人睾丸间质干细胞的分离与培养方法技术

本发明专利技术公开了一种人睾丸间质干细胞的分离与培养方法。本发明专利技术研究提出一种人睾丸组织中特异表达于人睾丸间质干细胞(SLC)的特异性标志物，即CD248蛋白，以用于从人睾丸组织识别和分离高纯度的人SLC。并以此建立了从人睾丸组织中分离获得高纯度SLC的方法，所得SLC无睾丸中其他类型细胞的混入，纯度高。同时还对人SLC的培养体系进行了优化改进，所得睾丸间质干细胞无血清培养基成分明确，有利于标准化，并据此建立了睾丸间质干细胞高效稳定的培养扩增体系。本发明专利技术可从人睾丸组织中获得高纯度的人SLC，为睾丸间质干细胞治疗男性性腺功能减退症的临床转化提供了高质量的种子细胞，对推动人SLC的特性研究，尤其是SLC的临床转化具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
人睾丸间质干细胞的分离与培养方法
本专利技术属于生物医药
更具体地，涉及一种人睾丸间质干细胞的分离与培养方法。
技术介绍
男性体内超过95％以上的睾酮是由睾丸间质细胞(Leydigcell,LC)合成和分泌的。当由于先天性、获得性疾病引起LC合成睾酮能力不足，就会发生男性性腺功能减退，导致性功能障碍和男性不育；而且与骨质疏松、肌肉萎缩、向心性肥胖、记忆力和认知功能下降、糖尿病、心脑血管疾病等重大疾病的发生发展密切相关(NEnglJMed.2013；JAMAInternMed.2017；JAMA.2017；AgingMale.2018邓春华等)。目前，临床上仅能通过补充外源性雄激素(TestosteroneReplacementTherapy,TRT)缓解男性性腺功能减退的部分临床症状，但存在以下明显缺陷：1.需要长期给药；2.丧失昼夜节律；3.增加心脑血管事件及前列腺癌的风险；4.损害生精功能，造成男性不育问题(NEnglJMed.2015；JAmCollCardiol.2016)。由于上述缺陷，接受TRT治疗的男性不足性腺功能减退患者本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蛋白CD248在作为人睾丸间质干细胞检测/分离/分选标志物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.蛋白CD248在作为人睾丸间质干细胞检测/分离/分选标志物中的应用。


2.蛋白CD248的检测试剂在分离/分选人睾丸间质干细胞中或在制备分离/分选人睾丸间质干细胞的试剂中的应用。


3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述蛋白CD248的检测试剂为CD248荧光抗体或CD248磁珠抗体。


4.一种人睾丸间质干细胞的分离方法，其特征在于，从人睾丸组织中分离CD248阳性的人睾丸间质干细胞。


5.根据权利要求4所述分离方法，其特征在于，从人睾丸组织细胞悬液中分离CD248阳性的人睾丸间质干细胞。


6.根据权利要求5所述分离方法，其特征在于，人睾丸组织细胞悬液用CD248荧光抗体标记后，进行分选，收集表达CD248的细胞，从而分离出CD24...

【专利技术属性】
技术研发人员：项鹏，邓春华，夏凯，柯琼，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44