一种提高磷脂酶C稳定性的方法技术

本发明专利技术提供了一种磷脂酶C组合物。本发明专利技术提供的组合物中包含磷脂酶C酶液和Fe

A method to improve the stability of phospholipase C

【技术实现步骤摘要】
一种提高磷脂酶C稳定性的方法
本专利技术涉及酶制剂，具体涉及一种提高磷脂酶C稳定性的方法。
技术介绍
磷脂酶C(phospholipaseC，简称PLC)是一类可催化水解磷脂C3的磷脂酰键的水解酶，在药品生产、油脂精炼、食品加工、磷脂改性等领域有着广泛应用。在磷脂酶C的纯化过程中，由于磷脂酶C是生物活性物质，需要尽量缩短生产时间，并且全程保持低温，以保证磷脂酶C的稳定性，并且在成品制备中，必须加入常规多羟基物质如甘油、山梨醇等作为保护剂，延长货架期，否则容易变浑，然后沉淀失活，但是一旦加入保护剂后，应用范围变窄，比如磷脂酶C的进一步固定化应用会存在很大影响，一方面因为甘油等多羟基成分极性较强，残留在固定化磷脂酶C中会吸附极性成分，加速酶的失活，另一面保护剂会干扰载体对磷脂酶C的吸附效率。因此，本行业急需一种不使用保护剂而能让磷脂酶C稳定的方法，以利于磷脂酶C的生产以及进一步的下游应用开发。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种磷脂酶C组合物。本专利技术提供的组合物中包含磷脂酶C酶液和Fe2+。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Fe2+浓度为25-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Fe2+浓度为为60-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Fe2+源自亚铁离子盐。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，亚铁离子盐为亚铁离子无机盐或亚铁离子有机盐。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，亚铁离子盐为FeCl2、FeSO4、醋酸亚铁、和/或富马酸亚铁。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中还包含Cu2+，和/或Zn2+。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中包含Cu2+，Fe2+,Zn2+。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Cu2+浓度为25-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Cu2+浓度为60-120mg/L在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Zn2+浓度为25-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Zn2+浓度为60-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中不含有多羟基物质保护剂，所述多羟基物质保护剂为甘油和山梨醇。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中还包含防腐剂和/或缓冲液。在本专利技术的一个或多个具体实施方案中，所述防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钙中的一种或多种。在本专利技术的一个或多个具体实施方案中，所述缓冲液为醋酸钠缓冲液。在本专利技术的一个或多个具体实施方案中，所述磷脂酶C为来源于蜡样芽胞杆菌的磷脂酶C。本专利技术还提供了上述组合物用于脱胶的用途或制备固定化磷脂酶C的用途。在本专利技术的一个或多个具体实施方案中，所述脱胶为油脂脱胶。本专利技术还提供了一种提高磷脂酶C稳定性的方法。本专利技术提供的方法包括在磷脂酶C酶液中加入Fe2+。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Fe2+浓度为25-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Fe2+浓度为为60-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中还包含Cu2+，和/或Zn2+。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中包含Cu2+，Fe2+,Zn2+。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Cu2+浓度为25-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Cu2+浓度为60-120mg/L在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Cu2+源自铜离子盐。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，铜离子盐为铜离子无机盐或铜离子有机盐。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，铜离子盐为CuCl2、CuSO4、醋酸铜、和/或异丁酸铜。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Zn2+浓度为25-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Zn2+浓度为60-120mg/L。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述Zn2+源自锌离子盐。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述锌离子盐为锌离子无机盐或锌离子有机盐。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，锌离子盐为ZnCl2、ZnSO4、异辛酸锌、和/或葡萄糖酸锌。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中不含有多羟基物质保护剂，所述多羟基物质保护剂为甘油和山梨醇。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述方法还包括于常温或低温保藏所述磷脂酶C溶液。在本专利技术的一个或多个优选实施方案中，所述磷脂酶C酶液中还包含防腐剂和/或缓冲液。在本专利技术的一个或多个具体实施方案中，所述防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钙中的一种或多种。在本专利技术的一个或多个具体实施方案中，所述缓冲液为醋酸钠缓冲液。在本专利技术的一个或多个具体实施方案中，所述磷脂酶C为来源于蜡样芽胞杆菌的磷脂酶C。使用本专利技术的方法能够在没有多羟基物质保护剂的情况下，使得磷脂酶C保持长时间的稳定，有利于下游的进一步开发应用，例如固定化和/或脱胶。本专利技术的磷脂酶C组合物能够在没有多羟基物质保护剂的情况下，保持长时间的稳定，有利于下游的进一步开发应用，例如固定化和/或脱胶。具体实施方式本文所公开的“范围”以下限和上限的形式。可以分别为一个或多个下限，和一个或多个上限。给定范围是通过选定一个下限和一个上限进行限定的。选定的下限和上限限定了特别范围的边界。所有可以这种方式进行限定的范围是包含和可组合的，即任何下限可以与任何上限组合形成一个范围。例如，针对特定参数列出了60-120和80-110的范围，理解为60-110和80-120的范围也是预料到的。此外，如果列出的最小范围值1和2，和如果列出了最大范围值3，4和5，则下面的范围可全部预料到：1-3、1-4、1-5、2-3、2-4和2-5。在本专利技术中，除非有其他说明，组合物的各组分的含量范围以及其优选范围之间可以相互组合形成新的技术方案。在本专利技术中，除非有其他说明，“其组合”表示所述各元件的多组分混合物，例如两种、三种、四种以及直到最大可能的多组分混合物。在本专利技术中，除非有其他说明，所有“份”和百分数(％)都指重量百分数。在本专利技术中，除非有其他说明，所有组合物中各组分的百分数之和为100％。在本专利技术中，除非有其他说明，数值范围“a-b”表示a到b之间的任意实数组合的缩略表示，其中a和b都是实数。例如数值范围“0-5”表示本文中已经全部列出了“0-5”之间的全部实数，“0-5”只是这些数值组合的缩略表示。如果没有特别指出，本说明书所用的术语“一种”指“至少一种”。如果没有特别指出，本专利技术所述的百分数(包括重量百分数)的基准都是所述组合物的总重量。在本文中，除非另有说明，各组分的比例或者重量都指干重。在本专利技术中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有实施方式以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磷脂酶C组合物，其特征在于，所述组合物中包含磷脂酶C酶液和Fe

【技术特征摘要】
1.一种磷脂酶C组合物，其特征在于，所述组合物中包含磷脂酶C酶液和Fe2+。


2.一种提高磷脂酶C稳定性的方法，其特征在于，所述方法包括在磷脂酶C酶液中加入Fe2+。


3.如权利要求1所述的组合物或权利要求2所述的方法，其特征在于，所述磷脂酶C酶液中还包含Cu2+，和/或Zn2+，优选的，所述磷脂酶C酶液中包含Cu2+，Fe2+,Zn2+。


4.如权利要求1所述的组合物或权利要求2所述的方法，其特征在于，所述Fe2+浓度为25-120mg/L，优选为60-120mg/L；和/或，所述Fe2+源自亚铁离子盐，优选为亚铁离子无机盐或亚铁离子有机盐，更优选为FeCl2、FeSO4、醋酸亚铁、和/或富马酸亚铁。


5.如权利要求3所述的组合物或方法，其特征在于，所述Cu2+浓度为25-120mg/L，优选为60-120mg/L，所述Zn2+浓度为25-120mg/L，优选为60-120mg/L；和/或，
所述Cu2+源自铜离子盐，优选为铜离子无机盐或铜离子有机盐，更优选为CuC...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨倚铭，吴清杭，赵城阳，宛军，
申请(专利权)人：丰益上海生物技术研发中心有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31