用于治疗多药耐药性肿瘤的方法和组合物技术

本发明专利技术公开用于在对象中治疗多药耐药性（MDR）肿瘤的方法。该方法包含在化学治疗前、同时或其之后，对需要治疗的对象施用治疗有效量的抗支原体药剂和/或阻断支原体的膜蛋白P37与对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂。还公开了相关的药物组合物、试剂盒、用途。

Methods and compositions for the treatment of multidrug resistant tumors

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗多药耐药性肿瘤的方法和组合物
本专利技术涉及用于治疗多药耐药性肿瘤的方法和组合物。在一些方面，本专利技术涉及如本文所识别的用于在对象中治疗多药耐药性肿瘤（特别是支原体诱导的多药耐药性肿瘤）的抗支原体药剂/阻断剂的应用。
技术介绍
多药耐药性（MDR）是被暴露至几种在结构和机制上均无关的药物的癌细胞存活的主要因素。已知放射疗法和化学疗法本身会诱导癌细胞的MDR，而其他环境因素（包括生物学因素）在癌症的MDR中的作用仍未被阐明。支原体是广泛存在于上皮组织和体腔（例如，尿道、消化道和呼吸道）中的最微小的原核微生物。在许多种人类癌症（例如，肺癌、胃癌、结肠癌和肝细胞癌）中也已经检测到支原体，已知主要对肿瘤发生、上皮-间质转化、转移和侵袭有影响。最近的研究表明，支原体感染导致对癌症细胞中的核苷类似物有耐药性。然而，支原体是否影响肿瘤细胞对更大范围的细胞毒性损害的敏感性仍尚待探讨。专利技术概述在本专利技术的一方面，提供用于在对象中治疗多药耐药性（MDR）肿瘤的方法，其中该多药耐药性肿瘤对至少两类的化学治疗剂有耐药性，该方法包含在化学疗法之前、同时或在其之后向需要治疗的对象施用治疗有效量的抗支原体药剂和/或阻断在支原体的膜蛋白P37和该对象的宿主细胞的膜联蛋白A2（AnnexinA2）之间的相互作用的药剂。在另一方面，本专利技术提供用于在对象中治疗多药耐药性（MDR）肿瘤的药物组合物，其成单位剂型地包含：治疗有效量的抗支原体药剂和/或阻断在支原体的膜蛋白P37和该对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂，治疗有效量的化学治疗剂，和药学上可接受的载体；其中该化学治疗剂选自烷化剂、抗生素、抗代谢物、免疫治疗剂（immunotherapy）、激素或激素拮抗剂、紫杉烷、类维生素A、生物碱、抗血管生成剂、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、靶向信号转导抑制剂和生物反应调节剂。在另一方面，本专利技术提供用于在对象中治疗多药耐药性（MDR）肿瘤的药物试剂盒，其成分离剂型地包含：治疗有效量的抗支原体药剂和/或阻断支原体的膜蛋白P37与该对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂，以及治疗有效量的化学治疗剂；其中该化学治疗剂选自烷化剂、抗生素、抗代谢物、免疫治疗剂、激素或激素拮抗剂、紫杉烷、类维生素A、生物碱、抗血管生成剂、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、靶向信号转导抑制剂和生物反应调节剂。在另一方面，本专利技术提供抗支原体药剂和/或阻断支原体的膜蛋白P37与对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂在制备用于在对象中治疗多药耐药性（MDR）肿瘤的药物组合物或试剂盒中的应用，其中该多药耐药性肿瘤对至少两类化学治疗剂有耐药性。在本专利技术的一个或多个方面，阻断支原体的膜蛋白P37与对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂是P37抑制剂或膜联蛋白A2抑制剂。在一些实施方式中，P37抑制剂选自反义寡聚体（其选自针对P37蛋白的dsRNA、siRNA和shRNA）以及P37抗体或其片段。在一些实施方式中，膜联蛋白A2抑制剂选自反义寡聚体（其选自针对膜联蛋白A2蛋白的dsRNA、siRNA和shRNA）以及膜联蛋白A2抗体或其片段。在一些实施方式中，P37抗体是多肽A2PP。从阅读本专利技术的以下的详细描述中，本专利技术的一个或多个方面和特征将会是易于感知和理解的。附图说明图1.抗支原体（anti-pcytoplasma）抗生素对肝癌细胞的细胞毒性作用及抗支原体作用。(A)图分别示出了AZI/MXF对HCC97L/Hep3B细胞的细胞毒性作用(×200;bar,50μm)；MTT分析示出分别用浓度增加的AZI/MXF进行处理的HCC97L/Hep3B的细胞活力。(B)使用qPCR测量的相对支原体DNA拷贝数，示出AZI/MXF对HCC97L、Hep3B和PLC/PRF/5细胞处理3、5或7天的抗支原体作用。误差棒表明重复三次进行三次独立试验中的代表性试验的SD。使用成对双尾t检验（pairedtwo-tailedstudent’st-test）确定统计学显著性：与对照组相比，****P<0.0001、***P<0.001、***P<0.01、*P<0.05。图2.单独用不同的化学治疗药物或存在抗支原体抗生素的情况下处理的肝癌细胞的细胞活力。有或没有在指定浓度的MXF/AZI的CDDP、GEM和MX进行处理的HCC97L(A/B/C和D/E/F)、Hep3B（G/H和I/J）和PLC/PRF/5细胞（K/L/M和N/O/P）的细胞活力。误差棒表明重复三次执行的三次独立实验中的代表性试验的SD。通过额外平方和F检验比较logEC50值执行统计学检验。与单独的化学治疗药物对照相比，****P<0.0001、***P<0.001、**P<0.01、*P<0.05。图3.A2PP对HCC97L对化学治疗药物的敏感性的作用。(A,B和C)单独使用GEM、在MXF存在的情况下使用GEM、或GEM与浓度增加的A2PP一起使用进行处理的HCC97L细胞的细胞活力。(D)单独使用MX、在MXF存在的情况下使用MX、或MX与160μM的A2PP一起使用进行处理的HCC97L细胞的细胞活力。通过使用额外平方和F检验比较logEC50值执行统计学检验。与各组相比，****P<0.0001，***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。(E)用不同浓度的A2PP或溶媒DMSO处理72h的HCC97L细胞的细胞活力(×200;bar,50μm)。通过使用成对双尾t检验确定统计学显著性。误差棒表明重复三次进行三次独立试验中的代表性试验的SD。图4.用或不用MXF处理的ABC转运体家族蛋白的表达和亚细胞位置变化。(A)与未处理的对照相比，用MXF处理7天的HCC-97L细胞中ABCB1、ABCC1和ABCG2的蛋白表达。通过使用非成对双尾t检验确定统计学显著性。误差棒表明重复三次进行三次独立试验中的代表性试验的SD。在用MXF处理7天的HCC-97L细胞中的ABCB1(B)、ABC1(C)和ABCG2(D)或未处理的对照的亚细胞位置。ZO-1用于界定膜(×400;bar,100μm)。图5.抗支原体抗生素对鼻咽癌细胞的细胞毒性作用和抗支原体作用。(A)图示出了MXF对CNE1/CNE2/HONE1/SUNE1细胞的细胞毒性作用(×100;bar,100μm)；(B)MTT分析示出用3μg/mLMXF进行处理的CNE1/CNE2/HONE1/SUNE1细胞的细胞活力。(C)使用qPCR测量的相对支原体DNA拷贝数示出了MXF处理CNE1/CNE2/HONE1/SUNE1细胞7天的抗支原体作用。误差棒表明重复三次进行三次独立试验中的代表性试验的SD。通过使用成对双尾t检验确定统计学显著性：与对照组相比，***P<0.001、***P<0.01、*P<0.05。图6.单独使用不同的化学治疗药物或在存在MX本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于在对象中治疗多药耐药性肿瘤的方法，其中所述多药耐药性肿瘤对选自以下化学治疗剂中的至少两类有耐药性：烷化剂、抗生素、抗代谢物、免疫治疗剂、激素或激素拮抗剂、紫杉烷、类维生素A、生物碱、抗血管生成剂、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、靶向信号转导抑制剂和生物反应调节剂，所述方法包含在化学治疗之前、同时、或其之后向需要治疗的所述对象施用治疗有效量的抗支原体药剂和/或阻断支原体的膜蛋白P37与所述对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于在对象中治疗多药耐药性肿瘤的方法，其中所述多药耐药性肿瘤对选自以下化学治疗剂中的至少两类有耐药性：烷化剂、抗生素、抗代谢物、免疫治疗剂、激素或激素拮抗剂、紫杉烷、类维生素A、生物碱、抗血管生成剂、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、靶向信号转导抑制剂和生物反应调节剂，所述方法包含在化学治疗之前、同时、或其之后向需要治疗的所述对象施用治疗有效量的抗支原体药剂和/或阻断支原体的膜蛋白P37与所述对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗支原体药剂选自抗生素和抗氧化剂。


3.根据权利要求2所述的方法，其中所述抗生素选自大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。


4.根据权利要求2所述的方法，其中所述抗生素选自阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、交沙霉素、罗红霉素、螺旋霉素、乙酰螺旋霉素、泰利霉素、四环素、多西环素、米诺环素、替加环素、环丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、氧氟沙星和司帕沙星。


5.根据权利要求1所述的方法，其中所述阻断支原体的膜蛋白P37与所述对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂是P37抑制剂或膜联蛋白A2抑制剂。


6.根据权利要求1所述的方法，其中所述P37抑制剂选自反义寡聚物和P37抗体或其片段，所述反义寡聚物选自针对P37蛋白的dsRNA、siRNA和shRNA。


7.根据权利要求1所述的方法，其中所述膜联蛋白A2抑制剂选自反义寡聚物和膜联蛋白A2抗体或其片段，所述反义寡聚物选自针对膜联蛋白A2蛋白的dsRNA、siRNA和shRNA。


8.根据权利要求6所述的方法，其中所述P37抗体是多肽A2PP。


9.根据权利要求1所述的方法，其中所述多药耐药性肿瘤是支原体诱导的MDR肿瘤。


10.根据权利要求1所述的方法，其中所述肿瘤选自黑素瘤、纤维肉瘤、肝细胞癌、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、成骨性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮细胞肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮细胞肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、鼻咽癌、尤文氏肉瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎性癌、威尔姆斯瘤、宫颈癌、睾丸肿瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、少突胶质细胞瘤、脑膜瘤、神经母细胞瘤和视网膜母细胞瘤。


11.根据权利要求1所述的方法，其中所述化学疗法通过施用一种或多种化学治疗剂实施，所述化学治疗剂选自烷化剂、抗生素、抗代谢物、免疫治疗剂、激素或激素拮抗剂、紫杉烷、类维生素A、生物碱、抗血管生成剂、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、靶向信号转导抑制剂和生物反应调节剂。


12.根据权利要求1所述的方法，其中所述对象是人类。


13.根据权利要求1所述的方法，其中在化学疗法之前执行给药。


14.一种用于在对象中治疗多药耐药性（MDR）肿瘤的药物组合物，其成单位剂型地包含：治疗有效量的抗支原体药剂和/或阻断支原体的膜蛋白P37与所述对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂，治疗有效量的化学治疗剂，和药学上可接受的载体；其中所述化学治疗剂选自烷化剂、抗生素、免疫治疗剂、激素或激素拮抗剂、紫杉烷、类维生素A、生物碱、抗血管生成剂、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、靶向信号转导抑制剂和生物反应调节剂。


15.根据权利要求14所述的药物组合物，其中抗支原体药剂选自抗生素和抗氧化剂。


16.根据权利要求15所述的药物组合物，其中所述抗生素选自大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。


17.根据权利要求15所述的药物组合物，其中所述抗生素选自阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、交沙霉素、罗红霉素、螺旋霉素、乙酰螺旋霉素、泰利霉素、四环素、多四环素、米诺环素、替加环素、环丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、氧氟沙星和司帕沙星。


18.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述阻断支原体的膜蛋白P37与所述对象的宿主细胞的膜联蛋白A2之间的相互作用的药剂是P37抑制剂或膜联蛋白A2抑制剂。


19.根据权利要求18所述的药物组合物，其中所述P37抑制剂选自反义寡聚物和P37抗体或其片段，所述反义寡聚物选自针对P37蛋白的dsRNA、siRNA和shRNA。


20.根据权利要求18所述的药物组合物，其中所述膜联蛋白A2抑制剂选自反义寡聚物和膜联蛋白A2抗体或其片段，所述反义寡聚物选自针对膜联蛋白A2的dsRNA、siRNA和shRNA。


21.根据权利要求19所述的药物组合物，其中所述P37抗体是多肽A2PP。


22.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述多药耐药性肿瘤是支原体诱导的MDR肿瘤。


23.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述肿瘤选自黑素瘤、纤维肉瘤、肝细胞癌、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、成骨性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮细胞肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮细胞肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、鼻咽癌、尤文氏肉瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎性癌、威尔姆斯瘤、宫颈癌、睾丸肿瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄奕俊，刘丹阳，潘俊成，胡杨，朱珠，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44