一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法及其产品技术

本发明专利技术公开了一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法及其产品，包括，酶法醇解多不饱和脂肪酸油脂获得富含sn‑2单甘脂的酶解产物，通过溶剂结晶分提去除富含sn‑2单甘脂的酶解产物中含饱和脂肪酸的sn‑2单甘脂，获得富含多不饱和脂肪酸的sn‑2单甘脂；将富含多不饱和脂肪酸的sn‑2单甘脂溶剂萃取除去中性脂质获得高纯度sn‑2单甘脂；向高纯度sn‑2单甘脂中加入中碳链脂肪酸，通过酶法酯化获得高纯度MLM型中长碳链甘油三酯。本发明专利技术高纯度MLM型中长碳链甘油三酯中sn‑2位多不饱和脂肪酸含量在70％以上，sn‑2位饱和脂肪酸小于12％，且MLM型在85％以上，有利于功能性脂肪酸的消化吸收。

【技术实现步骤摘要】
一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法及其产品
本专利技术属于油脂
，具体涉及一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法及其产品。
技术介绍
中长链甘油三酯(MLCTs)是一种被广泛研究并应用于临床的结构脂质产品，是通过生物或者化学催化法获得中碳链脂肪酸(MCFAs)和长碳链脂肪酸(LCFAs)结合于同一甘油骨架的新型结构甘油脂混合物，最典型的是中-长-中碳链型结构脂(MLM)。中碳链脂肪酸具有较强的水溶性，因而在胃消化过程可被快速水解，并通过门静脉吸收至肝脏提供即时能量。消化产生的甘油二酯(DAG)或甘油一酯(MAG)可作为乳化剂在小肠中起到乳化作用，提高脂质的比表面积，协助胰脂酶进行脂质消化，在一定程度上弥补消化系统不完善所带来的缺陷。因此，在MLCTs中结合功能性脂肪酸，如多不饱和脂肪酸(DHA，ARA，EPA等)将有利于其消化吸收。脂肪酸在甘油骨架的位置影响其在人体内的代谢，脂肪酸在sn-2位比在sn-1,3位具有更高的生物利用率。因此，可以判断，MLM中长链甘油三酯，一方面有利于MCFAs提供快速能量，另一方面有利于提升LCFAs的生物利用率，是MLCTs中最理想的分子形式。在MLCTs合成方面，报道多采用中碳链甘油三酯(MCT)与长碳链甘油三酯(LCT)进行酶法酯交换反应得到产品。由于酶催化的反应为可逆反应，MCT与LCT既是反应中的反应物，也是反应后的产物。因此，在反应产物中均含有一定量的MCT与LCT，从而导致MLCTs的含量不高。由于在酯交换反应中引入了MCT，也导致最终产物中功能性脂肪酸的含量降低。同时，反应中并不能确定MCFAs在TAG上的位置，故理想的MLM型MLCTs得率降低。也有采用特异性酶催化定向酸解的方法制备得到MLCTs，在催化过程中，由于大多数功能性脂肪酸为长链多不饱和脂肪酸，脂肪酶酶对其的活性较低，同时由于可逆反应中，存在反应平衡，因此会形成大量的含有LLM型MLCTs，理想型MLM含量较低。同时，由于所选择的食用油在sn-2位可能含有其它饱和脂肪酸，最终降低MLCTs中sn-2位功能性脂肪酸的含量。因此，如何制备高纯度的MLM型MLCTs，且制备工艺简单是本领域有待解决的技术问题。
技术实现思路
本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。鉴于上述的技术缺陷，提出了本专利技术。因此，作为本专利技术其中一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，包括，将含多不饱和脂肪酸油脂与乙醇按照摩尔比1:5～15的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入4～12wt％的脂肪酶，在温度为20～30℃、搅拌速率为400～800rpm的条件下密封反应6～14h，得富含sn-2单甘脂的酶解产物，其中，sn-2单甘脂含量在85％以上；通过溶剂结晶分提去除富含sn-2单甘脂的酶解产物中含饱和脂肪酸的sn-2单甘脂，获得富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂；将富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂溶剂萃取除去中性脂质获得高纯度sn-2单甘脂；向高纯度sn-2单甘脂中加入中碳链脂肪酸，通过酶法酯化获得高纯度MLM型中长碳链甘油三酯；其中，所述高纯度MLM型中长碳链甘油三酯中sn-2位多不饱和脂肪酸含量在70％以上，且MLM型在85％以上。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述并向其中加入4～12wt％的脂肪酶，其中，脂肪酶为Novozym435。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述含多不饱和脂肪酸油脂，包括富含DHA微生物油脂、ARA微生物油脂和富含EPA、DHA深海鱼油中的一种或几种。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述富含ARA的油脂，来自于Mortierella真菌发酵，包括Mortierellaelongate，Mortierellaalpine和Mortierellaramanniana中的一种，ARA含量在40％以上。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述富含DHA的微生物油脂，为微藻Crypthecodiniumcohnii、Schizochytruimsp.和Ulkeniasp.发酵生产，DHA含量在40％以上。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述富含EPA、DHA深海鱼油，其中，深海鱼油中EPA和DHA含量在20％以上。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述通过溶剂结晶分提去除富含sn-2单甘脂的酶解产物中含饱和脂肪酸的sn-2单甘脂，其中，溶剂结晶分提包括，将富含sn-2单甘脂的酶解产物与正己烷、甲基叔丁基醚组成的混合溶液按照体积比为1:6～14混合，充分搅拌混匀，并放置到-30～-18℃保存3～6小时进行溶剂结晶分提后，在-25℃的条件下采用真空抽滤去除含饱和脂肪酸的单甘脂，并利用常温真空减压蒸馏去除溶剂，获得富含sn-2单甘脂的脂肪酸；其中，正己烷与甲基叔丁基醚的体积比为70:30，分提产物sn-2单甘脂的多不饱和脂肪酸含量在70％以上，饱和脂肪酸含量小于10％。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述溶剂萃取，包括，将溶剂结晶分提后的富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂和乙腈和水组成的混合液按体积比5～15:1充分混匀，再利用相同体积的正己烷洗脱3～5次，除去中性脂质，sn-2单甘脂富集在乙腈和水的混合液中，并采用常温减压蒸馏去除混合液，获得sn-2单甘脂；其中，乙腈和水组成的混合液中，乙腈和水的体积比为95:5。作为本专利技术所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法的一种优选方案：所述通过酶法酯化获得高纯度MLM型中长碳链甘油三酯，包括，向高纯度sn-2单甘脂中加入中碳链脂肪酸，单甘脂与中碳链脂肪酸底物摩尔比为1：3～6，并加入5～15wt％的LipozymeRMIM或者LipozymeTLIM，在温度为20～30℃，真空度为0.095MPa，搅拌速率400～800rpm的条件下反应4～12h，获得MLM型的中长链甘油三酯。作为本专利技术的另一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法制得的含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯产品，所述含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯产品中，sn-2位多不饱和脂肪酸含量在70％以上，sn-2位饱和脂肪酸含量小于12％，且MLM型含量在85％以上。本专利技术的有益效果：(1)本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，其特征在于：包括，/n将含多不饱和脂肪酸油脂与乙醇按照摩尔比1:5～15的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入4～12wt％的脂肪酶，在温度为20～30℃、搅拌速率为400～800rpm的条件下密封反应6～14h，得富含sn-2单甘脂的酶解产物，其中，sn-2单甘脂含量在85％以上；/n通过溶剂结晶分提去除富含sn-2单甘脂的酶解产物中含饱和脂肪酸的sn-2单甘脂，获得富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂；/n将富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂溶剂萃取除去中性脂质获得高纯度sn-2单甘脂；/n向高纯度sn-2单甘脂中加入中碳链脂肪酸，通过酶法酯化获得高纯度MLM型中长碳链甘油三酯；其中，/n所述高纯度MLM型中长碳链甘油三酯中sn-2位多不饱和脂肪酸含量在70％以上，且MLM型在85％以上。/n

【技术特征摘要】
1.一种含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，其特征在于：包括，
将含多不饱和脂肪酸油脂与乙醇按照摩尔比1:5～15的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入4～12wt％的脂肪酶，在温度为20～30℃、搅拌速率为400～800rpm的条件下密封反应6～14h，得富含sn-2单甘脂的酶解产物，其中，sn-2单甘脂含量在85％以上；
通过溶剂结晶分提去除富含sn-2单甘脂的酶解产物中含饱和脂肪酸的sn-2单甘脂，获得富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂；
将富含多不饱和脂肪酸的sn-2单甘脂溶剂萃取除去中性脂质获得高纯度sn-2单甘脂；
向高纯度sn-2单甘脂中加入中碳链脂肪酸，通过酶法酯化获得高纯度MLM型中长碳链甘油三酯；其中，
所述高纯度MLM型中长碳链甘油三酯中sn-2位多不饱和脂肪酸含量在70％以上，且MLM型在85％以上。


2.如权利要求1所述的含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，其特征在于：所述并向其中加入4～12wt％的脂肪酶，其中，脂肪酶为Novozym435。


3.如权利要求1所述的含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，其特征在于：所述含多不饱和脂肪酸油脂，包括富含DHA微生物油脂、ARA微生物油脂和富含EPA、DHA深海鱼油中的一种或几种。


4.如权利要求3所述的含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，其特征在于：所述富含ARA的油脂，来自于Mortierella真菌发酵，包括Mortierellaelongate，Mortierellaalpine和Mortierellaramanniana中的一种，ARA含量在40％以上。


5.如权利要求3所述的含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，其特征在于：所述富含DHA的微生物油脂，为微藻Crypthecodiniumcohnii、Schizochytruimsp.和Ulkeniasp.发酵生产，DHA含量在40％以上。


6.如权利要求3所述的含多不饱和脂肪酸的中长碳链甘油三酯的制备方法，其特征在于：所述富含EPA、DHA深...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹孝强，张晖，金青哲，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32