一种耐热β-葡萄糖苷酶在低聚龙胆糖制备中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种耐热β‑葡萄糖苷酶在低聚龙胆糖制备中的应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明专利技术将来源于Thermotoga sp.KOL6的β‑葡萄糖苷酶TSBGl的基因以Bacillus subtilis WSH11为表达宿主，实现tsbgl基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达。所述β‑葡萄糖苷酶TSBGl的最适温度为90℃，最适pH为6.0，在90℃下具有较高的热稳定性。将所述β‑葡萄糖苷酶添加至以1200g/L葡萄糖为底物的反应体系中，在pH6.0，90℃下进行酶反应，低聚龙胆糖的产量达到178.2g/L。此酶适合食品等工业应用的需要，可用于低聚龙胆糖的工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种耐热β-葡萄糖苷酶在低聚龙胆糖制备中的应用
本专利技术涉及一种耐热β-葡萄糖苷酶在低聚龙胆糖制备中的应用，属于基因工程和酶工程领域。
技术介绍
β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21)是能够特异性的水解非还原末端的β-D-葡萄糖苷键释放葡萄糖和相应配基的一类糖苷水解酶(Glycosidehydrolysase,，GH)。β-葡萄糖苷酶广泛存在于生物体内并在其中发挥重要的作用，根据其氨基酸序列特征差异，主要分布于GH1、GH3、GH5、GH9、GH30和GH116六个家族中，其中大多数β-葡萄糖苷酶属于GH1，GH3家族。GH1和GH3家族的β-葡萄糖苷酶在蛋白质折叠，理化性质，催化特性和底物特异性等方面都存在差异。β-葡萄糖苷酶可以应用在各种行业中，例如在生物乙醇行业降解纤维二糖，消除产物抑制作用；作为水解果汁中的风味前体糖苷的增味剂；一部分β-葡萄糖苷酶因其具有的转糖苷能力而具有一定的合成活性，可以很好的替代传统的化学方法，合成稀有寡糖和烷基糖苷等应用于食品和化妆品工业中，其中由β-葡萄糖苷酶产生的低聚龙胆糖可以诱导人体肠道益生菌的生长，对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种编码β-葡萄糖苷酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种编码β-葡萄糖苷酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.携带权利要求1所述基因的载体。


3.根据权利要求2所述的载体，其特征在于，所述载体为pBSMμL3。


4.一种重组菌，其特征在于，所述重组菌以枯草芽孢杆菌为表达宿主，表达氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的β-葡萄糖苷酶，或含有权利要求2或3所述载体。


5.一种生产β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于，所述方法是利用权利要求4所述重组菌发酵产酶。


6.一种提高低聚龙胆糖产量的方法，其特征在于，利用权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴敬，夏伟，盛玲玲，黄燕，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32