一种检测鱼虾中的孔雀石绿的ELISA试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种测定水产品及水样中孔雀石绿(MG)的间接竞争酶联免疫吸附分析法。对孔雀石绿分子进行修饰，使其与载体蛋白交联，得到免疫原和包被抗原，经过多次免疫动物制得抗孔雀石绿的多克隆抗体。在优化的实验条件下，IC

An ELISA kit for detection of malachite green in fish and shrimp

【技术实现步骤摘要】
一种检测鱼虾中的孔雀石绿的ELISA试剂盒
孔雀石绿(MG)是一种三苯甲烷类工业染料，常用于制陶、纺织、皮革、食品颜色剂和细胞化学染色剂等⋯。也可用作驱虫剂、杀虫剂、防腐剂，是药用染料中抗菌效力较强的一类，用于预防与治疗各类水产动物的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病等。近年来发现孔雀石绿(MG)特别是其代谢产物无色孔雀石绿(LMG)在水产动物体内有明显的蓄积残留现象，而其化学官能团三苯甲烷是一类致癌物质，食用经MG治疗的水产品后，免疫系统和繁殖系统受到较大的影响，具体地说是一种水产品中孔雀石绿含量的检测方法。
技术介绍
目前已发现可以致癌的化合物约有450余种，孔雀石绿，三苯甲烷类工业染料，是一种重要的化学致癌物，使用被其污染的水体，对人体健康有很大的威胁。测定食品及环境中孔雀石绿及其代谢物常用高效液相色谱法。采用二氧化铅衍生柱进行柱前或柱后氧化，将无色孔雀石绿氧化为孔雀石绿后进行检测，或者利用HPLC一荧光检测法直接检测鱼肉组织中的无色孔雀石绿。虽然这些方法的准确度较高，但仪器昂贵、样品预处理复杂、费时、检测成本高。为了确保动物食品安全，避免孔雀石绿本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水产品中孔雀石绿含量的检测方法，其特征是，包括以下步骤：/n(1)溶液的配制/na.包被液的配制：将碳酸钠、碳酸氢钠配制成pH7.0-8.0的溶液，低温保存；/nb.洗涤液的配制：将氯化钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾及吐温20配制成pH7-8的溶液，低温保存；/nc.终止液的配制：配制10-15％的浓硫酸；/nd.封闭液的配制：将氯化钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾、吐温20及牛血清白蛋白配制成pH7-8的溶液，低温保存；/ne.底物溶液的配制：将磷酸氢二钠、柠檬酸、H

【技术特征摘要】
1.一种水产品中孔雀石绿含量的检测方法，其特征是，包括以下步骤：
(1)溶液的配制
a.包被液的配制：将碳酸钠、碳酸氢钠配制成pH7.0-8.0的溶液，低温保存；
b.洗涤液的配制：将氯化钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾及吐温20配制成pH7-8的溶液，低温保存；
c.终止液的配制：配制10-15％的浓硫酸；
d.封闭液的配制：将氯化钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾、吐温20及牛血清白蛋白配制成pH7-8的溶液，低温保存；
e.底物溶液的配制：将磷酸氢二钠、柠檬酸、H2O2及四甲基联苯胺配制成溶液；
(2)抗体固定
将孔雀石绿多克隆抗体用包被液稀释，以每孔100μL加入酶标板中，同时设立正常血清稀释液的阳性对照，低温过夜保存；将孔中液体倒尽，加入洗涤液，保留3min，再倒尽，如此重复洗涤多次；每孔中添加100μL封闭液，37℃，保留1h；将孔中液体倒尽，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜霞，秦悦，张淑雅，
申请(专利权)人：镇江华维检测技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32