【技术实现步骤摘要】
一种痢疾杆菌特异性多糖纯化方法
本专利技术涉及一种痢疾杆菌特异性多糖(也称O-特异性多糖)纯化方法。本专利技术特别涉及的痢疾杆菌特异性多糖可以作为原材料或终产品用于疾病诊断、预防、治疗等,也可制备特异性多糖的标准品或参比品,也可用于制备偶联疫苗。
技术介绍
革兰氏阴性细菌的特异性多糖是脂多糖的一部分。脂多糖是革兰氏阴性细菌外膜外侧的最主要成分,由3部分组成,分别是特异性多糖、核心多糖和脂质A。其中特异性多糖是位于细菌最外侧的结构,是细菌逃避宿主免疫攻击的保护层,也是宿主免疫细胞俘获细菌的靶点,它决定了细菌的抗原特性,反映了细菌的血清型别;核心多糖是连接特异性多糖和脂类A的部分;脂质A是脂多糖的致热源部分。由于特异性多糖部分决定着细菌的血清型别,在结构上具有型特异性,是细菌诊断、病原菌预防和传染病治疗的主要抗原成分。文献记载的特异性多糖制备方法是先制备脂多糖,再将脂多糖水解后,使用超速离心法离心,经透析后冻干获得特异性多糖。但是超速离心法需要使用的设备成本高昂,且不适合大规模生产;而常规的透析方法需要数天甚至数十天的操 ...
【技术保护点】
1.一种痢疾杆菌特异性多糖纯化方法,包括以下步骤:/n(1)取痢疾杆菌菌体水解液或痢疾脂多糖水解液,超滤浓缩,/n(2)层析分离,/n(3)超滤除盐,/n(4)冻干获得特异性多糖。/n
【技术特征摘要】
1.一种痢疾杆菌特异性多糖纯化方法,包括以下步骤:
(1)取痢疾杆菌菌体水解液或痢疾脂多糖水解液,超滤浓缩,
(2)层析分离,
(3)超滤除盐,
(4)冻干获得特异性多糖。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,
其中,水解液可以是痢疾杆菌菌体水解液经过一定操作步骤处理(如离心、过滤等)后的液体或痢疾脂多糖水解液。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,
其中,步骤1和步骤3,超滤膜包的材质选自:纤维素衍生物、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物中的一种或两种以上混合。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,
其中,步骤1,超滤浓缩,将水解液使用超滤膜包超滤,可使用缓冲溶液或非缓冲溶液系统,最佳采用缓冲溶液系统,缓冲溶液系统可采用磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等缓冲系统,最佳为磷酸缓冲系统,浓度为0.001~2.0mol/L。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,
步骤2,层析分离,包括凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析、亲和层析等层析方法,最佳为阴离子交换层析方法。
6.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡国伟,朱卫华,林彦彬,王瑞峰,杜琳,
申请(专利权)人:北京智飞绿竹生物制药有限公司,重庆智飞生物制品股份有限公司,安徽智飞龙科马生物制药有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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