一种用于检测KRAS基因突变的核苷酸序列组及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种核苷酸序列组，包括正向引物和反向引物，用于扩增含有突变型KRAS基因的一部分；正向引物的3’末端对应突变型KRAS基因正义链中突变位点、突变位点向正义链5’端10个碱基以及突变位点向正义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置；或者反向引物的3’末端对应突变型KRAS基因反义链中突变位点、突变位点向反义链5’端10个碱基以及突变位点向反义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置。该核苷酸序列组还包括阻断核苷酸序列。采用本发明专利技术的核苷酸序列组，配合荧光定量PCR检测方法，可以将KRAS突变基因的检测灵敏度提升至0.01％。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测KRAS基因突变的核苷酸序列组及其应用
本专利技术涉及分子生物学领域，尤其涉及一种用于基因突变检测的核苷酸序列组及其应用。
技术介绍
ras基因家族中，与人类肿瘤相关的有HRAS、KRAS和NRAS，其中，KRAS对人类癌症影响最大。KRAS基因定位于12号染色体上，KRAS基因参与细胞内的信号传递。正常生理情况下，在细胞受到外界刺激后激活EGFR等信号通路时，野生型的KRAS被活性EGFR等酪氨酸激酶磷酸化后短暂活化，活化后的KRAS可以激活该信号通路中的下游信号蛋白，而后KRAS迅速失活。突变型KRAS蛋白导致蛋白功能异常，在无EGFR活化信号刺激下仍处于激活状态，导致肿瘤的持续增殖。KRAS的基因突变常见于肺癌、结直肠癌、腺癌等多种恶性肿瘤，在肺癌中的突变率为15～30％，在结直肠癌患者中的突变率为20～50％，与肿瘤细胞的生存、增殖、迁移、扩散、血管生成均有关系。检测KRAS基因突变是深入了解癌基因的情况、了解各种癌症的发展预后、放化疗疗效的重要指标。现有的KRAS基因突变检测方法中，组织活检侵袭性大，样本获取难度大本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核苷酸序列组，其特征在于，所述核苷酸序列组包括正向引物和反向引物，用于扩增含有突变型KRAS基因的一部分；所述正向引物的3’末端对应突变型KRAS基因正义链中突变位点、突变位点向正义链5’端10个碱基以及突变位点向正义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置；或者反向引物的3’末端对应突变型KRAS基因反义链中突变位点、突变位点向反义链5’端10个碱基以及突变位点向反义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置。/n

【技术特征摘要】
1.一种核苷酸序列组，其特征在于，所述核苷酸序列组包括正向引物和反向引物，用于扩增含有突变型KRAS基因的一部分；所述正向引物的3’末端对应突变型KRAS基因正义链中突变位点、突变位点向正义链5’端10个碱基以及突变位点向正义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置；或者反向引物的3’末端对应突变型KRAS基因反义链中突变位点、突变位点向反义链5’端10个碱基以及突变位点向反义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置。


2.如权利要求1所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述核苷酸序列组还包括阻断核苷酸序列，所述阻断核苷酸序列对应于所述突变位点处的一段野生型KRAS基因，能减少或阻止所述正向引物或所述反向引物对野生型KRAS基因的扩增。


3.如权利要求2所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述正向引物或所述反向引物上包括人为突变位点，所述人为突变位点使得所述正向引物与突变型KRAS基因的反义链不能完全互补；或者所述人为突变位点使得所述反向引物与突变型KRAS基因的正义链不能完全互补。


4.如权利要求3所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述人为突变位点位于距正向引物3’端1-10个碱基中任何一个的位置；或者所述人为突变位点位于距反向引物3’端1-10个碱基中任何一个的位置。

【专利技术属性】
技术研发人员：李超群，王永成，王旭，谭英绮，
申请(专利权)人：成都华青精准医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51