非编码RNA作为骨质疏松症的诊治标志物制造技术

本发明专利技术公开了非编码RNA作为骨质疏松症的诊治标志物。骨质疏松症患者血液中LOC105376001含量与正常人之前存在显著差异，根据差异可以区分骨质疏松症患者和非骨质疏松症患者。本发明专利技术还公开了一种骨质疏松症的诊断方法，该诊断方法可以通过检测血液中LOC105376001来实现骨质疏松症的无创诊断。另外，本发明专利技术的研究成果为开发治疗骨质疏松症提供了理论基础。

【技术实现步骤摘要】
非编码RNA作为骨质疏松症的诊治标志物
本专利技术属于生物医学领域，涉及非编码RNA的诊断用途，具体涉及LOC105376001作为骨质疏松症的诊治标志物的用途。
技术介绍
男性骨质疏松症(osteoporosisinmen)的发病率大大低于绝经后的女性，故以往对男性骨质疏松症远不及对女性的重视。近几年的研究成果表明，青年时期的男性比女性虽能达到更高的峰值骨量，骨量丢失的起始时间也明显晚于女性，但男女两性都有一个与年龄增长相位的骨丢失过程，即老年性骨质疏松症(Ⅱ型)。男性骨质疏松症与女性骨质疏松症有很多相似之处，但在病因学、病理学和澈地病学等方面仍有明显的性别差别。65岁以上的男性普遍存在程度不等的骨质疏松，其严重并发症是骨折。在美国，大于65岁的男性髋骨骨折的发生率为4‰-5‰，相应年龄的女性发生率为8‰-10‰。在北欧的髋骨骨折发生率为男∶女＝1∶2，在南欧及其他地区，髋骨骨折的发生率在两性中均相对较低。在世界范围内所有髋骨骨折的病人中，约30％为男性，1990年为51万，预计到2025年男性髋骨骨折的人数将增加到116万人，而这一上升趋势在亚洲将更加突出。Cooper报告50岁以上男性在一生中的髋部、椎体和前臂骨折危险度为13.1％，而女性为39.7％。Neill报道，经欧洲19个国家36个中心15570例50-79岁人群椎体骨折的男性患病率为20％。我国有关男性骨质疏松症的患病率，据上海地区徐尚忠报道，60岁以上男性为13.9％；北京地区吴青报道为13.4％(腰椎)；沈惠良报道为23.8％(腰椎)。骨质疏松性骨折给患者造成生活能力的丧失及生命危险，Poor报道骨折的死亡率和发病率男性高于女性。与女性骨质疏松相同，普通x线仍是诊断男性骨质疏松和相关骨折的必要手段。首要表现为脊柱和骨盆的骨质密度减低。椎体骨皮质变薄，横行骨小梁减少或消失，纵行骨小梁相对明显，严重时椎体内结构消失；椎体变扁，其上下缘内凹、椎间隙增宽，椎体呈双凹状，常因轻微外伤而压缩呈楔形。在长骨上可见骨小梁变细、数量减少、骨皮质变薄和出现分层现象。严重时可在弥漫性骨质密度减低的基础上出现散在分布的数毫米大小的点状透亮区，其边界清楚或模糊，易误诊为骨质破坏。但X线平片对诊断骨质疏松的敏感性和准确性低，对骨质疏松的早期诊断帮助不大。因此亟待开发一种在骨质疏松症早期即可诊断骨质疏松症的方法。
技术实现思路
本专利技术所要解决的一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种与男性骨质疏松症诊断相关的长链非编码RNA标志物。本专利技术所要解决的另一个技术问题是提供一种上述lncRNA标志物的检测方法，该检测方法不直接用于疾病的诊断与治疗。本专利技术所要解决的又一个技术问题是提供一种上述lncRNA标志物在制备诊断男性骨质疏松症的产品中的应用。本专利技术为解决上述技术问题，采用了如下技术方案：本专利技术一方面，提供了一种与男性骨质疏松症诊断相关的分离的长链非编码RNA，所述长链非编码RNA是LOC105376001。在另一优选例中，所述LncRNA分离自人或非人哺乳动物的血液和/或组织。在另一优选例中，所述的血液为血浆和/或血清。在另一优选例中，所述的血液不包括血细胞。在另一优选例中，所述的非人哺乳动物为小鼠、大鼠、兔、猪、牛、羊等。在另一优选例中，所述LncRNA分离自人血液。本专利技术第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸能被人细胞转录成本专利技术第一方面的长链非编码RNA。本专利技术第三方面，提供了一种载体，所述载体含有本专利技术第二方面的多核苷酸，或表达本专利技术第一方面的长链非编码RNA。本专利技术第四方面，提供了一种试剂，所述试剂是能够检测本专利技术第一方面的长链非编码RNA表达量的试剂。进一步，所述试剂包括利用SYBRGreen、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、或复合探针检测所述长链非编码RNA表达量时使用的PCR扩增引物。在本专利技术的具体实施例中，所述引物序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。本专利技术第五方面，提供了一种诊断骨质疏松症的芯片，所述芯片包括固相载体以及以及有序固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针特异性地对应于本专利技术第一方面的长链非编码RNA。本专利技术第六方面，提供了本专利技术第五方面的芯片的用途，用于制备诊断男性骨质疏松症的试剂盒。本专利技术第七方面，提供了一种试剂盒，所述试剂盒含有本专利技术第一方面的长链非编码RNA或本专利技术第四方面的试剂，或本专利技术第五方面的芯片。进一步，本专利技术的试剂盒还可以包含RT-PCR反应所需的下列成分：PCRbuffer、10mMdNTPs、HotstartTaq酶、ddH2O。进一步，本专利技术的试剂盒还可以包含长链非编码RNA反转录得到的cDNA，作为检测上述引物可行性的阳性模板。本专利技术第八方面，提供了本专利技术第一方面的长链非编码RNA、或本专利技术第四方面的试剂的用途，用于制备诊断男性骨质疏松症的芯片或试剂盒。本专利技术提供了本专利技术第一方面的长链非编码RNA在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。进一步，所述药物包括促进所述长链非编码RNA表达的物质。本专利技术所述药物还包括药物学上可接受的载体。通过常规制药工艺将有效成分-促进所述生物标志物表达的物质与药物学上可接受的载体制备成本专利技术的药物。本专利技术的促进所述长链非编码RNA表达的物质不受限制，只要是可以促进或者增强所述长链非编码RNA或涉及所述长链非编码RNA上游或下游途径的物质的表达，且对于治疗骨质疏松症有效的即可。促进所述长链非编码RNA表达的物质从功能角度来讲，可以促进骨质疏松症相关的成骨细胞增殖、促进成骨细胞分化。促进所述长链非编码RNA表达的物质的类型可以包括核酸、碳水化合物、脂类、小分子化合物、多肽、蛋白、多糖。具体地，促进所述长链非编码RNA表达的物质包括所述长链非编码RNA、含有所述长链非编码RNA的过表达载体或宿主细胞、促进型miRNA、促进型转录调控因子、或促进型靶向小分子化合物。本专利技术的促进所述长链非编码RNA表达的物质可以用于补充内源性的所述长链非编码RNA的缺失或不足，通过提高所述长链非编码RNA的表达，从而治疗因所述长链非编码RNA缺乏导致的骨质疏松症。本专利技术还提供了一种用于治疗骨质疏松症的药物组合物，所述药物组合物包括上面所述的促进所述长链非编码RNA表达的物质。本专利技术的药物组合物还包括药学上可接受的载体，载体，这类载体包括(但并不限于)：稀释剂、赋形剂如水等、填充剂如淀粉、蔗糖等；粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂季铵化合物；表面活性剂如十六烷醇；吸附载体如高岭土和皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、聚乙二醇等。本专利技术的药物组合物还可与其他治疗骨质疏松症的药物联用，多种药物联合使用可以大大提到治疗的成功率。本专利技术的试剂盒的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的长链非编码RNA，其特征在于，所述长链非编码RNA是LOC105376001。/n

【技术特征摘要】
20190531 CN 20191047320921.一种分离的长链非编码RNA，其特征在于，所述长链非编码RNA是LOC105376001。


2.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸能被人细胞转录成权利要求1所述的长链非编码RNA。


3.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求2所述的多核苷酸，或表达权利要求1所述的长链非编码RNA。


4.一种试剂，其特征在于，所述试剂是能够检测权利要求1所述的长链非编码RNA表达量的试剂。


5.一种诊断骨质疏松症的芯片，其特征在于，所述芯片包括固相载体以及以及有序固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针特异性地对应于权利要求1所述的长链非编码RNA。


6.权利要求5所述的芯片的用途，其特征在于，用于制备诊断骨质疏松症的试剂盒。

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【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，向常娟，
申请(专利权)人：固安博健生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13