种靶向血管内皮细胞防治心脑血管疾病的罗布麻茶复配功能饮料。
技术介绍
心脑血管疾病是威胁现代人群健康的首要原因，具有高致残率和复发率以及高死亡率的特点，世卫组织发布的信息显示，在过去十年世界十大死亡原因中，冠心病占12.9%、中风占11.4%，共计占死亡原因的24.3%；我国卫健委公布的数据也显示，心脑血管疾病导致的死亡在我国人群中高居首位，而且随着人民饮食结构的高脂肪化，人群脑血管病的危险因素仍呈显著上升趋势。血管内皮细胞(vascularendothelialcell)是心脑血管疾病的核心靶点，从基础到临床均受到广泛研究和关注。相关病理学研究显示，微血管损伤通常表现为损伤部位内皮细胞坏死，进而导致微血管屏障功能障碍、毛细血管通透性增高、炎症反应、微循环血管痉挛和微血管灌注缺损等现象。内皮细胞作为血管损伤时代谢物质和血流动力学信号调节微循环的重要靶点，而受应激刺激的受损内皮细胞能释放多种血管活性物质，扩张血管，导致微循环障碍；同时释放凝血酶组织因子及炎症介质，作用于炎症细胞，产生炎性反应，并激活纤维蛋白原与血小板，形成血栓，产生严重后果。血管内皮细胞损伤的具体分子机制，主要有一氧化氮(nitricoxide，NO)损伤与活性氧簇(reactiveoxygenspecies,ROS)损伤两条通路。血管内皮的NO含量不足导致机体受大量缩血管刺激时无法发挥舒血管效应，引起内皮细胞功能障碍和血管受损；但NO过多也会产生严重ROS损伤。eNOS作为NO的上游调控因子，是血管壁中影响内皮细胞功能的重要靶点。辅助因子四氢生物蝶呤(tetrahydrobiopterin，BH4)是eNOS活性和功能的关键决定因子；BH4失活导致eNOS解离并不再催化L-精氨酸氧化和NO合成，使生成的NO减少，引起内皮细胞功能严重障碍；反之BH4水平上调则可有效促进eNOS偶联，改善及血管内皮细胞的生长增殖，增强血管损伤后血管内皮细胞和循环内皮祖细胞的修复能力。另外，在NO的细胞信号转导过程中，NO通常由S-硝基化蛋白介导氧化修饰形成S-亚硝基硫醇(S-nitrosothiol，SNO)发挥化学信使作用，而辅酶A(CoA)通过与一氧化氮结合形成SNO-CoA作为SNO的内源性来源，使体内的NO系统处于健康的动态平衡状态之中。血管内皮细胞的ROS来源于NADPH氧化酶、线粒体呼吸链泄露和细胞色素氧化酶，这是互相补偿的三条ROS信号通路，有着不同的细胞生理功能。正常情况下，机体内促氧化剂水平与抗氧化剂水平处在一种动态平衡之中，但ROS的产生和存在有细胞区域性，有极性相和非极性相的重要区别，而ROS的消除也有着代谢自由能驱动和反应本身自由能驱动两种模式，因此常导致ROS局域失控等病理现象。ROS的生物功能取决于胞内浓度，适度浓度的ROS有信号传导作用，但是高浓度的ROS作用于血管内皮细胞的基底膜，损伤机体抗氧化系统，降低超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽硫转移酶等抗氧化酶活性，过氧化其中的脂质使血管内皮细胞通透性增加，导致蛋白质通过屏障并异常沉积在基底膜中损伤血管内皮细胞的结构和功能。ROS还可氧化关键的细胞信号如酪氨酸磷酸酶提高NF-κB活性，减少内皮硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的合成，破坏内皮细胞的糖蛋白，使基底膜增厚，引起内皮细胞功能障碍。同时，ROS与NO快速结合形成过氧亚硝酸盐等活性氮，后者比Nox产生超氧化物速度快3～4倍，可诱导产生硝化应激增加ROS的促炎症负荷，严重损伤血管内皮细胞。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶，Nox)通过NADPH依赖的单电子还原将体内氧分子还原成超氧负离子，是体内唯一直接产生ROS的酶，也是ROS损伤血管内皮细胞的重要起因，因此是对抗ROS损伤血管内皮细胞的核心靶点，因此需要寻找特异性和选择性Nox的抑制剂，但目前Nox抑制剂相关研究尚缺乏可靠的筛选体系，目前尚无安全有效的Nox酶抑制剂类药物上市。目前公布的缓解血管内皮细胞损伤的预防保健方案，普遍存在技术不完备等问题，例如申请号为201910015995.1等专利利用RNA缓解血管内皮损伤，这导致给药方式方面存在困难；申请号为201811150537.0和201880008458.8等专利仅提出血管内皮细胞损伤的可能药物作用靶点，但尚无成熟有效的药物能够针对该靶点；申请号为201911011122.X等专利给出白藜芦醇等几种广受质疑的中药提取物，声称能防治血管内皮损伤，但作用机制和副作用不详。总之，目前尚无安全有效的针对血管内皮细胞这一核心靶点来预防和治疗心血管疾病的成熟方案。
技术实现思路
罗布麻(学名：ApocynumvenetumL.)是夹竹桃科罗布麻属的直立半灌木，广泛分布于我国北方地区，抗逆性极强，特别容易生长于沙漠边缘和盐碱干旱地等自然环境恶劣的区域。例如在新疆的一些田里，盐含量高达14.5%，青海柴达木盆地有些田地中土壤表层30厘米内含盐量甚至高达50%，罗布麻可以良好生长；在新疆北部阿勒泰地区，极端低温-47℃，地面积雪期130天，罗布麻也可自然生长，其株高可达70-120厘米；在吐鲁番盆地，夏季最高气温达47.8℃，地面温度达52℃以上，罗布麻仍然能生长良好。罗布麻叶是《中华人民共和国药典》(2010版一部)收录的正品药材；《蒙植药志》记载罗布麻叶或全草治头晕，高血压，心悸等；维吾尔族《民族药志三》记载罗布麻叶用于头晕，心悸和高血压等；《西域水道记》和《西域风闻录》记载取罗布叶和花代茶饮已有千年之久，野生罗布麻茶倍受世代罗布人喜爱，并被誉为“神茶”。本专利技术的前期实验研究表明，罗布麻茶是一种有效的Nox抑制剂，而Nox催化NADPH产生超氧阴离子，后者被超氧化物歧化酶代谢为过氧化氢，再和细胞内铁离子产生芬顿反应，生成反应活性极强的羟自由基，产生脂质过氧化和DNA受损等广泛ROS损伤，而罗布麻茶能通过抑制心脑血管疾病中导致内皮功能紊乱的超氧阴离子的产生，来保护血管内皮细胞，预防相关疾病的发生。然而单纯利用罗布麻茶来保护血管内皮细胞，存在效果弱而副作用强的问题。鉴于此，本专利技术通过大量前期研究和实验，发现罗布麻茶确实在一定浓度范围内可以抑制Nox，进而降低血管内皮细胞ROS浓度，但是存在细胞活力和细胞增殖能力降低等问题，这在细胞水平反应了罗布麻茶的作用效果和副作用。相关分析和实验验证显示，胞内ROS可区分为生理浓度的第二信号性ROS和超过生理浓度的损伤性ROS，而Nox容易在外界刺激下过度产生ROS，超过生理浓度而形成了损伤性ROS，因此不是良好的ROS来源。并且罗布麻茶抑制Nox减少了胞内ROS水平，虽然减少了作为损伤原因的ROS过量产生，但是也影响了ROS的第二信使效果，对此本专利技术通过提高NO通路活性来替代Nox以制造第二信使所需的ROS，因为NO本来就是血管内皮细胞保护性的信号通路，提高其活性既能产生适量ROS又能起到辅助第二信使ROS产生的良好作用。本专利技术作为一种功能性饮料，以优本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.利用罗布麻茶 (以总黄酮3-100mg/L终浓度范围计算原液量)抑制NADPH氧化酶活性，缓解活性氧簇诱导的血管内皮细胞损伤，但罗布麻茶的一般制作工艺不在保护范围内。/n

【技术特征摘要】
1.利用罗布麻茶(以总黄酮3-100mg/L终浓度范围计算原液量)抑制NADPH氧化酶活性，缓解活性氧簇诱导的血管内皮细胞损伤，但罗布麻茶的一般制作工艺不在保护范围内。


2.一种基于罗布麻茶以综合防治血管内皮细胞损伤的复合配方，额外添加成分包...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺小星，王文娟，
申请(专利权)人：陕西哲联生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61