狂犬病毒疫苗制造技术

本发明专利技术提供了一种用于狂犬病毒的疫苗以及单独或与其他保护剂组合的疫苗的制备和使用方法。

Rabies vaccine

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】狂犬病毒疫苗相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2017年11月06日提交的美国临时申请系列号62/581,955的优先权，其全部内容通过引用并入本文。
本专利技术涉及狂犬病毒的新疫苗。还提供了单独或与其他保护剂组合的疫苗的制备和使用方法。
技术介绍
狂犬病是一种可预防的人畜共患病，可导致人类和其他哺乳动物的脑部炎症。临床上狂犬病是一种急性、进行性脑炎，通常将其分类为狂躁型狂犬病或麻痹型狂犬病。狂躁型狂犬病的特征是躁动不安、易怒和具有攻击性。麻痹型狂犬病的特征是流涎过多、呼吸深沉、呼吸困难、瘫痪并最终昏迷。狂犬病的病原体是狂犬病毒，其能够感染大多数哺乳动物，并在野生动物和易感家畜中保持疾病库。狂犬病毒存在于世界的大部分地区，但在不同地理区域中作为狂犬病毒主要宿主的物种不同，包括野生犬、浣熊、臭鼬、狐狸、蝙蝠和猫鼬等[Robinson等，SeminVetMedSurg(smallAnim)6:203-211(1991)]。狂犬病毒最常见是通过感染动物的咬伤传播。一旦狂犬病毒感染中枢神经系统，就会显示出狂犬病的临床症状。狂犬病毒是一种有包膜的RNA病毒，其编码五个结构蛋白：核蛋白(N)、磷蛋白(P)，基质蛋白(M)、糖蛋白(G)和RNA依赖性RNA聚合酶[Dietzschold等，CritRevImmunol10:427-439(1991)]。糖蛋白(G)被认为是诱导病毒中和抗体的保护性抗原[Cox等，InfectImmun16:754-759(1977)]。已经生产了几种类型的狂犬病疫苗来对抗这种疾病。灭活细胞培养物衍生的全病毒灭活狂犬病毒疫苗是在美国最常用的疫苗。这些全病毒灭活狂犬病毒疫苗需要高水平的抗原，因此需要佐剂。不幸的是，这种佐剂的使用与注射部位的反应性、超敏反应，甚至与猫注射部位肉瘤的感知风险相关。最近，已将一种修饰的活疫苗成功地与口服疫苗诱饵一起用于野生动物的免疫[Mahl等，VetRes45(1):77(2014)]。此外，用于猫的表达糖蛋白(G)的重组疫苗目前已在美国上市销售。核酸疫苗也已用于实验室研究，但目前在美国均未获得批准。多年来，已在疫苗中使用多种载体策略，以努力针对某些动物病原体产生保护作用。一种这样的载体策略包括使用α病毒衍生的复制子RNA颗粒(RP)[VanderVeen等，AnimHealthResRev.13(1):1-9.(2012)doi:10.1017/S1466252312000011；Kamrud等，JGenVirol.91(Pt7):1723-1727(2010)]，其是由几种不同α病毒开发而成，包括委内瑞拉马脑炎病毒(VEE)[Pushko等，Virology239:389-401(1997)]、辛德毕斯(Sindbis)(SIN)[Bredenbeek等，JournalofVirology67:6439-6446(1993)]和塞姆利基森林病毒(SFV)[Liljestrom和Garoff,Biotechnology(NY)9:1356-1361(1991)]。RP疫苗将繁殖缺陷的α病毒RNA复制子递送到宿主细胞中，并在体内表达一种或多种期望的抗原转基因[Pushko等，Virology239(2):389-401(1997)]。当与一些传统疫苗制剂比较时，RP具有有吸引力的安全性和有效性性质[VanderVeen等，AnimHealthResRev.13(1):1-9.(2012)]。已将RP平台用于编码致病性抗原，并且其是几种USDA许可的猪和家禽疫苗的基础。尽管全病毒灭活狂犬病疫苗得到广泛应用，以及还引入了更新的疫苗，但是狂犬病仍然继续对家畜和人类构成威胁。因此，仍存在对新型狂犬病疫苗的长期需要，以帮助保护包括猫、犬、马、雪貂、绵羊和牛在内的哺乳动物免受这种使其衰弱的疾病的侵害。不应将本文引用的任何参考文献解释为承认该参考文献可作为本申请的“现有技术”。
技术实现思路
因此，本专利技术提供了编码一种或多种狂犬病毒抗原的载体。可以将这样的载体用于包含这些载体的免疫原性组合物中。本专利技术的免疫原性组合物可以用于疫苗。在本专利技术的一个方面中，疫苗保护接种疫苗的受试者(例如，哺乳动物)免受狂犬病毒侵害。在这种类型的一个实施方式中，接种疫苗的受试者是犬。在另一个实施方式中，接种疫苗的受试者是猫。在这种类型的一个更具体的实施方式中，接种疫苗的受试者是家猫。在又一个实施方式中，哺乳动物是马(例如，马)。本专利技术还提供了用于激发对狂犬病和其他疾病(例如，其他犬、马和/或猫的感染性疾病)的保护性免疫的组合疫苗。还提供了本专利技术的免疫原性组合物和疫苗的制备和使用方法。在具体的实施方式中，载体是α病毒RNA复制子颗粒，其编码来源于狂犬病毒的一种或多种抗原。在甚至更具体的实施方式中，α病毒RNA复制子颗粒是委内瑞拉马脑炎(VEE)α病毒RNA复制子颗粒。在另外更具体的实施方式中，VEEα病毒RNA复制子颗粒是TC-83VEEα病毒RNA复制子颗粒。在其他实施方式中，α病毒RNA复制子颗粒是辛德毕斯(SIN)α病毒RNA复制子颗粒。在另外其他实施方式中，α病毒RNA复制子颗粒是塞姆利基森林病毒(SFV)α病毒RNA复制子颗粒。在一个替代的实施方式中，裸DNA载体包含编码狂犬病毒糖蛋白(G)抗原的核酸构建体。本专利技术包括本专利技术的所有核酸构建体，包括RNA质粒、RNA复制子、以及本专利技术的所有α病毒RNA复制子颗粒，裸DNA载体和免疫原性组合物和/或疫苗，其包含本专利技术的核酸构建体(例如，RNA质粒、RNA复制子)、α病毒RNA复制子颗粒和/或裸DNA载体。在某些实施方式中，α病毒RNA复制子颗粒编码一种狂犬病毒G抗原。在相关实施方式中，α病毒RNA复制子颗粒编码一种或多种狂犬病毒G抗原或其抗原片段。在另外其他实施方式中，α病毒RNA复制子颗粒编码两种至四种狂犬病毒G抗原或其抗原片段。在具体实施方式中，α病毒RNA复制子颗粒是委内瑞拉马脑炎(VEE)α病毒RNA复制子颗粒。本专利技术还提供了免疫原性组合物，其包含编码一种狂犬病毒G抗原的α病毒RNA复制子颗粒。在相关实施方式中，免疫原性组合物包含编码一种或多种狂犬病毒G抗原或其抗原片段的α病毒RNA复制子颗粒。在这种类型的具体实施方式中，免疫原性组合物包含编码两种至四种狂犬病毒G抗原或其抗原片段的α病毒RNA复制子颗粒。在更具体的实施方式中，免疫原性组合物包含α病毒RNA复制子颗粒，其是委内瑞拉马脑炎(VEE)α病毒RNA复制子颗粒。在其他实施方式中，免疫原性组合物包含两组或多组α病毒RNA复制子颗粒。在这种类型的具体实施方式中，一组α病毒RNA复制子颗粒编码狂犬病毒G抗原或其抗原片段，和第二组α病毒RNA复制子颗粒编码猫杯状病毒(FCV)抗原或其抗原片段。在这种类型的某些实施方式中，FCV抗原来源于恶性全身性猫杯状病毒。在其他实施方式中，FCV抗原来源于经典(F9-样)猫杯状病毒。在另外其他实施方式中，第二组α病毒RNA复制子颗粒编码两种FCV抗原，其中一种来源于恶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫原性组合物，其包含编码狂犬病毒抗原的α病毒RNA复制子颗粒。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171106 US 62/581,9551.一种免疫原性组合物，其包含编码狂犬病毒抗原的α病毒RNA复制子颗粒。


2.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述α病毒RNA复制子颗粒是委内瑞拉马脑炎(VEE)α病毒RNA复制子颗粒。


3.根据权利要求1或2所述的免疫原性组合物，其中所述狂犬病毒抗原是糖蛋白(G)或其抗原片段。


4.根据权利要求1、2或3所述的免疫原性组合物，其包含一种或多种另外的α病毒RNA复制子颗粒，所述另外的α病毒RNA复制子颗粒编码第二狂犬病毒抗原，所述第二狂犬病毒抗原与所述狂犬病毒抗原源自不同的狂犬病毒株。


5.根据权利要求4所述的免疫原性组合物，其中所述第二狂犬病毒抗原是糖蛋白(G)或其抗原片段。


6.根据权利要求4或5所述的免疫原性组合物，其中所述一种或多种另外的α病毒RNA复制子颗粒是VEEα病毒RNA复制子颗粒。


7.根据权利要求1、2、3、4、5或6所述的免疫原性组合物，其中所述狂犬病毒糖蛋白(G)包含与SEQIDNO:2的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列。


8.一种助于预防由狂犬病毒引起的疾病的疫苗，其包含权利要求1、2、3、4、5、6或7所述的免疫原性组合物和药学上可接受的载体。

【专利技术属性】
技术研发人员：I·塔佩，
申请(专利权)人：英特维特国际股份有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL