一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法及VIGS沉默系统技术方案

本发明专利技术提供了一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法，采用VIGS沉默系统转染香蕉果实，VIGS沉默系统包括烟草脆裂病毒pTRV1和含有SEQ ID NO.1所示序列的烟草脆裂病毒pTRV2。本发明专利技术首次实现了香蕉果实淀粉降解相关基因VIGS沉默系统的构建，能够有效沉默香蕉果实淀粉降解相关基因。本发明专利技术还进一步明确了菌液浓度、辅助病毒载体和表达病毒载体的比例、培养温度、侵染时间等条件，为成功沉默基因掌控好每个技术环节，有效抑制香蕉果实总淀粉和直链淀粉含量降低以及果糖、葡萄糖、蔗糖等含量升高。本发明专利技术为香蕉果实淀粉降解相关基因的功能验证奠定了良好的基础，为控制香蕉或其他植物果实淀粉降解提供了研究思路和技术依据。

A method of inhibiting starch degradation in banana fruit and VIGS silencing system

【技术实现步骤摘要】
一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法及VIGS沉默系统
本专利技术属于分子生物学领域，特别涉及植物基因工程
，具体涉及一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法及VIGS沉默系统。
技术介绍
香蕉是热带、亚热带地区重要的经济作物，是仅次于柑橘的世界第二大水果。淀粉作为香蕉果实中的主要组成成分，又促使其被联合国粮农组织(FAO)认定为仅次于水稻、小麦、玉米之后的第四大粮食作物，是超过4亿人的口粮(Englbergeretal.,2006)。然而，随着香蕉产业的快速发展和人们生活水平的迅速提高，对香蕉果实品质的要求也越来越高。然而香蕉主栽品种多为三倍体，难以通过传统育种方式获得品质优良的新品种。当无性繁殖的香蕉栽培种缺少有利的自然变异时，转基因就成为了外源基因导入香蕉实现品质改良的有效手段。可是由于香蕉这种作物的特殊性以及香蕉遗传转化的难度，在香蕉中鉴定品质相关基因的功能并获得品质改良的香蕉果实需要3-5年甚至更长的时间。随着生物技术的快速发展，将现代生物技术运用于香蕉品质改良中，可以解决一些用常规方法难以解决的问题。病毒诱导的基因沉默(Virus-I本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法，其特征在于，采用VIGS沉默系统转染香蕉果实，其中，所述VIGS沉默系统包括辅助病毒载体和表达病毒载体，所述辅助病毒载体为烟草脆裂病毒pTRV1，所述表达病毒载体为含有目的基因DNA片段的烟草脆裂病毒pTRV2，所述目的基因DNA片段如序列表中SEQ ID NO.1所示序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种抑制香蕉果实淀粉降解的方法，其特征在于，采用VIGS沉默系统转染香蕉果实，其中，所述VIGS沉默系统包括辅助病毒载体和表达病毒载体，所述辅助病毒载体为烟草脆裂病毒pTRV1，所述表达病毒载体为含有目的基因DNA片段的烟草脆裂病毒pTRV2，所述目的基因DNA片段如序列表中SEQIDNO.1所示序列。


2.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述VIGS沉默系统中，辅助病毒载体和表达病毒载体的比例为1:(1-3)，优选为1:(2-3)。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，将香蕉果实浸没在含有权利要求1或2所述VIGS沉默系统的菌液中，采用真空渗透的方式侵染香蕉果实；
将侵染的果实放置于黑暗条件且相对湿度控制在70％-80％的智能培养箱中，放置一周，期间注意湿度及果实情况，之后检测淀粉含量变化。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，含有权利要求1或2所述VIGS沉默系统的菌液OD600浓度为0.4-1.2，优选为0.4-1；侵染天数为5-7天，优选为5天；侵染后香蕉果实培育温度为17-29℃，优选为20-26℃。


5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘菊华，金志强，李萌，徐碧玉，苗红霞，王卓，王静毅，贾彩红，张建斌，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：海南;46