一种分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法技术

本发明专利技术提供一种分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法，现利用微流控技术制备了单乳液液滴模板（O/W），内相为油相，外相为添加有造孔剂的水凝胶预聚溶液，将外相紫外光聚合，通过牺牲模板法获得反蛋白石多孔生物支架，最后将造孔剂析出进一步获得分级结构反蛋白石多孔生物支架。本发明专利技术所制备的分级结构反蛋白石多孔生物支架具有多尺度的孔洞结构，有利于细胞的黏附、迁移和分布，以及营养物质和代谢产物的交换，并促进细胞‑细胞和细胞‑胞外基质之间的联系；本方法简单易操作、一步化、实时可控，解决了传统三维多孔生物支架结构单一、孔洞单分散性差、缺乏连通性的问题，在组织工程和再生医学领域具有极大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法
本专利技术属于生物材料
，具体涉及一种分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法。
技术介绍
传统的二维细胞培养很难准确地反映出细胞在体内的真实生长环境，进而可能造成细胞结构和组织功能的缺失。相比之下，三维细胞培养能够通过细胞-细胞和细胞-基质间的相互作用更好的模拟胞内复杂的微环境，为细胞提供一个更加接近体内的三维生存条件。同时，三维细胞培养具有类组织结构，并且可以长时间保持高水平的组织特异性功能。因此，三维细胞培养已经引起科研人员的广泛关注。为了实现三维细胞培养，诸多的生物支架材料被研发，这些支架能够为细胞的生长和增殖提供一种物理支撑，保持细胞的三维结构，促使其在更接近体内环境的状态下行使功能。目前支架的制备方法主要包括冷冻干燥法、成孔剂析出法和气体发泡技术等，然而，由于对支架孔洞的单分散性及连通性缺乏精准的控制，这些支架大多数只能为细胞附着提供有限的外表面。另外，大多数的支架只能为细胞的生长提供单一尺度的多孔结构，不利于营养物质的运输。因此，具有多尺度分级结构的多孔生物支架具有极大的前景本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法，其特征在于，先利用微流控技术制备单乳液液滴模板，其中，内相为油相，外相为添加有造孔剂的水凝胶预聚溶液，并通过调节微流控内相和外相的流速，获得不同直径的液滴正模版，然后固化外相，去除液滴模板，初步获得一级结构反蛋白石多孔生物支架；随后将一级结构反蛋白石多孔生物支架浸泡到磷酸缓冲盐溶液中，析出外相中的造孔剂，最终获得分级结构反蛋白石多孔生物支架。/n

【技术特征摘要】
1.一种分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法，其特征在于，先利用微流控技术制备单乳液液滴模板，其中，内相为油相，外相为添加有造孔剂的水凝胶预聚溶液，并通过调节微流控内相和外相的流速，获得不同直径的液滴正模版，然后固化外相，去除液滴模板，初步获得一级结构反蛋白石多孔生物支架；随后将一级结构反蛋白石多孔生物支架浸泡到磷酸缓冲盐溶液中，析出外相中的造孔剂，最终获得分级结构反蛋白石多孔生物支架。


2.根据权利要求1所述的分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1、搭建微流控单乳液生成装置；
S2、微流控单乳液液滴模板的制备：
配制高分子水凝胶预聚溶液作为外相，外相溶液内包括造孔剂，外相与内相互不相容；将外相溶液注入微流控单乳液生成装置的外相通道，将内相液体注入微流控单乳液生成装置的内相通道，并调节控制内相和外相的流速，利用两相之间的流体剪切力生成单分散的水包油液滴，液滴以六方密堆积的方式自组装形成有序的液滴模板；
S3、分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备：
将S2中制备的液滴模板的外相用紫外光固化，然后用正己烷去除液滴模板，初步获得一级结构反蛋白石多孔生物支架；将一级结构反蛋白石多孔生物支架浸入磷酸盐缓冲溶液中去除造孔剂，最终获得分级结构反蛋白石多孔生物支架。


3.根据权利要求2所述的分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法，其特征在于，S2中，所述内相为50cs的甲基硅油，外相为甲基丙烯酸酐化明胶、造孔剂、十二烷基硫酸钠和聚醚型表面活性剂F108的混合溶液。


4.根据权利要求3所述的分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法，其特征在于，所述造孔剂为质量百分比浓度0.5-1.5%的聚氧化乙烯溶液。


5.根据权利要求2所述的分级结构反蛋白石多孔生物支架的制备方法，其特征在于，S2中，可通过调节内相和外相的流速而调整液滴模板的尺寸大...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵远锦，邵长敏，王月桐，
申请(专利权)人：南京鼓楼医院，
类型：发明
国别省市：江苏;32