【技术实现步骤摘要】
一种铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶及其制备方法和用途
本专利技术属于纳米技术和催化材料领域，具体涉及一种具有过氧化物酶活性的铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶，其制备方法、使用方法和用途。所述铁取代钨磷酸盐聚多巴胺纳米模拟酶为一种纳米结构复合材料。更具体地，本专利技术提供利用铁取代钨磷酸盐聚多巴胺纳米模拟酶的过氧化氢、谷胱甘肽和大肠杆菌O157：H7的检测方法。
技术介绍
自然界所有生命现象都与酶有关，酶是一种具有催化功能的生物分子，以蛋白质为主。天然酶催化效率高，底物专一，在生物化学中发挥了重要的作用，已被广泛研究。辣根过氧化物酶(HRP)作为一种重要的天然酶，可以结合抗体催化底物显色用于酶联免疫分析。酶联免疫分析方法简单快速，被广泛应用于食品、药品与临床分析。但是，HRP的制备、储存比较耗时，价格昂贵，存在易变性失活等缺点。因此，人工模拟过氧化物酶的研究受到广泛的关注。纳米模拟酶是一类既有纳米材料的独特性能，又有催化功能的模拟酶，是继环糊精、冠醚、卟啉、有机金属配合物模拟酶的新一代人工合成模拟酶。相对于天...
【技术保护点】
1.一种铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶，其特征在于：结构式为K
【技术特征摘要】
1.一种铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶，其特征在于：结构式为K10P2W18Fe4(H2O)2O68@PDA。
2.根据权利要求1所述的模拟酶，其特征在于所述的制备方法包括以下步骤：
1)制备前体物Na8[HPW9O34]
分别称取二水钨酸钠120g溶于150mL80～100℃的水中，在搅拌状态下向其中加入浓磷酸3mL，然后在剧烈搅拌状态下逐滴加入冰乙酸22mL，此操作在30min内完成，白色沉淀逐渐出现，然后过滤，将沉淀在250mL4mol/L的NaCl溶液中搅拌洗涤后再次过滤后，高温干燥得到所需物质Na8[HPW9O34]；
2)制备K10P2W18Fe4(H2O)2O68
将氯化铁或硝酸铁1.5mmol溶解于10-20mL水中,向此溶液加入0.75mmol的固体Na8[HPW9O34]，搅拌，将两者混合加热至均相，趁热过滤沉淀，向滤液中加入固体氯化钾(3-10g)，生成棕色沉淀，待滤液冷却至室温，沉淀用玻璃砂漏斗过滤，真空干燥，用5-10mL热去离子水溶解重新结晶，放置于4℃冰箱，1-2天得纯产物K10P2W18Fe4(H2O)2O68，真空干燥；
3)制备铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶
将1～4mMK10P2W18Fe4(H2O)2O68与0.1～0.8mM盐酸多巴胺在室温下混合搅拌溶解至澄清溶液后，调整溶液的pH值3～6，继续搅拌混匀1～3小时，溶液变为黑色，将黑色溶液转移至反应釜中，置入鼓风干燥箱120～180℃中反应，冷却至室温，得到铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶溶液；
4)铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶的纯化
将步骤3)制得的铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶溶液，在每分钟10000～15000转的转速下离心分离0.5～1h，弃去离心分离后的上清液，加入与上清液等体积的去离子水，分散均匀，再次离心，再次洗涤，三次后制得铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶的黑色产物，60℃烘箱烘干。
3.根据权利要求1所述的铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶，其特征在于：能催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐或邻苯二胺显色，具有过氧化物酶活性。
4.铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶在检测过氧化氢中的应用。
5.铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶在检测谷胱甘肽中的应用。
6.铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶在检测大肠杆菌O157:H7中的应用。
7.根据权利要求4所述铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶在检测过氧化氢中的应用，其特征在于：检测方法是以铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶的溶液为催化剂使邻苯二胺(OPD)和过氧化氢水溶液反应，产生有色物质，测定生成的有色物质，以确定过氧化氢的含量；
所述铁取代钨磷多酸聚多巴胺纳米模拟酶溶液的浓度为0.001mg/mL～2mg/mL,荧光检测优选浓度为0.125mg/mL，比色检测优选浓度为0.5mg/mL；
所述邻苯二胺(OPD)的浓度为0.44mM～1mM，优选为1.8mM；
所述反应是在pH值为3～8，比色检测优选为4，荧光检测优选为6；
所述反应是在10～60分钟，优选为10分钟的条件下进行；
缓冲液的种类为磷酸缓冲液，...
【专利技术属性】
技术研发人员：齐燕飞，邹杭锦，张博玉，张扬，张楚晗，张新明，盛蓉田，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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