一种用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR定量检测的引物组合物、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR定量检测的引物组合物、试剂盒及其应用，属于分子生物学检测技术领域，所述引物组包括上游引物和下游引物；所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；本发明专利技术的引物组能够扩增出一条大小为87bp的特异性条带，用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫特异性定量检测，其灵敏度比普通PCR检测高100倍；本发明专利技术中用于拟禾本科根结线虫qPCR定量检测的引物组合物适用于用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR定量检测，具有高灵敏度，对待测样品要求较低等优势。

【技术实现步骤摘要】
一种用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR定量检测的引物组合物、试剂盒及其应用
本专利技术涉及分子生物学检测
，特别是涉及一种用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR定量检测的引物组合物、试剂盒及其应用。
技术介绍
植物寄生线虫是水稻生产上的重要病原物，其中危害最为严重的是拟禾本科根结线虫(Meloidogynegraminicola)。该线虫是水稻上重要的内寄生线虫，广泛分布于南亚、东南亚、非洲、美洲和欧洲等国家的水稻产区，引起水稻根结线虫病(RiceRoot-KnotDisease)，通常造成水稻减产11％至80％(Mantelinetal.，2017)，甚至达100％，严重影响水稻产业的稳定发展。近年来，随着国内耕作模式的改变，特别是直播水稻田面积的逐年增加，由拟禾本科根结线虫引起的水稻根结线虫病扩散蔓延迅速，危害越来越严重。2016年至2019年，我国的湖南、湖北、江西、江苏、海南、广西等多地水稻根结线虫病严重发生，引起水稻大面积减产。拟禾本科根结线虫寄主范围广，危害隐蔽，防治极其困难。目前常用的低毒杀线虫剂大多用于旱地作物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR检测的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括上游引物和下游引物；/n所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；/n所述下游引物的核苷酸序列如SEQID NO.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR检测的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括上游引物和下游引物；
所述上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；
所述下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


2.一种用于稻田土壤中拟禾本科根结线虫qPCR检测的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物组合物及SYBRPremixExTaq。


3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照品和阴性对照品。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照品包括拟禾本科根结线虫基因组DNA；所述阴性对照品包括灭菌ddH2O。


5.一种权利要求2-3任一项所述的试剂盒在检测寄主根围土壤中拟禾本科根结线虫中的应用。


6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述应用方法，包括以下步骤：
(1)提取待检样品的土壤DNA；
(2)以待检样品的土壤DNA为模板，利用所述试剂盒进行qPCR扩增反应，收集荧光数据；
(3)分析所述荧光数据...

【专利技术属性】
技术研发人员：成飞雪，王东伟，刘勇，张德咏，王剑，何清聪，唐蓓，
申请(专利权)人：湖南省植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：湖南;43