一种合成β-法尼烯的基因工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种合成β‑法尼烯的基因工程菌及其应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术基因工程菌敲除了酿酒酵母中GAL80、ALD6、ALD4、ADH5和RHR2基因，整合了AaFS、LmPK、CkPTA、DzeutE、SpHMGR、GAL4和HMG1基因，其中利用的启动子和终止子分别为P

【技术实现步骤摘要】
一种合成β-法尼烯的基因工程菌及其应用
本专利技术涉及一种合成β-法尼烯的基因工程菌及其应用，属于基因工程

技术介绍
法尼烯(C15H24)，密度0.813g/cm3，是一种无环倍半萜，它由苹果、青蒿等植物中产生来对抗外界昆虫或动物的侵害(Nieuwenhuizenetal.,2014；Yangetal.,2011)，而其吸湿性低和高能量密度的特点使其成为高密度燃料的研究对象。随着合成生物学的不断发展，以微生物作为细胞工厂合成法尼烯成为一种可持续、快速、绿色的生产方法。然而，目前，在微生物细胞中生产法尼烯并不理想，利用微生物生产法尼烯一直缓慢前行，未能实行工业化生产。现有报道中，大肠杆菌作为底盘细胞产生法尼烯发酵生产α-farnesene的产量能够达到380mg/L(Zhuetal.,2014)，生产β-farnesene8.74g/L(Utilizationofbiodieselby-productassubstrateforhigh-productionofβ-farneseneviarelativelybalancedm本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种合成β-法尼烯的基因工程菌，其特征在于，该基因工程菌的出发菌株为酵母菌，所述酵母菌敲除了自身的内源基因GAL80、ALD6、ALD4、ADH5和RHR2基因，整合了β-法尼烯合成酶基因AaFS、LmPK、CkPTA、DzeutE、SpHMGR、GAL4和tHMG1基因，所需的启动子和终止子分别为P

【技术特征摘要】
1.一种合成β-法尼烯的基因工程菌，其特征在于，该基因工程菌的出发菌株为酵母菌，所述酵母菌敲除了自身的内源基因GAL80、ALD6、ALD4、ADH5和RHR2基因，整合了β-法尼烯合成酶基因AaFS、LmPK、CkPTA、DzeutE、SpHMGR、GAL4和tHMG1基因，所需的启动子和终止子分别为PGAL1，PGAL10，PGAL4和TCYC1，TADH1。


2.根据权利要求1所述的合成β-法尼烯的基因工程菌，其特征在于，所述酵母菌为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，基因型为：CEN.PK2-1C(MATa；ura3-52；trp1-289；leu2-3_112；his3Δ1；MAL2-8c；SUC2)。


3.根据权利要求1所述的合成β-法尼烯的基因工程菌，其特征在于，所述法尼烯合成酶基因AaFS是经过密码子优化的，原始法尼烯合成酶基因AaFS来自Artemisiaannua，GenBank登录号为AAX39387.1，优化后的法尼烯合成酶基因AaFS的序列见SEQIDNO.1，所述β-法尼烯合成酶基因AaFS整合在所述出发菌株酵母菌染色体GAL80位点，启动子和终止子分别为PGAL10和TCYC1；所述LmPK基因来自Leuconostocmesenteroides，NCBIaccessionnumberYP_819405.1，所述LmPK基因整合在所述出发菌株酵母菌染色体ALD6位点，启动子和终止子分别为PGAL10和TCYC1；所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张海波，刘丽娟，咸漠，齐畅，曹小贺，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37