组织偏好性启动子和使用方法技术

提供了用于调节植物中异源核苷酸序列表达的组合物和方法。组合物包括与形态发生基因可操作地连接的组织偏好性启动子。还提供了使用本文公开的与形态发生基因可操作地连接的启动子序列在植物中表达异源核苷酸序列的方法。还提供了DNA构建体，所述DNA构建体包含与形态发生基因可操作地连接的启动子，并且还包含目的异源核苷酸序列。

Organizational preference promoter and its usage

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】组织偏好性启动子和使用方法
本公开涉及植物分子生物学领域，更具体地，涉及植物中基因表达的调节。相关申请的交叉引用本申请要求2017年9月25日提交的美国临时申请号62/562,663的优先权，该临时申请通过引用以其全文结合在此。以电子方式提交的序列表的引用所述序列表的官方副本经由EFS-Web作为ASCII格式的序列表以电子方式提交，文件名为20180829_7453WOPCT_ST25，创建于2018年8月29日，且具有995,556字节大小，并与本说明书同时提交。包含在所述ASCII格式的文件中的序列表是本说明书的一部分并且通过引用以其全文结合在此。
技术介绍
异源DNA序列在植物宿主中的表达依赖于该植物宿主中存在可操作地连接的启动子，包括有功能的启动子。启动子序列的选择将决定生物内异源DNA序列何时与在何处进行表达。如果期望在特定的组织或器官中表达，则可使用组织偏好性启动子。如果期望基因响应刺激而表达，则诱导型启动子是首选调控元件。相比之下，如果期望在植物各细胞中连续表达，则采用组成型启动子。可以在转化载体的表达构建体中包含来自核心启动子序列的上游和/或下游的附加调节序列，以便引起异源核苷酸序列在转基因植物中以不同水平表达。经常，期望的是在植物的特定组织或器官中表达DNA序列。例如，使用与促进细胞增殖的形态发生基因可操作地连接的组织偏好性启动子可用于在转化过程中有效恢复转基因事件。此类组织偏好性启动子也可用于在所需植物组织中表达性状基因和/或病原体抗性蛋白，以增强植物产量和对病原体的抗性。可替代地，可能需要抑制植物组织内天然DNA序列的表达以实现所需的表型。在这种情况下，可采用下述方式实现这种抑制：转化植物，使植物包含可操作地连接至反义核苷酸序列的组织偏好性启动子，使得反义序列的表达产生干扰天然DNA序列的mRNA翻译的RNA转录物。另外地，可能希望在处于特定生长或发育阶段(诸如像细胞分裂或伸长)的植物组织中表达DNA序列。这样的DNA序列可用于促进或抑制植物生长过程，从而影响植物的生长速率或结构。因此，需要分离和表征组织偏好性启动子，特别是可以用作生长刺激基因(包括形态发生基因)的受控表达的调控元件的启动子，所述启动子可在农杆菌介导的转化后立即提供这些基因的强烈表达，以刺激体外生长和形态发生，所述表达然后减少并在异位过度表达会导致异常生长和发育的植物组织中实际上“关闭”。
技术实现思路
提供了用于调节植物中基因表达的组合物和方法。更特别地，本公开的启动子赋予在植物组织的表皮L1(外层)中的组织偏好性表达。本公开的某些方面包括核酸分子，所述核酸分子包含形态发生基因盒，该基因盒包含组织偏好性启动子，所述启动子具有选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的片段或变体，其中所述核苷酸序列的片段或变体在植物细胞中起始转录；以及SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的至少100个连续核苷酸，其中所述核苷酸序列的至少100个连续核苷酸在植物细胞中起始转录；其中所述组织偏好性启动子可操作地连接至形态发生基因。还包括表达盒，其包含形态发生基因盒。还包括包含表达盒的载体，所述表达盒包含形态发生基因盒。此外，提供了包含表达盒的植物细胞和植物，所述表达盒包含形态发生基因盒，所述形态发生基因盒包含组织偏好性启动子，所述启动子具有选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的片段或变体，其中所述核苷酸序列的片段或变体在植物细胞中起始转录；以及SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的至少100个连续核苷酸，其中所述核苷酸序列的至少100个连续核苷酸在植物细胞中起始转录；其中所述组织偏好性启动子可操作地连接至形态发生基因。包含含有形态发生基因盒的表达盒的植物细胞和植物包括单子叶植物、双子叶植物和裸子植物。提供了包含含有形态发生基因盒的表达盒的植物细胞和植物，所述植物细胞和植物包括单子叶植物、双子叶植物和裸子植物，包括但不限于玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、竹子、黑小麦属、甜瓜和芸苔属。本公开还提供了包含表达盒的植物细胞或植物，所述表达盒包含形态发生基因盒，其中所述形态发生基因盒的形态发生基因编码WUS/WOX同源盒多肽，其中所述WUS/WOX同源盒多肽包含以下氨基酸序列：SEQIDNO：61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何；或其中所述WUS/WOX同源盒多肽由以下核苷酸序列编码：SEQIDNO：60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。还提供了包含表达盒的植物细胞或植物，所述表达盒包含形态发生基因盒，其中所述形态发生基因盒的形态发生基因编码参与以下的基因产物：植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生起始、加速体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育或其组合。本公本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸分子，所述核酸分子包含形态发生基因盒，所述形态发生基因盒包含组织偏好性启动子，所述组织偏好性启动子具有选自下组的核苷酸序列，该组由以下组成：/n(a)SEQ ID NO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；/n(b)与SEQ ID NO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；/n(c)与SEQ ID NO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；/n(d)SEQ ID NO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的片段或变体，其中所述核苷酸序列的片段或变体在植物细胞中起始转录；或者/n(e)SEQ ID NO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的至少100个连续核苷酸，其中所述核苷酸序列的至少100个连续核苷酸在植物细胞中起始转录；/n其中(a)-(e)的组织偏好性启动子可操作地连接至形态发生基因。/n...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170925 US 62/5626631.一种核酸分子，所述核酸分子包含形态发生基因盒，所述形态发生基因盒包含组织偏好性启动子，所述组织偏好性启动子具有选自下组的核苷酸序列，该组由以下组成：
(a)SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；
(b)与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；
(c)与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录；
(d)SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的片段或变体，其中所述核苷酸序列的片段或变体在植物细胞中起始转录；或者
(e)SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的至少100个连续核苷酸，其中所述核苷酸序列的至少100个连续核苷酸在植物细胞中起始转录；
其中(a)-(e)的组织偏好性启动子可操作地连接至形态发生基因。


2.一种表达盒，所述表达盒包含如权利要求1所述的形态发生基因盒。


3.一种载体，所述载体包含如权利要求2所述的表达盒。


4.一种植物细胞，所述植物细胞包含如权利要求2所述的表达盒。


5.如权利要求4所述的植物细胞，其中所述植物细胞来自单子叶植物、双子叶植物或裸子植物。


6.如权利要求5所述的植物细胞，其中所述单子叶植物、所述双子叶植物和所述裸子植物选自由以下组成的组：玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属(Eucalyptus)、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属(Capsicum)、竹子、黑小麦属(Triticale)、甜瓜或芸苔属(Brassica)。


7.如权利要求4所述的植物细胞，其中所述形态发生基因编码WUS/WOX同源盒多肽，
其中所述WUS/WOX同源盒多肽包含以下氨基酸序列：SEQIDNO：61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何；或其中所述WUS/WOX同源盒多肽由以下核苷酸序列编码：SEQIDNO：60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。


8.如权利要求4所述的植物细胞，其中所述形态发生基因编码参与以下的基因产物：植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生的起始、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或其组合。


9.如权利要求4所述的植物细胞，其中所述表达盒还包含性状基因盒，所述性状基因盒包含异源多核苷酸，所述异源多核苷酸编码基因产物，所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(NUE)、疾病抗性或改变代谢途径的能力。


10.如权利要求9所述的植物细胞，其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒，所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列，该组由以下组成：FLP、FLPe、KD、Cre、SSV1、λInt、phiC31Int、HK022、R、B2、B3、Gin、Tn1721、CinH、ParA、Tn5053、Bxb1、TP907-1或U153，其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。


11.如权利要求10所述的植物细胞，其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组：UBI，LLDAV，EVCV，DMMV，BSV(AY)PRO，CYMVPROFL，UBIZMPRO，SI-UB3PRO，SB-UBIPRO(ALT1)，USB1ZMPRO，ZM-GOS2PRO，ZM-H1BPRO(1.2KB)，IN2-2，NOS，35S的-135形式，ZM-ADFPRO(ALT2)，AXIG1，DR5，XVE，GLB1，OLE，LTP2，HSP17.7，HSP26，HSP18A，AT-HSP811，AT-HSP811L，GM-HSP173B，四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子，PLTP，PLTP1，PLTP2，PLTP3，SDR，LGL，LEA-14A或LEA-D34。


12.如权利要求11所述的植物细胞，其中所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒在所述植物细胞中瞬时表达，并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物细胞的基因组中。


13.如权利要求11所述的植物细胞，其中从所述植物细胞切离所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒，并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物细胞的基因组中。


14.一种植物，所述植物包含如权利要求2所述的表达盒。


15.如权利要求14所述的植物，其中所述植物是单子叶植物、双子叶植物或裸子植物。


16.如权利要求15所述的植物，其中所述单子叶植物、所述双子叶植物和所述裸子植物选自由以下组成的组：玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、竹子、黑小麦属、甜瓜或芸苔属。


17.如权利要求14所述的植物，其中所述形态发生基因编码WUS/WOX同源盒多肽，
其中所述WUS/WOX同源盒多肽包含以下氨基酸序列：SEQIDNO：61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何；或其中所述WUS/WOX同源盒多肽由以下核苷酸序列编码：SEQIDNO：60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。


18.如权利要求14所述的植物，其中所述形态发生基因编码参与以下的基因产物：植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或其组合。


19.如权利要求14所述的植物，其中所述表达盒还包含性状基因盒，所述性状基因盒包含异源多核苷酸，所述异源多核苷酸编码基因产物，所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(NUE)、疾病抗性或改变代谢途径的能力。


20.如权利要求19所述的植物，其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒，所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列，该组由以下组成：FLP、FLPe、KD、Cre、SSV1、λInt、phiC31Int、HK022、R、B2、B3、Gin、Tn1721、CinH、ParA、Tn5053、Bxb1、TP907-1或U153，其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。


21.如权利要求20所述的植物，其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组：UBI，LLDAV，EVCV，DMMV，BSV(AY)PRO，CYMVPROFL，UBIZMPRO，SI-UB3PRO，SB-UBIPRO(ALT1)，USBlZMPRO，ZM-GOS2PRO，ZM-H1BPRO(1.2KB)，IN2-2，NOS，35S的-135形式，ZM-ADFPRO(ALT2)，AXIG1，DR5，XVE，GLB1，OLE，LTP2，HSP17.7，HSP26，HSP18A，AT-HSP811，AT-HSP811L，GM-HSP173B，四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子，PLTP，PLTP1，PLTP2，PLTP3，SDR，LGL，LEA-14A或LEA-D34。


22.如权利要求21所述的植物，其中所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒在所述植物中瞬时表达，并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物的基因组中。


23.如权利要求22所述的植物的种子，其中所述种子包含所述表达盒的所述性状基因盒。


24.如权利要求21所述的植物，其中从所述植物切离所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒，并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物的基因组中。


25.如权利要求24所述的植物的种子，其中所述种子包含所述表达盒的所述性状基因盒。


26.一种表达盒，所述表达盒包含重组多核苷酸，所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的至少100个连续核苷酸：SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中所述能够起始转录的核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。


27.一种表达盒，所述表达盒包含重组多核苷酸，所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的功能片段或变体，其中所述功能片段或变体衍生自选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中能够起始转录的所述功能片段或变体可操作地连接至形态发生基因。


28.一种表达盒，所述表达盒包含重组多核苷酸，所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列与选自由以下组成的组的核苷酸序列具有至少70％同一性：SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中能够起始转录的所述核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。


29.一种表达盒，所述表达盒包含重组多核苷酸，所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列与选自由以下组成的组的核苷酸序列具有至少95％同一性：SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中能够起始转录的所述核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。


30.一种表达盒，所述表达盒包含重组多核苷酸，所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列选自由以下组成的组：SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中能够起始转录的所述核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。


31.一种生产转基因植物的方法，所述方法包括：
用重组表达盒转化植物细胞，所述重组表达盒包含(a)组织偏好性启动子盒，其中所述组织偏好性启动子盒包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：
(i)SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；
(ii)与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；
(iii)与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；
(iv)作为SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的片段或变体的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；或者
(v)作为SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的至少100-bp片段的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录，其中(i)-(v)的核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因以及(b)性状基因盒，所述性状基因盒包含目的异源多核苷酸，所述目的异源多核苷酸编码基因产物，所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(NUE)、疾病抗性或改变代谢途径的能力；
选择具有所述重组表达盒的转基因植物细胞；并且
从所述转基因植物细胞再生所述转基因植物。


32.如权利要求31所述的方法，其中所述植物细胞是单子叶植物、双子叶植物或裸子植物。


33.如权利要求32所述的方法，其中所述单子叶植物、所述双子叶植物和所述裸子植物选自由以下组成的组：玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、竹子、黑小麦属、甜瓜或芸苔属。


34.如权利要求31所述的方法，其中所述形态发生基因编码WUS/WOX同源盒多肽，
其中所述WUS/WOX同源盒多肽包含以下氨基酸序列：SEQIDNO：61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何；或其中所述WUS/WOX同源盒多肽由以下核苷酸序列编码：SEQIDNO：60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。


35.如权利要求31所述的方法，其中所述形态发生基因编码参与以下的基因产物：植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或组合。


36.如权利要求31所述的方法，其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒，所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列，该组由以下组成：FLP、FLPe、KD、Cre、SSV1、λInt、phiC31Int、HK022、R、B2、B3、Gin、Tn1721、CinH、ParA、Tn5053、Bxb1、TP907-1或U153，其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。


37.如权利要求36所述的方法，其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组：UBI，LLDAV，EVCV，DMMV，BSV(AY)PRO，CYMVPROFL，UBIZMPRO，SI-UB3PRO，SB-UBIPRO(ALT1)，USB1ZMPRO，ZM-GOS2PRO，ZM-H1BPRO(1.2KB)，IN2-2，NOS，35S的-135形式，ZM-ADFPRO(ALT2)，AXIG1，DR5，XVE，GLB1，OLE，LTP2，HSP17.7，HSP26，HSP18A，AT-HSP811，AT-HSP811L，GM-HSP173B，四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子，PLTP，PLTP1，PLTP2，PLTP3，SDR，LGL，LEA-14A或LEA-D34。


38.如权利要求37所述的方法，其还包括从所述重组表达盒中切离所述组织偏好性启动子盒和所述位点特异性重组酶盒。


39.通过如权利要求38所述的方法产生的转基因植物。


40.如权利要求39所述的转基因植物的种子，其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。


41.如权利要求31所述的方法，其中所述组织偏好性启动子盒包含第一T-DNA，并且所述性状基因盒包含第二T-DNA。


42.如权利要求41所述的方法，其中所述第一T-DNA和所述第二T-DNA位于用于转化所述植物细胞的相同细菌菌株中。


43.如权利要求42所述的方法，其还包括使所述第一T-DNA与所述第二T-DNA分离。


44.通过如权利要求43所述的方法产生的转基因植物。


45.如权利要求44所述的转基因植物的种子，其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。


46.如权利要求41所述的方法，其中所述第一T-DNA位于第一细菌菌株中，并且所述第二T-DNA位于第二细菌菌株中，并且所述第一细菌菌株和所述第二细菌菌株以一定比例混合用于转化所述植物细胞。


47.如权利要求46所述的方法，其还包括使所述第一T-DNA与所述第二T-DNA分离。


48.通过如权利要求47所述的方法产生的转基因植物。


49.如权利要求48所述的转基因植物的种子，其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。


50.一种改善体细胞胚成熟效率的方法，所述方法包括：
用重组表达盒转化植物细胞，所述重组表达盒包含(a)组织偏好性启动子盒，其中所述组织偏好性启动子盒包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：
(i)SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；
(ii)与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；
(iii)与SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；
(iv)作为SEQIDNO：1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的片段或变体的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录；
(v)作为SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：A达西尔瓦孔塞桑，AM芬奇，WJ戈顿卡姆，TM克莱因，KS洛，
申请(专利权)人：先锋国际良种公司，
类型：发明
国别省市：美国;US