一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系及其建立方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系及其建立方法和应用，通过无血清培养基和微载体筛选，获得适合肝癌细胞系Huh‑7规模化无血清贴壁培养条件，通过驯化培养建立适合规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系。本发明专利技术建立的细胞系可用于疫苗等生物制品的无血清制备。

A hepatoma cell line adapted to large-scale serum-free adherent culture and its establishment and Application

【技术实现步骤摘要】
一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系及其建立方法和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系及其建立方法和应用。
技术介绍
随着生物医药技术的快速发展，细胞培养技术广泛应用于生物制品领域。细胞培养技术中使用的培养基既是供给细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。培养基按其来源分为天然培养基和合成培养基，其中天然培养基最常用的是牛血清。血清中含有细胞生长因子、促贴附因子等多种细胞生长所必需的多活性物质。目前使用最普遍的培养基是添加了牛血清的M199、DMEM、MEM等合成的基础培养基。但由于血清成分复杂和存在生物风险等因素，无血清培养已成为生物制品生产的趋势。另外，现行的生产工艺中还存在产量低、纯化困难等问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：针对现有技术中存在的不足，提供一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系及其建立方法和应用。本专利技术采用的技术方案如下：一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系的建立方法，包括本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系的建立方法，其特征在于，包括：/n复苏Huh-7细胞并用含8-12％FBS的DMEM培养基进行培养；待细胞长满后，用胰酶消化传代，再用含3-7％FBS的DMEM培养基培养；待细胞长满后，继续用胰酶消化传代，再用含1-2％FBS的DMEM培养基培养；待细胞长满后，继续用胰酶消化传代，最后用CDBHK-21无血清培养基培养即得或用CDBHK-21无血清培养基重悬后加入Cytodex1微载体培养即得。/n

【技术特征摘要】
1.一种适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系的建立方法，其特征在于，包括：
复苏Huh-7细胞并用含8-12％FBS的DMEM培养基进行培养；待细胞长满后，用胰酶消化传代，再用含3-7％FBS的DMEM培养基培养；待细胞长满后，继续用胰酶消化传代，再用含1-2％FBS的DMEM培养基培养；待细胞长满后，继续用胰酶消化传代，最后用CDBHK-21无血清培养基培养即得或用CDBHK-21无血清培养基重悬后加入Cytodex1微载体培养即得。


2.根据权利要求1所述的适应规模化无血清贴壁培养的肝癌细胞系的建立方法，其特征在于，包括：
复苏Huh-7细胞并用含10％FBS的DMEM培养基进行培养；待细胞长满后，用胰酶消化传代，再用含5％FBS的DMEM培养基培养；待细胞长满后，继续用胰酶消化传代，再用含2％FBS的DMEM培养基培养；待细胞长满后，继续用胰酶消化传代，最后用CDBHK-21无...

【专利技术属性】
技术研发人员：程平，魏于全，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川;51