类器官培养用细胞培养基、培养方法及类器官技术

类器官培养用细胞培养基包含选自胰岛素样生长因子1(Insulin‑like growth factor 1，IGF1)、成纤维细胞生长因子2(Fibroblast growth factor 2，FGF2)、及表皮调节素(Epiregulin，EREG)的至少2种以及选自下述i)～iii)的成分中的至少1种：i)Wnt激动剂、ii)骨形态发生蛋白(bone morphogeneitc protein，BMP)抑制剂、iii)转化生长因子‑β(transforming growth factor‑β，TGF‑β)抑制剂。

Cell culture medium, culture method and organoid for organoid culture

【技术实现步骤摘要】
类器官培养用细胞培养基、培养方法及类器官本申请是申请日为2017年5月10日、申请号为201780038054.9、专利技术名称为“类器官培养用细胞培养基、培养方法及类器官”的专利技术申请的分案申请。
本专利技术涉及类器官培养用细胞培养基、培养方法及类器官。本申请提出基于2016年5月18日向日本提出申请的日本专利特愿2016-099995的优先权请求，将其内容引用于本申请。
技术介绍
肠道是人体中与外界接触的面积最大的脏器，具有消化吸收等维持生命必不可少的功能。肠道功能的大部分由覆盖其内层的肠道上皮负责。肠道上皮由绒毛和隐窝这2个区域构成，所述绒毛由3系的分化细胞(粘液细胞、吸收上皮细胞、内分泌细胞)形成，所述隐窝主要由未分化增殖细胞形成。在小肠肠腺，肠腺底部存在产生抗菌肽的潘氏(Paneth)细胞。最近，通过分子遗传学的细胞谱系分析，发现夹于潘氏细胞之间的Lgr5阳性细胞(也称为“CBC(隐窝基底柱状，Cryptbasecolumnar)细胞”)为肠道上皮干细胞。Lgr5阳性肠道上皮干细胞产生被称为短暂扩增细胞(Transi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种类器官培养方法，其特征在于，具备：/n制备细胞外基质的细胞外基质制备工序；/n使上皮干细胞、上皮细胞、上皮肿瘤细胞、或包含这些细胞中的至少任1种的组织粘接于所述细胞外基质上的粘接工序；/n在所述粘接工序之后，添加类器官培养用细胞培养基，在氧浓度15％～0.1％的低氧条件下，对所述上皮干细胞、所述上皮细胞、所述上皮肿瘤细胞、或所述包含这些细胞中的至少任1种的组织进行培养，形成类器官的类器官形成工序。/n

【技术特征摘要】
20160518 JP 2016-0999951.一种类器官培养方法，其特征在于，具备：
制备细胞外基质的细胞外基质制备工序；
使上皮干细胞、上皮细胞、上皮肿瘤细胞、或包含这些细胞中的至少任1种的组织粘接于所述细胞外基质上的粘接工序；
在所述粘接工序之后，添加类器官培养用细胞培养基，在氧浓度15％～0.1％的低氧条件下，对所述上皮干细胞、所述上皮细胞、所述上皮肿瘤细胞、或所述包含这些细胞中的至少任1种的组织进行培养，形成类器官的类器官形成工序。


2.根据权利要求1所述的类器官培养方法，其中，所述类器官培养用细胞培养基包含选自Wnt激动剂、、骨形态发生蛋白(bonemorphogeneticprotein，BMP)抑制剂、转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β，TGF-β)抑制剂、及p38抑制剂的至少1种。


3.根据权利要求1所述的类器官培养方法，其中，所述类器官培养用细胞培养基包含选自胰岛素样生长因子1(Insulin-likegrowthfactor1，IGF1)、成纤维细胞生长因子2(Fibroblastgrowthfactor2，FGF2)、及表皮调节素(Epiregulin，EREG)的至少2种以及选自下述i)～iii)的成分中的至少1种：
i)Wnt激动剂、
ii)BMP抑制剂、
iii)TGF-β抑制剂。


4.根据权利要求3所述的类器官培养方法，其中，实质上不含EGF及p38抑制剂。


5.根据权利要求4所述的类器官培养方法，其中，包含IGF1及FGF2。


6.根据权利要求2～4中的任一项所述的类器官培养方法，其中，所述Wnt激动剂是选自Wnt蛋白、R-海绵硬蛋白、及GSK-3β抑制剂的至少1种。


7.根据权利要求6所述的类器官培养方法，其中，所述Wnt蛋白与其稳定化物质阿法敏形成复合物。


8.根据权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员：佐藤俊朗，股野麻未，
申请(专利权)人：学校法人庆应义塾，
类型：发明
国别省市：日本;JP