度骨化醇注射剂的分析方法技术

本发明专利技术公开了度骨化醇注射剂的分析方法，其包括：通过高效液相色谱进行测定，色谱柱为具有中等强度的疏水性和氢键键合相为色谱柱填料的反相色谱柱，流动相由水相和有机相组成，按体积分数设置梯度洗脱；以及利用外标法进行定量分析。其分析方法中，色谱柱规格为150*4.6mm,3μm，检测波长为265nm至274nm，柱温为30℃至40℃，进样盘温度为5℃，流速为1.0ml/min至1.7ml/min。该方法简单、易行，能很好的应用于度骨化醇注射剂含量的测定。

【技术实现步骤摘要】
度骨化醇注射剂的分析方法领域本专利技术涉及药物分析
，特别涉及度骨化醇注射剂的分析方法。背景度骨化醇是一种维生素D2类似物，在体内被激活后具有活性。度骨化醇主要用于继发性甲状旁腺功能亢进症治疗，能够有效的抑制全段甲状旁腺激素的分泌，较小程度增加血钙和血磷浓度，因此与其他骨化醇相比，高钙血症和高磷血症的发生率低，更加安全有效。为了保证度骨化醇后续的研发和生产质量，需要对原料药及其制剂的质量进行控制。因此，研究获得一种度骨化醇的含量测定的检测方法，这对医药生产企业来说显得尤为迫切。通过查阅中外文献及专利，目前对度骨化醇含量的检测方法较为单一，不利于企业对产品质量的把控，所以亟需一种有效测定度骨化醇含量的分析方法。概述本公开涉及度骨化醇注射剂的分析方法，其包括：通过高效液相色谱进行测定，色谱柱为具有中等强度的疏水性和氢键键合相为色谱柱填料的反相色谱柱，流动相由水相和有机相组成，按体积分数设置梯度洗脱；以及利用外标法进行定量分析。附图简要说明图1示出了本公开的空白溶液(甲醇)的色谱图。图2示出了本公开实施例1的度骨化醇的高效液相色谱图。图3示出了本公开实施例2的度骨化醇的高效液相色谱图。图4示出了本公开实施例3的度骨化醇的高效液相色谱图。详述在以下的说明中，包括某些具体的细节以对各个公开的实施方案提供全面的理解。然而，相关领域的技术人员会认识到，不采用一个或多个这些具体的细节，而采用其他方法、部件、材料等的情况下仍实现实施方案。除非本公开中另有要求，在整体说明书和所附的权利要求中，词语“包括”、“包含”、“含有”和“具有”应解释为开放式的、含括式的意义，即“包括但不限于”。在整体说明书中提到的“一实施方案”、“实施方案”、“在另一实施方案中”或“在某些实施方案中”意指在至少一实施方案中包括与该实施方案所述的相关的具体参考要素、结构或特征。因此，在整个说明书中不同位置出现的短语“在一实施方案中”或“在实施方案中”或“在另一实施方案中”或“在某些实施方案中”不必全部指同一实施方案，此外，具体要素、结构或特征可以任何适当的方式在一个或多个实施方案中结合。定义在本公开中，术语“外标法”是指用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法。在本公开中，术语“梯度洗脱”又称为“梯度淋洗”或“程序洗脱”，即在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比。具体实施方式本公开涉及度骨化醇注射剂的分析方法，其包括：通过高效液相色谱进行测定，色谱柱为具有中等强度的疏水性和氢键键合相为色谱柱填料的反相色谱柱，流动相由水相和有机相组成，按体积分数设置梯度洗脱；以及利用外标法进行定量分析。在某些实施方案中，梯度洗脱的程序为：0min，水与有机溶剂的体积比为72:28；35min，水与有机溶剂的体积比为72:28；43min，水与有机溶剂的体积比为83:17；45min，水与有机溶剂的体积比为83:17；46min，水与有机溶剂的体积比为72:28；55min，水与有机溶剂的体积比为72:28。在某些实施方案中，梯度洗脱的程序还包括：0min，水与有机溶剂的体积比为70:30；15min，水与有机溶剂的体积比为70:30；20min，水与有机溶剂的体积比为86:14；25min，水与有机溶剂的体积比为86:14；25.01min，水与有机溶剂的体积比为70:30；30min，水与有机溶剂的体积比为70:30。在某些实施方案中，有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙腈或其混合物。在某些实施方案中，有机溶剂选自乙腈。在某些实施方案中，还包括液相色谱检测前溶液的制备，所述溶液包括：空白溶液，所述空白溶液为甲醇；供试品溶液，所述供试品溶液是由度骨化醇注射剂与甲醇组成；以及对照品溶液，所述对照品溶液是由度骨化醇对照品与甲醇组成。在某些实施方案中，供试品溶液浓度为0.001mg/ml至1mg/ml。在某些实施方案中，供试品溶液浓度为0.003mg/ml。在某些实施方案中，对照品溶液浓度为0.001至1mg/ml。在某些实施方案中，对照品溶液浓度为0.003mg/ml。在某些实施方案中，色谱柱的检测波长为265nm至274nm。在某些实施方案中，色谱柱的流速为1.0ml/min至1.7ml/min。在某些实施方案中，色谱柱的柱温为30℃至40℃。在某些实施方案中，进样盘温度为0℃至10℃。在某些实施方案中，进样盘温度为5℃。在某些实施方案中，色谱柱的进样量为20μL至200μL。在某些实施方案中，色谱柱的进样量为100μL。实施例1采用YMC-PackODS-AQ色谱柱，150*4.6mm，3μm或与其等效的色谱柱，其中：柱温为40℃进样盘温度为5℃检测波长为265nm流速为1.2ml/min流动相为水和有机溶剂的混合溶液，洗脱方式为梯度洗脱，具体请参表1所示。表1梯度洗脱实验步骤如下：称取度骨化醇原料药适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中含有度骨化醇0.003mg/ml的溶液，作为含量对照品溶液；同法配制供试品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各100μl注入液相色谱仪，记录液相色谱图。如图1所示，为空白溶液的色谱图，是一条水平直线，未出现峰。如图2所示，为供试品溶液的高效液相色谱图，图谱中度骨化醇的出峰保留时间为42.268，峰面积为290113，供试品的称样量为4.96mg，对照品称样量为5.35mg，峰面积为322496。计算：式中：Au——供试品溶液中度骨化醇的峰面积；As——对照品溶液中度骨化醇的峰面积；ms——对照品的称样量，mg；mu——供试品的称样量，mg。按外标法计算度骨化醇含量为97％。实施例2采用YMC-PackODS-AQ色谱柱，150*4.6mm，3μm或与其等效的色谱柱，其中：柱温为40℃进样盘温度为5℃检测波长为274nm流速为1.2ml/min流动相为水和有机溶剂的混合溶液，洗脱方式为梯度洗脱，具体请参表2所示。表2梯度洗脱实验步骤如下：称取度骨化醇原料药适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中含有度骨化醇0.003mg/ml的溶液，作为含量对照品溶液；同法配制供试品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各100μl注入液相色谱仪，记录液相色谱图。如图3所示，为供试品溶液的高效液相色谱图，图谱中度骨化醇的出峰保留时间为42.268，峰面积为261401，供试品本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.度骨化醇注射剂的分析方法，其包括：/n通过高效液相色谱进行测定，色谱柱为具有中等强度的疏水性和氢键键合相为色谱柱填料的反相色谱柱，流动相由水和有机溶剂组成，按体积分数设置梯度洗脱；以及/n利用外标法进行定量分析。/n

【技术特征摘要】
1.度骨化醇注射剂的分析方法，其包括：
通过高效液相色谱进行测定，色谱柱为具有中等强度的疏水性和氢键键合相为色谱柱填料的反相色谱柱，流动相由水和有机溶剂组成，按体积分数设置梯度洗脱；以及
利用外标法进行定量分析。


2.如权利要求1所述的分析方法，其中所述梯度洗脱的程序为：
0min，水与有机溶剂的体积比为72:28；
35min，水与有机溶剂的体积比为72:28；
43min，水与有机溶剂的体积比为83:17；
45min，水与有机溶剂的体积比为83:17；
46min，水与有机溶剂的体积比为72:28；
55min，水与有机溶剂的体积比为72:28。


3.如权利要求1所述的分析方法，其中所述梯度洗脱的程序还包括：
0min，水与有机溶剂的体积比为70:30；
15min，水与有机溶剂的体积比为70:30；
20min，水与有机溶剂的体积比为86:14；
25min，水与有机溶剂的体积比为86:14；
25.01min，水与有机溶剂的体积比为70:30；
30min，水与有机溶剂的体积比为...

【专利技术属性】
技术研发人员：何园园，张莹，周圆月，
申请(专利权)人：卓和药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32