L-苏氨酸醛缩酶突变体R318L及其应用制造技术

本发明专利技术涉及苏氨酸醛缩酶，具体涉及一种L‑苏氨酸醛缩酶突变体R318L及其应用。所述L‑苏氨酸醛缩酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的L‑苏氨酸醛缩酶的第318位氨基酸由Arg变为Leu所得。该突变体在催化3,4‑二羟基苯甲醛和甘氨酸合成屈昔多巴[L‑苏式‑(3，4‑二羟基)苯基丝氨酸]的反应中具有84.9％的非对映选择性，是野生型的2.8倍，在屈昔多巴的生物合成中具有巨大的应用潜力。

【技术实现步骤摘要】
L-苏氨酸醛缩酶突变体R318L及其应用
本专利技术涉及苏氨酸醛缩酶，具体涉及一种L-苏氨酸醛缩酶突变体R318L及其应用。
技术介绍
屈昔多巴(L-threo-DOPS，即L-苏式-(3，4-二羟基)苯基丝氨酸)是一种新的抗帕金森氏病药物，用于改善由帕金森病引起的步态僵直和直立性头晕；改善由Shy-Drager综合征或家族性淀粉样神经病所致的直立性低血压、直立性头晕和昏厥；改善血液透析患者由于直立性低血压引发的头晕和乏力。目前，屈昔多巴的合成方法主要包括化学合成和酶催化法。其中，化学合成法主要是通过加成反应，酯化反应和化学拆分来得到手性的屈昔多巴，虽然操作简单，但是反应过程中用到了大量的水、重金属和剧毒的硫化氢，并且有大量的光学异构体作为副产物，不符合目前和将来国家提倡和推进的原子经济学和环境保护政策。而酶催化法具有条件温和、用水量少(仅为化学法的十分之一)、没有重金属污染、不使用剧毒化学品、手性选择高等诸多优点，具有很好的应用前景。苏氨酸醛缩酶有着十分广泛的应用潜力，它可以催化合成手性的医药关键中间体β-羟基-α-氨基酸。根本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种L-苏氨酸醛缩酶突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的L-苏氨酸醛缩酶的第318位氨基酸由Arg变为Leu所得。/n

【技术特征摘要】
1.一种L-苏氨酸醛缩酶突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNO:3所示，是氨基酸序列为SEQIDNO:1的L-苏氨酸醛缩酶的第318位氨基酸由Arg变为Leu所得。


2.编码权利要求1所述的L-苏氨酸醛缩酶突变体的基因。


3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO:4所示。


4.包含权利要求2所述基因的表达盒、载体或重组菌。


5.权利要求1所述的L-苏氨酸醛缩酶突变体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：合成所述L-苏氨酸醛缩酶突变体的编码基因，构建表达载体，转化蛋白表达宿主菌，诱导蛋白表达并纯化。


6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伯初，赵文艳，潘银平，杨碧玲，祝连彩，戚娜，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50